大黄中蒽醌成分提取方法

第31卷第2期河北理工大学学报(自然科学版)V ol131No12 2009年5月Journal of Hebe i Polyt echnic U niversity(N atural Sc i e nce Edition)M ay12009

文章编号:1674-0262(2009)02-0131-03

大黄中蒽醌成分提取方法

马玉哲,张俊杰,李红霞

(河北理工大学化工与生物技术学院,河北唐山063009)

关键词:蒽醌成分;浸渍法;超声波法

摘要:采用浸渍法和超声波法分别对大黄中的蒽醌成分进行了提取,选出了最佳提取工艺

条件,并对两种提取方法的提取率进行了比较,得出超声波法提取率明显高于浸渍法。

中图分类号:R28412文献标志码:A

自然界中的蒽醌类物质在植物中分布比较广泛,是大黄、何首乌、决明子、虎杖等中药材的主要活性成分。在大黄中蒽醌的成分含量约为3%。现代药理学研究表明,蒽醌类成分有广谱抗菌、保肝利胆、抗肿瘤、加快早骨细胞分化[1]、利尿、改善肾功能、提高免疫力[2]等多方面作用。张明等[3]研究了超微粉碎与普通粉碎技术对大黄蒽醌浸出率的影响,得出结论中药大黄药材粒径对大黄蒽醌浸出的影响非常显著。金波等[4]采用煎煮法从大黄中提取蒽醌成分,大黄加水重沸煎煮3次,每次加水15倍量,20m in每次,提取效果最佳。H e mw i m on等[5]用微波辅助法从鸡眼藤根中提取蒽醌成分,得到了较高的回收率。黎海彬等[6]研究了决明子中蒽醌类成分的超声波提取的最佳工艺条件。为了探索更好的提取大黄蒽醌的方法,本文采用浸渍法和超声波法以大黄蒽醌的提取量为目的。考察了提取时间,溶剂用量,溶剂浓度等因素对提取量的影响,通过正交试验进行筛选,优化大黄蒽醌的最佳提取工艺,并对两种提取方法进行了比较。

1实验

111实验材料

大黄药材,80目,购买于唐山市唐人医药;大黄素标准品,纯度98%,购买于陕西省西安天园生物制剂厂;其他化学试剂,均为分析纯。

112实验仪器

UV-1100分光光度计,上海天美科学仪器有限公司;H66025T超声清洗机,无锡超声电子设备厂;电热恒温水浴锅,北京西城区医疗器械厂;RE52-99旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂。

113实验方法

11311蒽醌成分的提取方法

(1)浸渍法

精密称取大黄015g,加人20%硫酸1mL,加人乙醇溶液,放入恒温水浴锅中浸提后,用15m L氯仿分三次萃取,然后用100mL的N a OH(011m o l/L)溶液萃取,测定溶液的吸光度值。

(2)超声波法

精密称取大黄015g,加人20%硫酸1mL,加人乙醇溶液,放入超声波中超声后,用15m L氯仿分三次萃取,然后用100mL的N a OH(011m o l/L)溶液萃取,测定溶液的吸光度值。

11312蒽醌含量测定

取大黄素31375m g,用乙醇定容至25m L,分别取此溶液015,110,115,210,215,310,315,410收稿日期:2008-09-25

mL,蒸干后,用浓度为110m o l/L的N a OH定容至10mL,在525n m下,测吸光度,绘制工作曲线在525 n m处吸光度值与大黄素的含量呈线性。其线性回归方程C=012053A-010019,相关系数r=019989,据此可建立定量测定蒽醌成分含量的分析方法。

2结果与讨论

211浸渍回流法

21111正交实验

本实验采用正交试验法对提取时间、溶剂浓度、溶剂用量、提取温度4个因素进行考察,每个因素设3个水平,采用L9(34)正交试验表安排实验,见表1

表1浸渍法正交试验提取大黄中蒽醌水平表

水平

因素

A B C D

提取时间/h溶剂浓度/%溶剂用量/m L提取温度/e 111060245 211575460 321090675

实验结果见下表

21112结果分析

(1)直观分析

a从极值R来看,RC=011014RB=010564 RD=010464RA=01020,由于级差大小反映了因子影响指标的主次,所以第三列极差最大说明溶剂用量C是重要因素,主要次序是:

主次

C B

D A

(溶剂用量)(溶剂浓度)(温度)(时间)

b从上表中可以看出,时间A以A2(115h)平均指标最高;溶剂浓度B以B3(90%)平均指标最高;溶剂用量C以C3(6mL)平均指标最高;温度D以D2(60e)平均指标最高。因而选出方案A2B3C3D2,即提取时间为115h,溶剂浓度为90%,溶剂用量为6mL(12倍用量),提取温度为60e c正交表中的第3号实验A1B3C3D3和上面分析出来的最优方案A2B3C3D2进行实验,加以比较,实

验结果A

2B

3

C

3

D

2

的C值为01173mm o l/L,说明

A2B3C3D2是最优方案。

(2)方差分析

F检验能判断因素的显著性。由F分布表可得, F011(2,2)=9100,F0105(2,2)=19100。从因素C的F值25160大于19100即有95%的可信度,说明C是较显著的,对大黄中总蒽醌的提取影响显著。A、B和D的F值小于9100,即置信度不到90%,说明其为不显著因素。

212超声法

21211正交实验

本实验采用正交试验法对提取时间、溶剂用量、溶剂浓度3个因素进行考察,每个因素设3个水平,采用L9(34)正交试验表安排实验,见表4

实验结果见表5。

表2L9(34)正交试验设计及测定结果

试验号A B C D C(mmo l/L) 1111101010

2122201105 3133301168 4212301048 5223101138 6231201119 7313201144 8321301019 9332101082Ñ01284012030114801230

Ò01305012610123601368

Ó01245013700145001236

m101095010680104901077

m201102010870107901123

m301082011230115001079

R01020010560110101046

T111021017290153301829

T201881019400184711324

T301881113311161901847

Ñ201081010410102201053

Ò201093010680105501135

Ó201060011370120301055

S01001010050101601004

表3方差分析表

因素方差S自由度f S/f F值显著性A0100063201000311100

B0100481201002407165

C01016082010080425160*

D0100405201002036145

132河北理工大学学报(自然科学版)第31卷