玉米中辛硫磷残留的高效液相色谱方法研究
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摘 要： 为了对辛硫磷在玉米上的残留进行监测， 研究了快速测定辛硫磷残留的方法。样 品经石油醚提取， 经中性氧化铝和活性炭混合层析柱净化后， 用高效液相色谱－ 紫外检测 器在２８０ｎｍ波长下进行测定。试验结果表明： 辛硫磷在０．１～１０．０ｍｇ／ｋｇ范围内回归方程为ｙ ＝ １２７５２７ｘ－ １９２２３， 相关系数为０．９９７ ４， 方法的最低检出浓度为２×１０－ ２ｍｇ／ｋｇ， 平均回收率为 ８９．７％～９８．４％， 变异系数为０．５７％～４．２６％。该分析方法快速、准确、灵敏， 重现性好， 适合 玉米中辛硫磷残留量的检测。 关键词： 高效液相色谱法； 辛硫磷； 玉米； 残留分析 中图分类号： Ｓ４８２．３Ｏ６５７．７＋２ 文献标识码： Ａ 文章编号： １００２－ ５４８０（ ２００７） １０－ １５－ ０４
ｋｇ， 而 辛 硫 磷 在 玉 米 上 的 ＭＲＬ为 ０．０５ ｍｇ／ｋｇ ［９］， 满足辛硫磷检测分析的要求。本方法应用于 “３％辛硫磷颗粒剂在玉米上的残留试验”， 获得 了满意的结果。
参考文献 ［１］ ＧＢ／Ｔ ５００９．１０２－ ２００３． 植 物 性 食 品 中 辛 硫 磷 农 药 残 留
量的测定 ［Ｓ］ ． ［２］ 顾 明 松 ， 罗 毅．毛 细 管 气 相 色 谱 法 测 定 热 不 稳 定 有 机
辛硫磷 （ ｐｈｏｘｉｍ） 是一种高效、低毒、低残 留广谱有机磷杀虫剂， 是生产上应用较多的杀 虫剂之一。我国现有的辛硫磷检测标准采用气 相色谱分析， 主要适用于蔬菜中辛硫磷残留的 检测。辛硫磷高温下不稳定、易分解， 这给气 相色谱分析带来一定困难 ［１－３］。近年来国内使用 高效液相色谱法分析辛硫磷农药制剂及其残留
中性氧化铝： 粒径０．１２－ ０．２５ｍｍ， 经６５０℃干 燥４ｈ， 于干燥器中冷却至室温， 每１００ｇ加入５ｍＬ 水降活； 层析活性炭。 １． ２ 分析步骤 １． ２． １ 样 品 的 提 取 玉 米 样 品 粉 碎 后 ， 取 样 品 ２０．０ ｇ置于２５０ ｍＬ具塞三角瓶中， 加入１２０ｍＬ石 油醚避光浸泡过夜， 在康氏振荡器上振荡提取 １ｈ静置５ｍｉｎ， 过无水硫酸钠漏斗， 收集６０ ｍＬ上 清 液 ， 转 入１００ ｍＬ浓 缩 瓶 中 ， 旋 转 蒸 发 器 浓 缩
参考文献 ［１］ Ｒｉｅｈｌ Ｌ Ａ． Ａｄｖａｎｃｅｓ ｒｅｌｅｖａｎｔ ｔｏ ｎａｒｒｏｗ－ ｒａｎｇｅ ｓｐｒａｙ ｏｉｌｓ
ｆｏｒ ｃｉｔｒｕｓ ｐｅｓｔ ｃｏｎｔｒｏ１． ／ ／Ｈｏｍｅｒ Ｄ， Ｃｈａｐｍａｎ， Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ． Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｉｔｒｕｓ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ２． Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ Ｒｉｖｅｒｓｉｄｅ， １９６９， ８９７． ［２］ ＧＡＣＢｅａｔｔｉ， ＥＡＲｏｂｅｒｔｓ， ＬＥＲｉｐｐｏｎ， ｅｔａｌ．ｐｈｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｐｅｒｔｒｏｌｅｕｍ ｓｐｒａｙ ｏｉｌｓ ｔｏ Ｖａｌｅｎｃｉａ ｏｒａｎｇｅ， Ｃｉｔｒｕｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ （ Ｌ．） Ｏｓｂｅｃｋ， ｉｎ Ｎｅｗ Ｓｏｕｔｈ Ｗａｌｅｓ · Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ａｇｒｃｕｌｔｕｒｅ， １９８９， ２９： ２７３． ［３］ 张权炳， 王雁， 王代武， 等． 机油乳剂不同施用时 期 对 柑 橘 的 影 响 ［Ｊ］ ． 中 国 柑 橘 ， １９９３， ２２ （ １） ： ３６． ［４］ 张 志 恒． 喷 油 在 果 树 害 虫 综 合 治 理 中 的 应 用 ［Ｊ］ ． 世 界农业， ２０００， （ １） ： ３３． ［５］ 张 志 恒 ， 王 强 ， 吴 电． 机 油 乳 剂 绿 颖 与１２种 农 用 化 学品混用对柑橘的安全性试验 ［Ｊ］ ． 中国南方果树， ２００４， ３３ （ ６） ： ２７￣２８． ［６］ 梁 新 明 ， 王 英 姿 ， 王 培 松． 绿 颖 机 油 乳 剂 防 治 果 树 病虫害药效及应用技术 ［Ｊ］ ． 中国果树， ２００４， ２： ７￣１０． ［７］ 肖 强 ， 曾 莉 ， 冉 隆 珣． 绿 颖 防 治 咖 啡 小 爪 螨 田 间 药
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残留分析
２． ２． ２ 流动相的选择 比较了乙腈－ 水体系、甲 醇－ 水体系作为流动相， 试验中发现甲醇与水做 流动相时， 色谱峰对称性稍差， 容易出现拖尾 现象， 而用乙腈与水作流动相， 样品中辛硫磷
测定值（ ｍｇ／ｋｇ）
２
３
０．０１８
０．０１８
０．０９１
０．０９２
０．９９４
０．９１３
４ ０．０１８ ０．０９１ １．００７
５ ０．０１８ ０．０９２ ０．９８４
平均值
０．０１８ ０．０９３ ０．９８４
平均回收率 （ ％）
８９．７ ９３．０ ９８．４
变异系数 （ ％）
０．５７ ３．７６ ４．２６
ｉ．ｄ．， ５μｍ） ， 在０．６５ｍＬ／ｍｉｎ的流速时， 基线平稳， 峰形对称， 与其他杂质能够分离完全。将玉米 籽粒进行不同水平的添加回收率试验， 添加水 平 分 别 为０．０２、０．１、１．０ ｍｇ／ｋｇ， 其 回 收 率 为８９． ７％～９８．４％， 变 异 系 数 为０．５７％～４．２６％， 符 合 农 药残留分析的要求。在上述选定的色谱条件下， 辛 硫 磷 的 仪 器 最 小 检 出 量 为０．０５ ｎｇ。 在 试 验 条 件下， 对辛硫磷在玉米籽粒样品中的最低检出 浓度进行了研究， 结果发现在本试验条件下， 辛硫 磷 在 供 试 样 品 中 的 最 低 检 出 浓 度 为０．０２ｍｇ／
已有报道 ， ［４－８］ 但是有关玉米中辛硫磷的残留检 测报告甚少。本研究采用石油醚提取， 经中性 氧化铝和活性炭混合层析柱净化， 建立了辛硫 磷在玉米中的高效液相色谱残留分析方法。 １ 材料与方法 １． １ 主要仪器及试剂 日本岛津高效液相色谱仪 ＬＣ－ １０ＡＴｖｐ， 配备ＳＰＤ－ １０Ａｖｐ ＵＶ 检测器、ＳＩＬ－
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残留分析
玉米中辛硫磷残留的 高效液相色谱方法研究
贺 敏， 戴荣彩， 余平中， 陈 莉， 夏福利
（ 北京市农林科学院植物保护环境保护研究所， 北京 １０００９７）
Ｄｅｔｅｒ ｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈｏｘｉｍ Ｒｅｓｉｄｕｅ ｉｎ Ｃｏｒ ｎ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｈｅ Ｍｉｎ﹡， Ｄａｉ Ｒｏｎｇｃａｉ ， Ｙｕ Ｐｉｎｇｚｈｏｎｇ， Ｃｈｅｎ Ｌｉ， Ｘｉａ Ｆｕｌｉ （ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ， Ｂｅｉｊｉｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００９７， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ ｐｈｏｘｉｍ ｒｅｓｉｄｕｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｏｒｎ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ． Ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｆ ｐｈｏｘｉｍ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｉｔｈ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ， ｃｌｅａｎｉｎｇ － ｕｐ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ａ ｍｉｘｅｄ ｃｏｌｕｍｎ ｏｆ ｎｅｕｔｒａｌ ａｌｕｍｉｎａ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃａｒｂｏｎ． Ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ ｗｉｔｈ ＵＶ ｄｅｔｅｃｔｏｒ ａｔ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ２８０ｎｍ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｐｈｏｘｉｍ ｗａｓ ０．１ ～１０．０ｍｇ／ｋｇ ａｎｄ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ ｙ＝１０９３６７ｘ＋２１３７０ （ ｒ＝０．９９７ ４） ． Ｔｈｅ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｗａｓ ０．０２ ｍｇ／ｋｇ ｉｎ ｃｏｒｎ．．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｐｈｏｘｉｍ ｆｒｏｍ ｃｏｒｎ ｓｐｉｋｅｄ ｗｉｔｈ ０．０２、 ０．１、 １．０ ｍｇ／ｋｇ ｗｅｒｅ ８９．７％～９８．４％， Ｔｈｅ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ ｏｆ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ０．５７％ ～４．２６％。 Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： ＨＰＬＣ； ｐｈｏｘｉｍ ； ｃｏｒｎ ； ｒｅｓｉｄｕｅ； ａｎａｌｙｓｉｓ
收稿日期： ２００７－ ０５－ ０８
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残留分析
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１０Ａｄｖｐ自动进样器和分析软件Ｃｌａｓｓ－ ＶＰ； １／１０万 和１／１００电 子 天 平 ， 康 氏 振 荡 器 、 旋 转 蒸 发 器 、 高速离心机、超声波清洗器。
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回收率较满意， 重现性良好。 ３ 结论
本方法流动相选择乙腈＋水＝１０＋３ （ Ｖ／Ｖ） ， 色 谱柱选用岛津ＯＤＳ－ Ｃｌ８不锈钢柱 （ ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ
添加浓度 （ ｍｇ／ｋｇ）
０．０２ ０．１ １
１ ０．０１８ ０．０９９ １．０２０
表１ 玉米中添加辛硫磷的回收率及相对标准偏差 （ ｎ＝５）
呈现出较好的线性， 其回归方程为ｙ＝ １２７５２７ｘ－ １９２２３， 相关系数为０．９９７４， 呈极显著相关。 ２． ２ 色谱条件的优化 ２． ２． １ 色 谱 柱 的 选 择 根 据 辛 硫 磷 的 性 质 选 择 了Ｃ１８柱 ， 对 几 种 不 同 型 号 的 色 谱 柱 进 行 比 较 ， 发 现 岛 津ＯＤＳ－ Ｃｌ８不 锈 钢 柱 （ ２５０ ｍｍ×４．６ｍｍ ｉ． ｄ．， ５μｍ） 效果更加适合本试验。
乙腈为色谱纯； 水为超纯水； 石油醚、乙 酸 乙 酯 为 分 析 纯 ； 辛 硫 磷 标 准 品 （ １００μｇ／ｍＬ） ， 中 国 环 境 检 测 技 术 中 心 提 供 。 准 确 移 取 １ｍＬ辛 硫 磷标准品于５ｍＬ棕色容量瓶中， 加乙腈稀释至刻 度 ， 配 制 成 ２０μｇ／ｍＬ标 准 储 备 液 ， 置 于 冰 箱 保 存， 使用时再稀释成适当浓度的标准工作液。
与其他干扰物质的分离彻底， 峰形对称。对乙 腈、水的不同比例进行了试验， 结果表明当流 动相为乙睛＋水＝１０＋３ （ Ｖ／Ｖ） 时， 既能满足分离 要求， 又能满足样品检出限要求。 （ 图３， 图４）
图３ 玉米空白样苗色谱图
图４ 玉米空白样品添加辛硫磷色谱图
２． ３ 方法的准确 度与精密度 在玉米空 白 样 品 中分别加入高、中、低３个水平的标准溶液， 放 置１ｈ， 使 标 准 溶 液 被 样 品 充 分 吸 收 。 按 样 品 处 理步骤操作， 高效液相色谱测定， 结果见表１，
图１ 辛硫磷标样色谱图
图２ 方法线性关系曲线
２ 结果与分析 ２． １ 方法的线性相关性 将辛硫磷标准贮备液用 流动相稀释成０．１、０．２、０．５、１．０、２．０、５．０、１０．０μｇ／ ｍＬ标准工作液， 取１０μＬ进样测定， 外标法定量。 以辛硫磷质量浓度ｘ （ μｇ／ｍＬ） 为横坐标， 以紫外 吸收峰面积ｙ为纵坐标绘制线性关系曲线 （ 见图 ２） ， 结果表明在相对应的浓度范围内， 仪器检测
磷 农 药 辛 硫 磷 ［Ｊ］ ． 色 谱 ， １９９５， （ 下转第２９页）
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农药应用
绿颖可与大多数杀虫剂和杀菌剂混合使用， 混用时， 应先加其他农药， 最后加绿颖， 搅拌 均匀后喷雾， 并随喷随搅。绿颖严禁与含硫药 剂和叶面肥混合使用， 否则将产生严重药害。
近干， 氮吹仪吹干， 待净化。 １． ２． ２ 样品的净化
玻 璃 层 析 柱 内 径１．０ ｃｍ， 柱 长２５ ｃｍ， 净 化 柱从下至上依次装入： 少量脱脂棉、２ ｃｍ高无水 硫酸钠、５ ｇ中性氧化铝与０．２ ｇ活性炭的混合物、 ２ ｃｍ高的无水硫酸钠。淋洗液为乙酸乙酯＋石油 醚混合溶液 （ ９＋１， ｖ／ｖ） 。首先用２０ ｍＬ石油醚淋 洗 已 填 装 好 的 柱 子 ； 吸 取２ ｍＬ淋 洗 液 至 蒸 干 的 提取液浓缩瓶中， 将浓缩物溶解并转移到净化 柱内， 继续用６×１０ ｍＬ淋洗液洗脱柱内样品， 收 集全部淋出液， 在旋转蒸发器上浓缩近干后， 用乙腈定容至２ｍＬ， 离心后供ＨＰＬＣ分析。 １．２．３ 色谱条件 色谱柱： 岛津ＯＤＳ－ Ｃｌ８不锈钢 柱 （ ２５０ ｍｍ×４．６ｍｍ ｉ．ｄ．， ５μｍ） ； 流 动 相 ： 乙 腈 ＋ 水＝１０＋３ （ ｖ／ｖ） ； 流速： ０．６５ ｍＬ／ｍｉｎ； 进样体积： １０μＬ； 柱 温 ： ３０℃； 检 测 波 长 ： ２８０ ｎｍ； 在 上 述 色 谱 条 件 下 辛 硫 磷 的 保 留 时 间 约 １３．６ ｍｉｎ。 （ 见图１）
ｋｇ， 而 辛 硫 磷 在 玉 米 上 的 ＭＲＬ为 ０．０５ ｍｇ／ｋｇ ［９］， 满足辛硫磷检测分析的要求。本方法应用于 “３％辛硫磷颗粒剂在玉米上的残留试验”， 获得 了满意的结果。
参考文献 ［１］ ＧＢ／Ｔ ５００９．１０２－ ２００３． 植 物 性 食 品 中 辛 硫 磷 农 药 残 留
量的测定 ［Ｓ］ ． ［２］ 顾 明 松 ， 罗 毅．毛 细 管 气 相 色 谱 法 测 定 热 不 稳 定 有 机
辛硫磷 （ ｐｈｏｘｉｍ） 是一种高效、低毒、低残 留广谱有机磷杀虫剂， 是生产上应用较多的杀 虫剂之一。我国现有的辛硫磷检测标准采用气 相色谱分析， 主要适用于蔬菜中辛硫磷残留的 检测。辛硫磷高温下不稳定、易分解， 这给气 相色谱分析带来一定困难 ［１－３］。近年来国内使用 高效液相色谱法分析辛硫磷农药制剂及其残留
中性氧化铝： 粒径０．１２－ ０．２５ｍｍ， 经６５０℃干 燥４ｈ， 于干燥器中冷却至室温， 每１００ｇ加入５ｍＬ 水降活； 层析活性炭。 １． ２ 分析步骤 １． ２． １ 样 品 的 提 取 玉 米 样 品 粉 碎 后 ， 取 样 品 ２０．０ ｇ置于２５０ ｍＬ具塞三角瓶中， 加入１２０ｍＬ石 油醚避光浸泡过夜， 在康氏振荡器上振荡提取 １ｈ静置５ｍｉｎ， 过无水硫酸钠漏斗， 收集６０ ｍＬ上 清 液 ， 转 入１００ ｍＬ浓 缩 瓶 中 ， 旋 转 蒸 发 器 浓 缩
参考文献 ［１］ Ｒｉｅｈｌ Ｌ Ａ． Ａｄｖａｎｃｅｓ ｒｅｌｅｖａｎｔ ｔｏ ｎａｒｒｏｗ－ ｒａｎｇｅ ｓｐｒａｙ ｏｉｌｓ
ｆｏｒ ｃｉｔｒｕｓ ｐｅｓｔ ｃｏｎｔｒｏ１． ／ ／Ｈｏｍｅｒ Ｄ， Ｃｈａｐｍａｎ， Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ． Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｉｔｒｕｓ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ２． Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ Ｒｉｖｅｒｓｉｄｅ， １９６９， ８９７． ［２］ ＧＡＣＢｅａｔｔｉ， ＥＡＲｏｂｅｒｔｓ， ＬＥＲｉｐｐｏｎ， ｅｔａｌ．ｐｈｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｐｅｒｔｒｏｌｅｕｍ ｓｐｒａｙ ｏｉｌｓ ｔｏ Ｖａｌｅｎｃｉａ ｏｒａｎｇｅ， Ｃｉｔｒｕｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ （ Ｌ．） Ｏｓｂｅｃｋ， ｉｎ Ｎｅｗ Ｓｏｕｔｈ Ｗａｌｅｓ · Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ａｇｒｃｕｌｔｕｒｅ， １９８９， ２９： ２７３． ［３］ 张权炳， 王雁， 王代武， 等． 机油乳剂不同施用时 期 对 柑 橘 的 影 响 ［Ｊ］ ． 中 国 柑 橘 ， １９９３， ２２ （ １） ： ３６． ［４］ 张 志 恒． 喷 油 在 果 树 害 虫 综 合 治 理 中 的 应 用 ［Ｊ］ ． 世 界农业， ２０００， （ １） ： ３３． ［５］ 张 志 恒 ， 王 强 ， 吴 电． 机 油 乳 剂 绿 颖 与１２种 农 用 化 学品混用对柑橘的安全性试验 ［Ｊ］ ． 中国南方果树， ２００４， ３３ （ ６） ： ２７￣２８． ［６］ 梁 新 明 ， 王 英 姿 ， 王 培 松． 绿 颖 机 油 乳 剂 防 治 果 树 病虫害药效及应用技术 ［Ｊ］ ． 中国果树， ２００４， ２： ７￣１０． ［７］ 肖 强 ， 曾 莉 ， 冉 隆 珣． 绿 颖 防 治 咖 啡 小 爪 螨 田 间 药
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残留分析
２． ２． ２ 流动相的选择 比较了乙腈－ 水体系、甲 醇－ 水体系作为流动相， 试验中发现甲醇与水做 流动相时， 色谱峰对称性稍差， 容易出现拖尾 现象， 而用乙腈与水作流动相， 样品中辛硫磷
测定值（ ｍｇ／ｋｇ）
２
３
０．０１８
０．０１８
０．０９１
０．０９２
０．９９４
０．９１３
４ ０．０１８ ０．０９１ １．００７
５ ０．０１８ ０．０９２ ０．９８４
平均值
０．０１８ ０．０９３ ０．９８４
平均回收率 （ ％）
８９．７ ９３．０ ９８．４
变异系数 （ ％）
０．５７ ３．７６ ４．２６
ｉ．ｄ．， ５μｍ） ， 在０．６５ｍＬ／ｍｉｎ的流速时， 基线平稳， 峰形对称， 与其他杂质能够分离完全。将玉米 籽粒进行不同水平的添加回收率试验， 添加水 平 分 别 为０．０２、０．１、１．０ ｍｇ／ｋｇ， 其 回 收 率 为８９． ７％～９８．４％， 变 异 系 数 为０．５７％～４．２６％， 符 合 农 药残留分析的要求。在上述选定的色谱条件下， 辛 硫 磷 的 仪 器 最 小 检 出 量 为０．０５ ｎｇ。 在 试 验 条 件下， 对辛硫磷在玉米籽粒样品中的最低检出 浓度进行了研究， 结果发现在本试验条件下， 辛硫 磷 在 供 试 样 品 中 的 最 低 检 出 浓 度 为０．０２ｍｇ／
已有报道 ， ［４－８］ 但是有关玉米中辛硫磷的残留检 测报告甚少。本研究采用石油醚提取， 经中性 氧化铝和活性炭混合层析柱净化， 建立了辛硫 磷在玉米中的高效液相色谱残留分析方法。 １ 材料与方法 １． １ 主要仪器及试剂 日本岛津高效液相色谱仪 ＬＣ－ １０ＡＴｖｐ， 配备ＳＰＤ－ １０Ａｖｐ ＵＶ 检测器、ＳＩＬ－
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残留分析
玉米中辛硫磷残留的 高效液相色谱方法研究
贺 敏， 戴荣彩， 余平中， 陈 莉， 夏福利
（ 北京市农林科学院植物保护环境保护研究所， 北京 １０００９７）
Ｄｅｔｅｒ ｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈｏｘｉｍ Ｒｅｓｉｄｕｅ ｉｎ Ｃｏｒ ｎ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｈｅ Ｍｉｎ﹡， Ｄａｉ Ｒｏｎｇｃａｉ ， Ｙｕ Ｐｉｎｇｚｈｏｎｇ， Ｃｈｅｎ Ｌｉ， Ｘｉａ Ｆｕｌｉ （ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ， Ｂｅｉｊｉｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００９７， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ ｐｈｏｘｉｍ ｒｅｓｉｄｕｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｏｒｎ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ． Ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｆ ｐｈｏｘｉｍ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｉｔｈ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ， ｃｌｅａｎｉｎｇ － ｕｐ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ａ ｍｉｘｅｄ ｃｏｌｕｍｎ ｏｆ ｎｅｕｔｒａｌ ａｌｕｍｉｎａ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃａｒｂｏｎ． Ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ ｗｉｔｈ ＵＶ ｄｅｔｅｃｔｏｒ ａｔ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ２８０ｎｍ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｐｈｏｘｉｍ ｗａｓ ０．１ ～１０．０ｍｇ／ｋｇ ａｎｄ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ ｙ＝１０９３６７ｘ＋２１３７０ （ ｒ＝０．９９７ ４） ． Ｔｈｅ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｗａｓ ０．０２ ｍｇ／ｋｇ ｉｎ ｃｏｒｎ．．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｐｈｏｘｉｍ ｆｒｏｍ ｃｏｒｎ ｓｐｉｋｅｄ ｗｉｔｈ ０．０２、 ０．１、 １．０ ｍｇ／ｋｇ ｗｅｒｅ ８９．７％～９８．４％， Ｔｈｅ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ ｏｆ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ０．５７％ ～４．２６％。 Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： ＨＰＬＣ； ｐｈｏｘｉｍ ； ｃｏｒｎ ； ｒｅｓｉｄｕｅ； ａｎａｌｙｓｉｓ
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１０Ａｄｖｐ自动进样器和分析软件Ｃｌａｓｓ－ ＶＰ； １／１０万 和１／１００电 子 天 平 ， 康 氏 振 荡 器 、 旋 转 蒸 发 器 、 高速离心机、超声波清洗器。
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回收率较满意， 重现性良好。 ３ 结论
本方法流动相选择乙腈＋水＝１０＋３ （ Ｖ／Ｖ） ， 色 谱柱选用岛津ＯＤＳ－ Ｃｌ８不锈钢柱 （ ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ
添加浓度 （ ｍｇ／ｋｇ）
０．０２ ０．１ １
１ ０．０１８ ０．０９９ １．０２０
表１ 玉米中添加辛硫磷的回收率及相对标准偏差 （ ｎ＝５）
呈现出较好的线性， 其回归方程为ｙ＝ １２７５２７ｘ－ １９２２３， 相关系数为０．９９７４， 呈极显著相关。 ２． ２ 色谱条件的优化 ２． ２． １ 色 谱 柱 的 选 择 根 据 辛 硫 磷 的 性 质 选 择 了Ｃ１８柱 ， 对 几 种 不 同 型 号 的 色 谱 柱 进 行 比 较 ， 发 现 岛 津ＯＤＳ－ Ｃｌ８不 锈 钢 柱 （ ２５０ ｍｍ×４．６ｍｍ ｉ． ｄ．， ５μｍ） 效果更加适合本试验。
乙腈为色谱纯； 水为超纯水； 石油醚、乙 酸 乙 酯 为 分 析 纯 ； 辛 硫 磷 标 准 品 （ １００μｇ／ｍＬ） ， 中 国 环 境 检 测 技 术 中 心 提 供 。 准 确 移 取 １ｍＬ辛 硫 磷标准品于５ｍＬ棕色容量瓶中， 加乙腈稀释至刻 度 ， 配 制 成 ２０μｇ／ｍＬ标 准 储 备 液 ， 置 于 冰 箱 保 存， 使用时再稀释成适当浓度的标准工作液。
与其他干扰物质的分离彻底， 峰形对称。对乙 腈、水的不同比例进行了试验， 结果表明当流 动相为乙睛＋水＝１０＋３ （ Ｖ／Ｖ） 时， 既能满足分离 要求， 又能满足样品检出限要求。 （ 图３， 图４）
图３ 玉米空白样苗色谱图
图４ 玉米空白样品添加辛硫磷色谱图
２． ３ 方法的准确 度与精密度 在玉米空 白 样 品 中分别加入高、中、低３个水平的标准溶液， 放 置１ｈ， 使 标 准 溶 液 被 样 品 充 分 吸 收 。 按 样 品 处 理步骤操作， 高效液相色谱测定， 结果见表１，
图１ 辛硫磷标样色谱图
图２ 方法线性关系曲线
２ 结果与分析 ２． １ 方法的线性相关性 将辛硫磷标准贮备液用 流动相稀释成０．１、０．２、０．５、１．０、２．０、５．０、１０．０μｇ／ ｍＬ标准工作液， 取１０μＬ进样测定， 外标法定量。 以辛硫磷质量浓度ｘ （ μｇ／ｍＬ） 为横坐标， 以紫外 吸收峰面积ｙ为纵坐标绘制线性关系曲线 （ 见图 ２） ， 结果表明在相对应的浓度范围内， 仪器检测
磷 农 药 辛 硫 磷 ［Ｊ］ ． 色 谱 ， １９９５， （ 下转第２９页）
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农药科学与管理 Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ２００７， ２８（ １０）
农药应用
绿颖可与大多数杀虫剂和杀菌剂混合使用， 混用时， 应先加其他农药， 最后加绿颖， 搅拌 均匀后喷雾， 并随喷随搅。绿颖严禁与含硫药 剂和叶面肥混合使用， 否则将产生严重药害。
近干， 氮吹仪吹干， 待净化。 １． ２． ２ 样品的净化
玻 璃 层 析 柱 内 径１．０ ｃｍ， 柱 长２５ ｃｍ， 净 化 柱从下至上依次装入： 少量脱脂棉、２ ｃｍ高无水 硫酸钠、５ ｇ中性氧化铝与０．２ ｇ活性炭的混合物、 ２ ｃｍ高的无水硫酸钠。淋洗液为乙酸乙酯＋石油 醚混合溶液 （ ９＋１， ｖ／ｖ） 。首先用２０ ｍＬ石油醚淋 洗 已 填 装 好 的 柱 子 ； 吸 取２ ｍＬ淋 洗 液 至 蒸 干 的 提取液浓缩瓶中， 将浓缩物溶解并转移到净化 柱内， 继续用６×１０ ｍＬ淋洗液洗脱柱内样品， 收 集全部淋出液， 在旋转蒸发器上浓缩近干后， 用乙腈定容至２ｍＬ， 离心后供ＨＰＬＣ分析。 １．２．３ 色谱条件 色谱柱： 岛津ＯＤＳ－ Ｃｌ８不锈钢 柱 （ ２５０ ｍｍ×４．６ｍｍ ｉ．ｄ．， ５μｍ） ； 流 动 相 ： 乙 腈 ＋ 水＝１０＋３ （ ｖ／ｖ） ； 流速： ０．６５ ｍＬ／ｍｉｎ； 进样体积： １０μＬ； 柱 温 ： ３０℃； 检 测 波 长 ： ２８０ ｎｍ； 在 上 述 色 谱 条 件 下 辛 硫 磷 的 保 留 时 间 约 １３．６ ｍｉｎ。 （ 见图１）