性传播疾病的实验室检测
性传播疾病STD实验室相关检查-业务学习用详解
【 注 意 事 项 】 1.实验环境适宜温度为23℃~29℃;抗原应保存 在4℃冰箱;应防止冻结,以免破坏;实验前抗原 恢 复 到 室 温 。 2 .校准针头, RPR 、 TRUST 等抗原 ( 用 9 号针头 ) 为 60±1滴/ml,USR抗原(用12号针头)为45±1滴/m1。 一 般 试 剂 盒 内 已 有 配 套 专 用 针 头 。 3.用旋转式摇床,不用平衡式振荡仪。 4 . 试 验 完 毕 , 立 即 观 察 结 果 。
3. 快速血浆反应环状卡片试验(rapio plasma reagin card test, R P R ) 原理与USR试验基本相同,其优点是RPR抗原中加入了活性碳颗粒, 试验在特制的白色纸卡上进行,因此,容易判断结果,肉眼即可观察, 不需显微镜,血浆也可进行检测。
(1) RPR定性试验 ①吸取 50 µ l 血清或血浆放在白色卡片圈内,并均 匀涂布整个圈内 ( 每张卡片有 10 个或 12 个反应圈 ) 。 ②将RPR抗原轻轻摇匀,用标准针头吸取抗原,每 个 标 本 中 加 1 滴 抗 原 。 ③将卡片置旋转器旋转 8min , (100 ± 5) 转 /min 。 ④立即在明亮光线下观察结果。
暗视野显微镜检查临床意义
1.可确证梅毒-直接检查到梅毒螺旋体 2.对早期现症梅毒检测最好的方法(一期、二期梅毒皮损或淋巴节结、 孕妇羊膜穿刺)
需要仪器设备:暗视野显微镜
选择试验注意事项
1.清洁皮损表面
用生理盐水清洁,不能用消毒液 2.取材-渗出液、尽量避免出血(降低阳性率) 3.口腔溃疡要谨慎 4.阴性结果不能排除梅毒可能性 - 取材不当、皮损致数量不足、近
期使用抗生素、损害接近自然消退等
梅毒血清学检查
当机体感染梅毒螺旋体后,经过 一定潜伏期,在血清中产生一定数量 的抗类脂质抗体(非特异性的反应素) 和抗密螺旋体抗体(特异性免疫球蛋 白),主要是IgG抗体,因此,可以用 各种免疫学的方法来检测反应素或抗 体,协助梅毒的诊断。
性病实验室检测方法
梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA) 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) 化学发光免疫分析法(CLIA) 梅毒IgM抗体检测(IgM)
梅毒螺旋体蛋白印迹试验(WB)
梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA)
敏感性 81~100%。
特异性 100%
淋球菌培养
培养法为诊断淋病的金标准. 对女性淋病的确诊应做淋球菌培养 从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。 培养的敏感性81~100%。 培养的优点有: — 特异性极高(100%); — 可发现无症状淋球菌感染患者; — 可确诊儿童性虐待; — 可用于进一步作药敏试验; — 可用于治疗后的判愈试验。
⑶试验操作 ①血清量的控制
②试剂量的控制
③旋转仪速度和时间的控制
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非梅毒螺旋体抗原血清试验
1、原理: 梅毒螺旋体感染人体后,宿主 会产生抗类脂抗原的抗体,可检测梅毒 患者血中的抗类脂抗原的抗体
2、方法:
快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) 甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)
RPR
定性试验 •在纸卡圆圈中加入50μL待检血清,涂满整 个圆圈 •使用滴管和专用针头(60滴/mL),加1 滴抗原悬液 •旋转100rpm 8min •立即判断结果
梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如TRUST等)初
筛阳性标本的确证试验。
梅毒患者经过抗梅治疗后,TPPA等梅毒螺旋体 抗体试验仍可阳性,故TPPA等试验阳性不能作 为疗效观察的指标。
TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染,应 结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
性病实验室诊断标准及应用
梅毒孕产妇所生儿童随访与先天梅毒感染状态监测流程
梅毒产妇所生新生儿
不能开展暗视野、IgM
能开展暗视野、IgM
阴 性
连续2次阴性
采静脉血、RPR定量
每3个月RPR
定量,观察 症状
预治疗
阴
阳
性
性
滴度﹤母亲 4倍,无症
状
滴度﹤母亲 4倍,有症
状
治疗、随 访
6月后RPR未阴, 滴度低水平
RPR滴度不下降
或上升,结合症 状
硬下疳
非梅毒螺旋体抗原血清试 验阳性源自确诊病例 (实验室诊断病 例)
同上
同上
暗视野检查阳性; 或梅毒螺旋体抗原血清试 验阳性,非梅毒螺旋体抗 原血清试验阳性;
分期/ 病例分类 类
二期梅 疑似病例 毒
确诊病例 (实验室诊断病 例)
三期梅 疑似病例 毒
确诊病例 (实验室诊断病 例)
病史
性接触史, 或性伴感染 史 同上
EIA+:confirm with TPPA or TPHA。 • 2个试验不一致:免疫印迹。 • VDRL/RPR滴度1:16、IgM阳性为梅毒活动的标志之一。 • 治疗当天滴度为判断疗效的最佳依据。 • 梅毒早期VDRL/RPR 滴度可能较低。
二、淋病的实验室诊断标准
淋病诊断要点: 淋病诊断标准根据卫生部卫生行业标准《淋病诊断标准》(WS268-2007)。淋
1:8习 惯?
第2 次收 费?
原血清
试验 (TPPA)
阳 性
阴 性 报告:RPR
阴性 阴 性
?前带、早 期
报告:RPR阴性 滴度
TPPA阳性
报告:RPR阳性 TPPA阴性
孕产妇梅毒检测及服务流程
性病实验室检测流程
性病实验室检测流程性病,即性传播疾病,是一组通过性接触、类似性行为及间接接触传播的传染性疾病。
准确的实验室检测对于性病的诊断、治疗以及预防控制都具有重要意义。
下面为您详细介绍性病实验室检测的流程。
一、检测前准备1、患者准备医生会详细询问患者的病史,包括性接触史、症状出现的时间和特征、既往治疗情况等。
患者需要提前告知医生正在使用的药物,因为某些药物可能会影响检测结果。
患者在检测前应避免性生活、阴道冲洗或使用阴道栓剂等,以免干扰检测结果。
2、样本采集用品准备根据检测项目的不同,准备相应的采集器具,如无菌拭子、采血针、采血管、无菌容器等。
确保采集器具的无菌性和有效期。
3、实验室准备实验室环境应保持清洁、整齐,并定期进行消毒。
检测仪器设备应经过校准和维护,确保其性能良好、运行正常。
准备好所需的检测试剂,并检查试剂的有效期和质量。
二、样本采集1、梅毒检测样本采集血清学检测:通过静脉采血获取患者的血液样本,一般采集 3 5ml 血液,注入干燥的采血管中,待血液凝固后离心分离血清。
暗视野显微镜检查:对于一期梅毒的硬下疳或二期梅毒的皮损,用无菌生理盐水清洁后,用无菌拭子轻擦皮损表面,获取渗出液或组织液,制成涂片进行暗视野显微镜检查。
2、淋病检测样本采集男性患者:用无菌拭子插入尿道口 2 4cm,轻轻旋转拭子采集分泌物。
女性患者:先用无菌棉签清除宫颈口的分泌物,然后用无菌拭子插入宫颈管 1 2cm,轻轻旋转拭子采集分泌物。
3、生殖道沙眼衣原体感染检测样本采集男性患者:用无菌拭子插入尿道口 2 3cm,轻轻旋转拭子采集分泌物。
女性患者:可采集宫颈分泌物或尿液样本。
采集宫颈分泌物时,方法同淋病;采集尿液样本时,要求患者留取首次晨尿的中段尿 10 20ml。
4、尖锐湿疣检测样本采集对于可见的疣体,可直接用手术剪刀或活检钳取部分疣体组织。
对于亚临床感染或潜伏感染的病灶,可通过醋酸白试验确定病变部位,然后采集样本。
5、生殖器疱疹检测样本采集用无菌拭子采集水疱液或溃疡表面的分泌物。
检验科性病检测流程
检验科性病检测流程Sexually transmitted diseases (STDs) are a serious public health concern worldwide, and regular testing is essential to preventing their spread. When it comes to STD testing in a laboratory setting, the process can vary depending on the type of test being conducted. For testing for STDs in the genital area, such as chlamydia and gonorrhea, samples are usually collected through swabs. These swabs are then sent to the laboratory for analysis.性传播疾病(STD)是全球一项严重的公共卫生问题,定期检测对于预防其传播至关重要。
在实验室环境下进行STD检测时,检测流程可能会根据所进行的检测类型而有所不同。
对于在生殖器区域进行STD测试,例如沙眼衣原体和淋病,通常会通过拭子收集样本。
这些拭子随后将被送往实验室进行分析。
After the samples are collected, they undergo a series of tests to identify the presence of STDs. This may include tests such as polymerase chain reaction (PCR) testing, which is commonly used to detect the genetic material of STD-causing bacteria or viruses.Additionally, samples may be cultured to grow any bacteria present, allowing for a more accurate diagnosis.在收集样本后,它们将进行一系列测试来确定STD的存在。
性传播疾病STD实验室相关检查业务学习用ppt课件
两组试验: 1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验 2.梅毒螺旋体抗原血清学试验
两组试验的目的都是检测抗体
非梅毒螺旋体抗原血清学试验(抗-脂质抗体-非特异性) 梅毒螺旋体抗原血清学试验(抗-梅毒螺旋体抗体-特异性)
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非特异性梅毒的血清学初筛试验
方法: 1.性病研究实验室试验——VDRL 2.不加热血清反应素试验——USR 3.快速血浆反应素环状卡片试验——RPR 4.不加热甲苯胺红血清试验——TRUST
孕妇羊膜穿刺) 需要仪器设备:暗视野显微镜
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选择试验注意事项
1.清洁皮损表面 用生理盐水清洁,不能用消毒液
2.取材-渗出液、尽量避免出血(降低阳性率)
3.口腔溃疡要谨慎
4.阴性结果不能排除梅毒可能性-取材不当、皮损致数量不足、近 期使用抗生素、损害接近自然消退等
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梅毒血清学检查
【原理】当机体感染梅毒螺旋体后,经过 一定潜伏期,在血清中产生一定数量 的抗类脂质抗体(非特异性的反应素) 和抗密螺旋体抗体(特异性免疫球蛋 白),主要是IgG抗体,因此,可以用 各种免疫学的方法来检测反应素或抗 体,协助梅毒的诊断。
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梅毒
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一、梅毒的临床分期
后天梅毒 : 一期梅毒 二期梅毒 三期梅毒(晚期梅毒) 先天梅毒(胎传梅毒)
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梅毒一期皮损-硬下疳
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梅毒二期皮损
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梅毒晚期损害
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二、梅毒的实验室诊断
1.检查病原体的试验 2.检测抗体—血清学检查
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检查病原体的试验
1.暗视野显微镜检查法(WHO推荐) 2.Fontana-Tribondean镀银染色法(难、敏感性差)
表浅部真菌: 股癣
梅毒的实验室检查与技术规范
梅毒的实验室检查与技术规范概述梅毒(syphilis)是一种由螺旋体梅毒螺旋体(Treponema pallidum)引起的性传播疾病。
梅毒的及时检测和确诊对于治疗及防止梅毒的传播至关重要。
本文将探讨梅毒的实验室检查方法和相关的技术规范。
实验室检查方法血清学检测血清学检测是梅毒的首选检测方法,常用的血清学检测方法包括非梅毒螺旋体凝集试验(non-treponemal tests)和梅毒螺旋体特异性试验(treponemal tests)。
非梅毒螺旋体凝集试验包括梅毒螺旋体血清检测(VDRL)和荧光梅毒螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS)。
这些试验通过检测抗体反应来判断是否感染梅毒,并可评估感染程度。
梅毒螺旋体特异性试验主要包括T. pallidum颗粒凝集试验(TP-PA)和ELISA试验。
这些试验可以进一步证实梅毒感染,并对阳性样本进行确认。
分子生物学检测分子生物学检测方法可以直接检测梅毒螺旋体的基因组或其特异性基因片段。
常见的分子生物学检测方法包括聚合酶链式反应(PCR)和DNA杂交试验。
PCR技术可在早期感染时检测到梅毒螺旋体的DNA,具有高度敏感性和特异性。
DNA杂交试验主要用于检测神经梅毒,可检测到T. pallidum在脑脊髓液中的存在。
细菌学检测细菌学检测是直接观察样本中是否存在活动的梅毒螺旋体。
常用的细菌学检测方法有暗视野显微镜检查、苏木精-伊红染色和螺旋体培养。
在显微镜下观察暗视野试验时,活动的梅毒螺旋体会显示出旋转的运动。
苏木精-伊红染色可以染出梅毒螺旋体的形态。
螺旋体培养可以将梅毒螺旋体培养出来,但是需要较长的培养周期,并且并非常规检测方法。
技术规范为确保梅毒实验室检查结果的准确性和可靠性,以下是一些常见的技术规范:1.实验室人员需接受充分的培训,熟悉各项检测方法和技术操作流程,并按照操作规程执行。
2.所有试剂和材料必须符合质量管理规范,并保持良好的保存和标识。
3.实验室必须建立完善的质量控制体系,包括使用标准品进行日常质控、参加外部质控项目以及进行内部质量评估。
性病实验室检测方法课件 (2)
建立严格的试剂储存管理制度,确保试剂在有效 期内使用。
设备维护
定期对检测设备进行维护和校准,确保设备性能 稳定可靠。
人员培训与资质认证
培训计划
制定并实施人员培训计划,提高检测人员的专业知识和技能。
资质认证
对检测人员进行资质认证,确保其具备从事性病实验室检测的资格。
人员健康管理
建立人员健康档案,定期进行健康检查,防止因人员健康问题影响 检测结果。
样本处理与运
样本处理
采集的样本需要进行适当的处理, 如离心、过滤、沉淀等,以去除 杂质和不必要的细胞成分,提高 检测的敏感性和特异性。
样本运输
处理后的样本需要按照规定的温度 和时间进行运输,以确保样本的新 鲜度和完整性,同时应避免交叉感 染和污染。
注意事项
样本处理和运输过程中应遵循相关 规定和操作规程,确保样本质量和 安全性。
核酸检测
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聚合酶链式反应(PCR) 通过扩增特定的DNA片段,用于检测淋病奈瑟氏 菌、生殖器疱疹病毒等病原体。
实时荧光定量PCR
在PCR基础上加入荧光标记,实现实时监测,提 高检测的灵敏度和特异性。
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基因测序
对病原体基因进行测序分析,用于高度变异病原 体的检测和分型,如HIV病毒。
03
性病实验室检测流 程
采集样本
采集方法
采集样本时应根据不同性病病原体选 择合适的采集方法,如生殖器疱疹可 采集水疱液或溃疡表面渗出物,淋病 可采集尿道分泌物等。
采集部位
注意事项
采集样本时应遵循无菌操作原则,避 免交叉感染和污染,同时应确保采集 的样本量足够用于检测。
采集样本时应选择病原体含量较高的 部位,如生殖器疱疹可采集病变部位 渗出液,淋病可采集尿道口分泌物等。
常见性病实验室检测技术
0.90%胆固醇
抗原需新鲜配制 不能保存
待检血清需灭活
目前主要用于脑脊液检查
是VDRL试验的改良
抗原组成:同VDRL,另含
(1)乙二胺四醋酸(EDTA) 使抗原可 长期保存,能维持一年;
(2)含有氯化胆碱 对血清能起 到化学灭活的作用 不必加热灭活
(3)制成试剂盒 使用方便
显微镜观测结果
梅毒概述(三)
疑似病例、确证病例诊断依据: 病史 症状
实验室检查
梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义
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常用梅毒实验室检测方法
病原学检测
血清学检测
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梅毒病原体
➢ 小而纤细的螺旋状微生物 ➢ 长5~20μm,粗细<0.2μm ➢ 有6 ~ 12个规则的螺旋
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梅毒螺旋体抗原血清学试验方法
梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA)
梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)
梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) 化学发光免疫分析法(CLIA) 梅毒螺旋体蛋白印迹试验(WB)
方法:病原学检查的主要方法有暗视显微 镜检查、镀银染色法和直接荧光法
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病原学检查的临床意义
病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体,在临床 可确诊梅毒,且具有快速、方便、易操作的 特点。
螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最 佳方法,对于患者的早期诊断、及时 治疗、预后和尽早切断传染源都有十 分重要的意义。
全国性病流行状况
1995-2010全国梅毒流行状况
性病实验室检方法
病原体
淋球菌 梅毒螺旋体 生殖器疱疹病毒
生殖道沙眼衣原体 乳头瘤病毒
HIV病毒 杜克雷噬血杆菌 衣原体 念珠菌 滴虫 疥虫 阴虱 肝炎病毒 ---
我国主要流行的性传播疾病(性病)
50-60年代 经典性病 梅毒 淋病 软下疳 性病性淋巴肉芽肿 80-90年代 监测性病 梅毒 淋病 软下疳 性病性淋巴肉芽肿 非淋菌性尿道炎 生殖器疱疹 尖锐湿疣 HIV/AIDS
病原学检查的临床意义
病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体,在临 床可确诊梅毒,且具有快速、方便、易操 作的特点。 螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方 法,对于患者的早期诊断、及时治疗、预 后和尽早切断传染源都有十分重要的意义 。 如未见到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒 的可能性
暗视野显微镜检查直接检查– 暗示野显微镜检查和免 疫荧光检测
原理
利用暗视野显微镜和荧光方法直接观察梅毒螺旋体 的形态 容易 出结果时间短 敏感性达到80% 需要受过专门培训并有丰富经验的实验人员 对标本采集要求高 需要在没有开始治疗之前检测
优点
缺点
实验室检查
暗视野显微镜 免疫荧光
临床分期和传播途径
临床分期
潜伏期 (3 周左右) 一期梅毒 (硬下疳) 二期梅毒 (梅毒疹) 潜伏梅毒 (无临床症状) 三期梅毒 先天梅毒
性传播 母婴传播 血液传播 少数通过接吻、哺乳、输血、接触病人污染的衣物 、毛巾和医疗器械等
传播途径
传染途径
性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的一年内最具 有传染性 随着病期的延长,传染性越来越小 到感染后4年,通过性接触一般无传染性
性传播疾病实验室相关检查业务学习用ppt课件
主要指:
梅毒(syphilis)
淋病(gonorrhea)
性病肉芽肿 软性下疳四种 又称—经典性病
2019 4
概念更新
上世纪70年代以来发现
许多病原体也可以通过性生活传播
概念有了大幅度的更新 迄今为止大约已发现20余种性病 同时: 四种性病大都有了明确诊断手段及治疗方法,明显地得到了抑制
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1. 性 病 研 究 实 验 室 试 验 ( venersal disease research laboratory test , VDRL) : VDRL 试验所用抗原是从牛心中提取心磷脂加 上卵磷脂和胆固醇,梅毒螺旋体在破坏组织的过 程中,体内释放一种抗原性心磷脂,它刺激机体 产生反应素,这种反应素与牛心中提取的心磷脂 在 体 外 有 抗 原 - 抗 体 反 应 。
阿米巴病(溶组织阿米巴原虫)
蓝氏贾第鞭毛虫感染
体表寄生虫:
阴虱病(阴虱)
阴部疥(疥螨)
2019
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让患者能接受
社会性很强的疾病
2019
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我国重点防治的性病
艾滋病 梅毒
(AIDS)
(syphilis)
尖锐湿疣(condyloma acuminatum) 淋病(Gonorrhea) 生殖器疱疹(genital herpes) 非淋菌性尿道炎(NGU) 软下疳(chancroid)
3.单克隆免疫银光法(DFI)-PCR
2019
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2019
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暗视野显微镜下见纤细螺旋状微生物, 长约 4 ~ 14 μ m ,宽约 2 μ m , 8 ~ 14 个规则的螺旋,折光性强,运动缓慢, 有规律。 螺旋有三种活动方式,旋转式, 蛇形 式,伸缩式。
性病实验室检方法教学教材
检测血清中特异性抗体或抗原,操作简便、快速。
02
免疫荧光技术
利用荧光标记的抗体与病原体抗原结合,可视化检测病原体。
03
化学发光免疫分析技术
具有高灵敏度、高特异性、线性范围宽等优点,已广泛应用于性病检测
领域。
其他新型技术介绍及发展趋势
流式细胞术
生物传感器技术
可对单个细胞进行多参数、快速的定量分 析,为性病检测提供新的手段。
了解各种性病实验室检测的基本原理 和操作流程。
结合临床实际进行分析
将实验室结果与患者的病史、症状等 相结合进行综合判断。
注意报告的时效性和局限性
了解报告的有效期限以及在遇到疑问或矛盾时,及时与实验室 联系并寻求专业意见。
06 新型技术在性病检测中应 用前景
梅毒血清学试验
包括非特异性梅毒螺旋体抗原试验和特异性梅毒螺旋体抗原试验。前者常用于 临床筛选及判定治疗的效果,后者主要是用于判定试验,一旦患有梅毒,该试 验将终身阳性。
淋病实验室检测
涂片检查
取患者尿道分泌物或宫颈分泌物,作 革兰氏染色,在多形核白细胞内找到 革兰氏阴性双球菌,有诊断价值。
培养检查
淋球菌培养是诊断的重要佐证,培养 法对症状很轻或无症状的男性、女性 病人都是较敏感的方法,只要培养阳 性就可确诊。
分类
根据病原体不同,性病可分为细 菌性性病(如淋病、软下疳等) 和病毒性性病(如艾滋病、生殖 器疱疹等)。
流行病学特点与传播途径
• 流行病学特点:性病在全球范围内广泛流行,发病率高, 且呈年轻化趋势。
02 常见性病实验室检测方法
梅毒实验室检测
暗视野显微镜检查
适用于有硬下疳损害的患者,可取皮损分泌物在暗视野显微镜下观察,见到可 运动的梅毒螺旋体即可确诊。
性传播疾病的实验室检测
生殖道沙眼衣原体感染-病原体
非淋菌性尿道炎(NGU)是指由性接触传染的一种尿道炎,它在临床上有尿道炎的表现,但在尿道分泌物中查不到淋球菌。
40-50%由沙眼衣原体引起,20-30%由支原体引起,尚有10-20%由阴道毛滴虫、白色念珠菌和单纯疱疹病毒等引起。
病原学
添加标题
革兰阴性、专性细胞内寄生的微生物
单击此处添加小标题
免 疫
单击此处添加小标题
当螺旋体从体内清除后可再感染,而且仍可出现一期梅毒症状
单击此处添加小标题
以细胞免疫为主,体液免疫只有一定的辅助防御作用
单击此处添加小标题
此病周期性潜伏与再发的原因可能与体内产生的免疫力有关
抗 原 表面特异性抗原:刺激机体产生特异凝集抗体及密螺旋体制动或溶解抗体,后者加补体可溶解螺旋体 螺旋体内类属抗原:可产生补体结合抗体,与非病原性螺旋体有交叉反应 3,螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原:当螺旋体侵入组织后,组织中的磷脂可粘附在螺旋体上,形成复合抗原,此种复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗体,称为反应素(Aegagin),可与牛心肌或其他正常动物心肌提取的类脂质抗原起沉淀反应(康氏试验)或补体结合反应(华氏试验)
潜伏期:1-3周 症状:尿道粘液性或粘液脓性分泌物,并有尿痛、尿道不适等症状。
淋球菌氧化酶阳性
淋球菌培养-淋球菌的确证试验
糖发酵试验 免疫学试验 荧光抗体染色 协同凝集试验 酶底物试验 DNA探针试验
菌落形态
淋球菌样
革兰染色
革兰阴性双球菌
氧化酶试验
阳性
过氧化物酶试验
阳性
快速糖发酵试验
G+ L- M- S-
β-内酰胺酶
阳性﹙PPNG﹚或阴性
常见性病实验室检测原理方法
淋球菌培养
1.原理:淋球菌在适宜的培养基上可生长出特征性
的菌落,根据菌落大小、形态、光泽、边缘、颜 色等情况,可以作为淋球菌的鉴定依据之一。
发光法)
公司(科美发光)
梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(酶联
北京现代高达生物技术有限
200908003 20100817
免疫法) (ELISA-TP)
责任公司(现代ELISA)
梅毒螺旋体抗体诊断试剂(双抗
北京万泰生物药业有限
N20090302 20100304
夹心法)(ELISA-TP)
公司(万泰ELISA)
方法:病原学检查的主要方法有暗视 显微镜检查、镀银染色法和直接荧光 法
第十二页,共58页。
病原学检查的临床意义
1. 病原学方法直接镜检到梅毒螺旋 体,在临床可确诊梅毒,且具有 快速、方便、易操作的特点。
2. 螺旋体检查是诊断早期现症梅毒 的最佳方法,对于患者的早期诊 断、及时治疗、预后和尽早切断 传染源都有十分重要的意义。
期
三期
治疗后
阳性
阴性
第二十一页,共58页。
梅毒血清学试验结果的临床意义总汇
USR
RPR
VDRL
_
+
+ -
TPPA
意义
TP-ELISA
TP-RT
_
排除梅毒
一期梅毒的早期+现症梅毒(梅毒孕妇所生
的婴儿除外)
-
生物学假阳性
+
早期梅毒经治疗后
第二十二页,共58页。
梅毒血清学检测意义
检测目的: 临床诊断、血液筛查、流行病学监测
生殖支原体: 10%~40%
性传播疾病的实验室检测
单纯疱疹病毒
•由于在感染急性期 发生水疱性皮疹即所 谓单纯疱疹而得名, 包括两个血清型: HSV-1 HSV-2
单纯疱疹病毒
致病特点
• HSV-1主要引起生殖器以外的皮肤、粘膜和器官感
染
• HSV-2则主要引起生殖器疱疹
临床表现
• 潜伏期3~14天,平均3-5天 • 临床表现多样 • 原发性:外生殖器或肛门周围有群簇或散在的小 水疱, 2~4 天后破溃形成糜烂或溃疡,自觉疼痛 • 复发性:较原发性全身症状及皮损轻,病程较短 复发多出现在原发感染后1~4个月 • 亚临床感染
传播途径
• 性接触 • 血液 • 胎盘(胎传梅毒) • 产道(新生儿淋菌性眼炎、衣原体性结膜炎) • 污染的生活用具
流行趋势
Ø 全球:WH0报告,每年约有4亿新病例
经治疗的STD年发病数为3.33亿
Ø我国:1949年,全国性病病人约1000万
上海性病患病率 达10% 1964年,基本消灭性病 1977年,再次报告新发性病病例 2001年,首次出现下降趋势 目前国内呈现上升趋势
沙眼衣原体感染特点
•约70%女性和50%男性为无症状或微症状 •大部分人群不寻求治疗造成持续感染和高流行 •并发症严重 •依赖实验室诊断
沙眼衣原体筛查的意义
1.流行率高:利于早发现、早治疗,提高生活质量 2.无症状,不治疗,传染给性伴侣:便于疾病控制和管理 3.严重并发症治疗费用高:减轻经济负担 4.治愈后的判断 5.减少其它性传播疾病,例如淋病、艾滋病感染风险。有报道感染CT可增 加淋球菌、HIV、HBV等风险,是正常人群的6~8倍 6. 目前英国、荷兰等国家正在推行全民每年常规筛查CT感染。CT感染是男 女不孕不育的主要病因之一,在西方国家已把CT感染作为不孕不育、
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菌落特征 氧化酶试验 革兰试验
糖发酵试验 免疫学试验
-荧光抗体染色 -协同凝集试验 酶底物试验 DNA探针试验
淋球菌的鉴定特征
菌落形态 革兰染色 氧化酶试验 过氧化物酶试验 快速糖发酵试验 β-内酰胺酶
淋球菌样 革兰阴性双球菌 阳性 阳性 G+ L- M- S阳性﹙PPNG﹚或阴性
幼女 采集阴道分泌物;
新生儿眼炎患者 采集眼结膜分泌物,对其母亲采集宫颈、尿道及直肠标本。
标本的采集和运送-取材方法
尿道 男性患者
用手指从阴茎根部向尿道口方向挤压,有症状患者可挤 出脓液,用取样拭子蘸取脓液作涂片或培养。对挤压后无明 显分泌物时,采用男用取材拭子插入尿道 2~3cm,稍用力 转动,保留数秒钟再取出, 以采集到粘膜上皮细胞。
女性患者 可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道口,挤压出分泌物。如果无
明显分泌物,可用同男性相似的上述方法取材。
标本的采集和运送-取材方法
宫颈 取材前用温水或生理盐水湿润扩阴器。应避免使用
防腐剂和润滑剂,因为这些物质对淋球菌有抑制作用。 仔细检查阴道壁和宫颈,如果宫颈口外面的分泌物较 多,先用无菌棉拭清除过多的宫颈粘液。将一取样拭 子插入宫颈管内1~2cm,稍用力转动,保留10~30 秒后取出。
检测方法-非梅毒螺旋体血清试验特点
前带现象
指非梅毒螺旋体抗原血清试验中,有时血清中 存在高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴 性反应的结果,而临床上又象二期梅毒,此时将 血清稀释后再进行试验,出现了阳性的结果,该 现象称为前带现象。
检测方法-梅毒螺旋体血清试验
采用梅毒螺旋体作抗原,是特异性的抗原体反 应。 梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA) 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TP-PA) 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、 梅毒螺旋体酶联免疫试验(ELSA-TP) 梅毒螺旋体蛋白印迹试验(WB-Test)
非培养诊断技术
非培养技术的特点 不依赖于活的病原体的存在,无需特殊运送条件; 仅适合尿道或宫颈标本,以及尿液(PCR/LCR); 不能进行抗生素敏感性试验 用于判愈试验需在治疗后至少3 周以上进行.
生殖道沙眼衣原体感染
生殖道沙眼衣原体感染-病原体
沙眼衣原体有15个血清型,A, B, Ba, C, DK, LI, L2, L3
宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时 敏感性仅40~70%。
不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感 染。 亦不能用于疗后判愈。如果在多形核细胞外见 到形态典型的革兰阴性双球菌,需做培养进行确证。
淋球菌培养
培养法为诊断淋病的金标准. 对女性淋病的确诊应做淋球菌培养 从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。 培养的敏感性81~100%。 培养的优点有:
的症状相似,如排尿困难、尿频、尿急 60%-80%的尿道感染者同时合并宫颈感
染
盆腔炎(PID)
衣原体宫颈炎20%-40% 上生殖道感染10-40% 有症状PID
新生儿感染
分娩时传播 沙眼衣原体活动性感染的孕妇,其新生儿
的感染率 -在任何部位的感染-50%-70% 新生儿结膜炎黄0%-50% 至少有50%的结膜炎患儿同时有鼻咽感染 -30%的鼻咽感染发展为衣原体肺炎
-A, B, Ba和C型最常引起沙眼 -D-K型主要感染泌尿生殖道 -LI, L2, L3型引起性病性淋巴肉芽肿
生殖道沙眼衣原体感染-病原体
非淋菌性尿道炎(NGU)是指由性 接触传染的一种尿道炎,它在临 床上有尿道炎的表现,但在尿道 分泌物中查不到淋球菌。
40-50%由沙眼衣原体引起,2030%由支原体引起,尚有10-20% 由阴道毛滴虫、白色念珠菌和单 纯疱疹病毒等引起。
女性宫颈管内膜
概况-流行病学
淋病的传播途径有以下二种: 1)直接性接触感染:成人淋病几乎全部通过性 接触感染。 2)间接接触感染:儿童可通过污染了淋球菌的 物品间接感染。新生儿可通过母亲产道分泌物 间接感染。
淋病的实验室诊断方法
直接显微镜检查,观察淋球菌细胞; 分离培养淋球菌; 非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原
直接显微镜检查
染色方法: 革兰染液 美兰染液 姬姆萨染液 荧光抗体
革兰染色为一传统方法,因简便、快捷及价廉、仍然 为最广泛采用的方法。革兰染色将菌分为二大类,即染 成紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。
直接显微镜检查的临床意义
男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%~99%,具诊断价值。
梅毒血清假阳性反应
技术性假阳性反应:如实验室操作错误,标本溶 血等,如重复试验,无梅毒患者血清试验成为阳 性。
生物学假阳性反应:因非螺旋体抗原血清试验是 非特异性的,在其它一些疾病,尤以感染性疾病, 也可释放心拟脂至血液中,产生反应素,如麻风、 麻疹、疟疾、传染性肝炎、病毒性肺炎、传染性 单核细胞增多症,系统性红斑狼疮,非典型性肺 炎、甚至妊娠都可出现阳性,但这类患者血清反 应滴度低,很少超过1:8。而且半年内渐转成阴 性。另外可用特异性的梅毒血清反应证实。如用 FTA-ABS试验
离率为4%-8%;而在男性直肠炎患者中, 分离率为12% 临床表现:轻者无症状,重者有直肠疼痛、 出血、腹泻及粘液性分泌物
女性感染-宫颈炎
约1/3左右的病人无任何临床症状 阴道分泌物:稀薄至脓性,正常至增多有
气味 宫颈充血,水肿,脆性增加 宫颈管口粘液脓性分泌物
尿道炎
大多数女性尿道沙眼衣原体感染无症状 急性尿道综合症:可与急性细菌性膀胱炎
性传播疾病的实验室检测
南康市疾病预防控制中心
2012-08-22
一、概述-梅毒病原体
(一)、名 词
由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传播疾病 是我国卫生部规定的重点防治性病之一 《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病 世界卫生组织列为世界上最常见的50种传染病之一
梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP )
梅毒螺旋体血清试验的临床意义
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本 的确证试验。
梅毒患者经过抗梅治疗后,ELSA、TPPA试验仍可阳性, 故TPPA试验阳性不能作为疗效观察的指标。
ELSA、TPPA阳性不能区分既往感染和现症感染,应结 合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
培养时间:24~48小时
淋球菌培养-培养条件
淋球菌培养-观察结果
培养24小时后检查平皿,此时没有菌生长的 平皿应继续培养至48小时,仍无菌生长才可 丢弃,作出淋球菌培养阴性的报告。
对选择性培养基上分离的直径在0.5~1mm, 无色、灰白色的半透明菌落应作进一步鉴定。
淋球菌培养-观察结果
淋球菌培养-淋球菌的初步鉴定
病原学
✓ 革兰阴性、专性细胞内寄生的微生物 ✓ 衣原体有特殊的发育周期,可见2种不同的
结构 -原体:感染型,较小,呈球形 -始体:增殖型,大,呈圆形或卵圆形
沙眼衣原体感染的并发症
附睾炎 前列腺炎 Reiter病
直肠炎
多发于男性同性恋者,由LGU株引起 在男性同性恋者中,直肠沙眼衣原体的分
或DNA(EIA, PCR/LCR)
标本的采集和运送
取材的部位
年龄 性别 性接触方式 临床表现
取材拭子
藻酸钙拭子 普通棉拭子 涤纶拭子
标本的采集和运送-取材部位
男性 异性恋者:采集尿道标本,有口淫史者加取咽部标本; 同性恋者: 采集尿道、直肠及咽部标本.
女性 采集宫颈标本,必要时从尿道、直肠、咽部、前庭大腺和尿道 旁腺取材;
淋球菌实验室诊断技术
概况-病原学
淋病是指由淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,简 称淋球菌)引起的各种化脓性感染,是一种经典的常 见的性传播疾病.
淋球菌为革兰阴性双球菌,大小约0.6~0.8µm。通 常成对生长,两菌接触面平坦。
淋球菌与奈瑟属的另一种致病菌脑膜炎球菌及其他 共栖奈瑟菌在生物学上有许多相似性,可通过生化 特性加以鉴别。淋球菌原发性感染部位主要为男性尿道或
上述方法的敏感性和特异性都基本相似
RPR结果
TRUST结果
检测方法非梅毒螺旋体血清试验临床意义
非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏 感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。
早期梅毒硬下疳出现1周-2周后,血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并阴性,故可作为疗效
观察、判愈、复发或再感染的指征。
检测方法-非梅毒螺旋体血清试验
性病研究实验室试验(VDRL) 不加热血清反应素试验(USR) 血浆反应素环状卡片试验(RPR、
TRUST)
检测方法-非梅毒螺旋体血清试验
所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本 成分都一样,其基本成分是心磷脂 、卵磷 脂和胆固醇
抗原抗体结合形成复合物 凝集成网状沉淀 颗粒 被肉眼所见
2.螺旋体内类属抗原:可产生补体结合抗体,与非病原 性螺旋体有交叉反应
3,螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原:当螺旋体侵 入组织后,组织中的磷脂可粘附在螺旋体上,形成复合 抗原,此种复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫 抗体,称为反应素(Aegagin),可与牛心肌或其他正常 动物心肌提取的类脂质抗原起沉淀反应(康氏试验)或 补体结合反应(华氏试验)
是梅毒的病原体,因其透明,不易着色,故又称苍白螺 旋体
(二)、免 疫
以细胞免疫为主,体液免疫只有一定的辅 助防御作用
当螺旋体从体内清除后可再感染,而且仍 可出现一期梅毒症状
此病周期性潜伏与再发的原因可能与体内 产生的免疫力有关
(三)、抗 原
1.表面特异性抗原:刺激机体产生特异凝集抗体及密螺 旋体制动或溶解抗体,后者加补体可溶解螺旋体
假阴性反应
在梅毒螺旋体感染后1~2周内可呈阴性反 应
梅毒螺旋体感染不久即开始治疗 晚期梅毒患者的血清中反应素含量低,敏