细菌分布

5、咽喉中细菌的检查（1块平板）
Baidu Nhomakorabea
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二、外界因素对细菌的影响
（一）湿热对细菌的杀灭作用 （二）紫外线对细菌的杀灭作用 （三）消毒剂对细菌的杀灭作用 （四）抗生素对细菌的杀灭作用
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（一）温度对细菌的影响
热力杀菌的原理：是通过加热脱水干燥和大分子 变性。可使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性， 新陈代谢发生障碍，细菌因而死亡。
紫外线杀菌的结果
uv30’
班级、姓名/学号、 大肠 枯草
培养箱
接种大 肠杆菌
接种枯 草杆菌
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（三）消毒剂对细菌的影响
化学消毒剂杀菌的原理：使微生物蛋白质凝固与变 性，致使细菌代谢发生障碍而死亡；干扰微生物 酶系统和影响其代谢；损伤细胞膜：醇类、酚类、 表面活性剂等损伤细菌细胞膜，引起细胞膜的渗 透性改变，导致细菌死亡。 消毒剂：2%碘酒棉球，75%酒精棉球。 方法：以碘酒（酒精棉球）消毒手指前后，分别 涂抹平板培养基， 37℃培养24h后，观察结果。
实验四
细菌的分布与外界因素对细菌的影响
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目的要求
1．了解细菌在自然界和正常人体的分布； 2．掌握物理因素、化学因素、生物因素对 细菌的不利影响； 3．理解消毒、灭菌及无菌操作的重要意义；
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基本概念
1、消毒：用物理或化学方法杀死物体上病原 微生物的方法。如注射前用2%的碘酒在局部皮 肤涂擦；用75%的酒精棉球擦拭体温表等。用 于消毒的化学药物称为消毒剂。 2、灭菌：用物理或化学方法清除或杀灭物体 上所有微生物（包括病原微生物、非病原微生 物、繁殖体和细菌的芽胞）的方法。 3、无菌操作：防止微生物进入机体或物体的 操作方法，称无菌操作或无菌技术。如外科手 术，细菌接种等。
药敏纸片
庆大霉素、菌必治、青霉素、丙氟哌酸
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药敏试验结果判断
药敏试验结果判定标准 抑菌圈直径（毫米）敏感性 ＞20mm极敏感 15-20mm高敏感 10-14mm中敏感 ＜10mm低敏感 0不敏感
抑菌圈
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葡 萄 球 菌
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大 肠 杆 菌
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常用药物抑菌圈直径大小来判断结果的标准，如下
抗菌药物 中介 AMK9阿米卡星 30ug ≤14 15-16 CLI 克林霉素 2ug ≤14 15-20 GEN庆大霉素 10ug ≤12 13-14 OXA苯唑西林 1ug ≤10 11-12 PEN青霉素 10U ≤28 AMS舒巴坦 10/10ug ≤11 12-14 AMP氨卞西林 10ug ≤13 14-16 PIP哌拉西林 100ug ≤17 FZN头孢唑碄 30ug ≤14 15-17 CAZ头孢它定 30ug ≤14 15-17 CIP环丙沙星 5 ug ≤15 16-20 ATM氨曲南 30ug ≤15 16-21 FRX头孢呋辛 30ug ≤14 15-17 IMP亚氨配南 10ug ≤13 14-15 VAN万古霉素 30ug ≥15 SXT复方新诺明1.25/23.75ug≤10 11-15 敏感 ≥17 ≥21 ≥15 ≥13 ≥29 ≥15 ≥17 ≥18 ≥18 ≥18 ≥21 ≥22 ≥18 ≥16 ≥16
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方 法
在超净工作台中或酒精灯旁，用无菌棉签或经酒精灯 火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式 将菌液均匀涂布到平皿中的固体培养基表面。 然后用无菌镊子将纸片放于固体培养基表面并轻压， 使纸片与培养基表面完全接触。为了能准确观察结果， 要求药敏纸片均匀分布于培养基上，位置安排适中， 防止出现抑制圈重叠。一般各纸片中心相距应大于 24mm，可在平皿中央贴一片，外周等距离贴5－6片。 记住每种药敏纸片的名称。 贴完纸片的平皿15分钟后再置于37℃温箱中培养16－ 24小时，观察记录结果。以药敏纸片周围没有肉眼可 见生长物区域为抑菌圈，根据抑菌圈直径大小判断细 菌对抗菌药的敏感性。 LOGO
（二）紫外线对细菌的杀灭作用
（三）消毒剂对细菌的杀灭作用 （四）抗生素对细菌的杀灭作用
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一、细菌的分布
1、空气中的细菌检查（1块平板）
2、水（自来水）中细菌的检查（1块平板）
3、周围环境中细菌检查（1块平板） 自由发挥（如笔、硬币） 4、皮肤（手）上细菌的检查（结合化学消毒 剂试验）（1块平板）
枯草杆菌 枯草杆菌 金黄色葡 菌球菌或 大肠杆菌 + 金黄色葡 菌球菌或 大肠杆菌 －
100 ℃ 10m 37℃培养 24h后
+
－
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枯 草 杆 菌
枯 草 杆 菌
大 肠 杆 菌
大 肠 杆 菌
100℃ 5min
100℃ 5min
37℃ 24h
菌 膜
澄 清
浑 浊
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枯 草 杆 菌
大 肠 杆 菌
枯 草 杆 菌
大 肠 杆 菌
普通条件培养下细菌生长状况
煮沸杀菌后细菌生长状况
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（二）紫外线对细菌的影响
原理：紫外线可以诱发细菌DNA形成胸腺嘧啶二聚 体，使细菌死亡。 取有芽胞细菌（枯草杆菌）、无芽胞细菌，设置对 照后，以紫外线照射30min， 37℃培养24h，观察 结果。
枯草杆菌 紫外线30min 37℃培养24h 后 LOGO + 枯草杆菌 － 金黄色葡菌球 金黄色葡菌球 菌或大肠杆菌 菌或大肠杆菌 + －
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（四）抗生素对细菌的影响（药敏试验 ）
原理
影响细胞壁的合成：β-内酰胺类抗生素，如青 霉素、头孢曲松。 影响细胞膜的功能：多黏菌素、两性霉素B； 影响蛋白质的合成：氨基糖苷类、四环素类、大 环内酯类。如庆大霉素为氨基糖苷类。 影响核酸代谢：喹诺酮类、利福霉素类、磺胺类。
如丙氟哌酸为第二代喹诺酮类抗菌药；
目的要求： 认识高温（煮沸法）对细菌繁殖体和芽胞的作用 材料： 1、菌种：枯草杆菌（有芽胞） 大肠杆菌 （无芽胞） 2、肉汤培养基、水浴锅
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实验方法
检测对象：大肠杆菌（或金黄色葡萄球菌）、枯 草杆菌; 步骤：分别取上述两种细菌，设置对照组后，分 别沸水浴5-10min， 37℃培养24h，观察结果。
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实验材料
菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌； 培养基：普通平板、液体培养管 试剂：2%碘酒棉球、75%酒精棉球、药敏纸片、无菌 生理盐水 器材：接种环、酒精灯、镊子等
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实验内容与方法
一、细菌分布
（一）细菌在自然界的分布
（二）细菌在正常人体的分布 二、外界因素对细菌的不利影响 （一）湿热对细菌的杀灭作用