沙眼衣原体PPT课件

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标本:
微生物学 检查
沙眼：眼穹窿眼结膜刮片；
宫颈炎：宫颈移行部位刮取物 尿道炎：尿道刮取物
输卵管炎：输卵管抽取物
性病淋巴肉芽肿：淋巴结脓汁 肺炎衣原体肺炎：鼻咽拭子、气管内痰液、肺泡灌洗液 鹦鹉热：血液、痰、咽喉含漱液
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微生物学 检查 方法: 1、直接涂片镜检：
Giemsa染色：原体： 紫红色 始体： 蓝色 包涵体：暗紫色
*衣原体缺乏主动侵入细胞的能力 促进衣原体在细胞培养基中生长，可采用下法： • 离心 • 细胞培养中加入DEAE葡聚糖 • 细胞培养中加入代谢抑制，如放线菌酮
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• 培养方法：有盖片小瓶、微量滴定板 • 结果：检查有无衣原体和包涵体
细胞病变 继代接种
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• 鸡胚培养：
所有沙眼衣原体都能在鸡胚卵黄囊内生长繁殖，并致死鸡胚。
IgG〉1：512
• 酶免疫技术
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3、分子技术： 核酸探针：rDNA探针
PCR: 沙眼衣原体:MOMP基因，隐蔽质粒
肺炎衣原体： 16S rRNA 特异片断 鹦鹉热衣原体:16S rRNA
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4、分离培养 • 细胞培养分离：
沙眼衣原体： McCoy细胞 鹦鹉热衣原体：HeLa229 肺炎衣原体： Hep-2、HL
性状
原体
大小（直径um） 0.2～0.4 0.8~1.0
代谢活性
-
胞外稳定性
+
感染性
+
繁殖能力
-
RNA：DNA比值 1
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始体
+ + 3~4
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Electron micrograph of C trachomatis
inclusion body in c. ytoplasm (C) of
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生物学性状 染色性
Ag)
• 补体结合试验(complement fixation test, CF) ：
• 微量-IF（micro-IF)：
试剂：衣原体标准抗原片
荧光素标记的抗人IgG、IgM (或IgA)
标准：性病淋巴肉芽肿：IgG〉1：2000、IgM 〉1： 32
肺炎衣原体：双份血清抗体效价升高4倍或以上
IgM 〉1：16
培养在McCoy细胞的沙眼衣原体 吉姆萨染色的
McCoy细胞，含大衣原体包涵体，使部分细胞
核不清楚。（吉姆萨染色. ,放大1000倍）
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生物学性状 培养特性
分离培养：困难
• 专性活细胞内寄生 • 鸡胚卵黄囊: • 组织细胞培养：如Hela, McCoy • 动物接种
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生物学性状
抗原性
• 衣原体LPS: 属特异性抗原
补体结合抗原
ห้องสมุดไป่ตู้
• 外膜蛋白： 属特异性抗原 主要外膜蛋白(MOMP)
60KD外膜蛋 白
热休克蛋白
种特异性抗原
型特异性抗原
血清型
沙眼生物变种: A、B、Ba、C、D、Da、E-I、Ia、J、K
性病淋巴肉芽肿变种：L1、L2、L2a、L3
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鹦鹉热衣原体： 4个血清型
生物学性状 抵抗力
沙眼衣原体: 对冷及冷冻干燥有一定耐受性;
鸡胚：6～8天胚龄
标本 接种卵黄囊 收获卵黄囊膜 制片 染色 镜检
接种鸡胚 阳性 （+） 阴性
前3天死亡
弃去
3~13天死亡
收获卵黄囊涂片，染色镜检
13天仍存活 冷冻解剖
连续传代死亡，血清学
盲传3代阴性
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• 动物接种：小鼠
（1） 腹腔接种：鹦鹉热衣原体 （2）颅内接种：鹦鹉热衣原体，性病淋巴肉芽肿 （3）滴鼻接种：鹦鹉热衣原体
沙眼衣原体具有特殊的染色性状，不同的发 育阶段其染色有所不同。
Giemsa 染色：原体——紫色
始体——蓝色
革兰氏染色：一般反应为阴性，但变化不恒定 沙眼包涵体：Giemsa染色——深紫色
Lugol液染色——棕褐色斑块
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Chlamydia trachomatis (Giemsa. stain)
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5 鉴定：
Giemsa染色： 卢戈碘染色：
免疫荧光检查
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检验程序：
血液等
标本
直接涂片 学检查
分离培养
血清
姬姆萨 碘染 荧光
染色
标记的
抗体
衣原体 包涵体
养 镜检
细胞 鸡胚 小鼠
姬姆 碘染 荧光 收集细胞 组织
镜检
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继代培
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鉴定依据： 1 直接涂片染色，观察包涵体的形态特点 2 分离培养检查包涵体 3 血清抗体检查结果
卢戈碘染色： 包涵体：褐色
免疫荧光检查：荧光素标记的衣原体抗体
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cytosol
nucleu s
Chlamydia develops in inclusions inside host cells.
Epithelial cell infec.ted with Chlamydia.
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2、血清学试验： （Ab
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完
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No Image
/10/29
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肺炎衣原体(C.pneumoniae)
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生物学性状 形态结构
两种发育类型：
原体（elementary body,EB) ：胞外存在形式，
具感染性
始体（initial body)
: 繁殖型，不能在胞
网状体（reticulate body,RB) 外存活，无感染性
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生物学性状
生活周期
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衣原体原体和始体的性状
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沙眼衣原体：
临床意义
• 沙眼：衣原体沙眼生物变种A、B、Ba、C血清型引起 • 包涵体性结膜炎：沙眼生物变种D～K血清型引起 • 泌尿生殖道感染：沙眼生物变种D～K血清型引起 • 性病淋巴肉芽肿：沙眼衣原体LGV生物变种引起
鹦鹉热衣原体 ：引起鸟类，家禽感染，可传染给人，可 引起肺炎
肺类衣原体： 急性呼吸感染，肺炎，支气管炎、咽炎等， 感染率高 与冠心病、动脉粥样硬化有关
衣原体
Chlamydia
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概述
衣原体是一类严格细胞内寄生的原核细胞 微生物, 具有细胞壁，能通过细菌滤器， 对许多抗生素敏感，专性活细胞内寄生， 有独特的发育周期。
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分类
沙眼生物变种
衣原体目
沙眼衣原体 性病淋巴肉芽肿变种
衣原体科 （C.trachomatis) 鼠生物变种
衣原体属
鹦鹉热衣原体(C.psittaci)
不能用甘油保存，一般保存在pH7.6磷酸盐
缓冲液中或7.5%葡萄糖脱脂乳溶液中;
56℃ 5~6分钟灭活
0.1%甲醛溶液或0.5%石炭酸溶液经24小时
即杀死；用2%来苏儿仅需5分钟.
鹦鹉热衣原体: 抵抗力较强;
死；
3%来苏儿溶液则需24～36小时才可杀
紫外线照射可迅速灭活。
四环素、氯霉素和红霉素等抗生素有抑制衣原体繁殖作用。