除草剂生物测定
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第二组：黄瓜幼苗形态法（激素类除草剂） —— 2,4—D丁酯
第三组：玉米根长法（磺酰脲类、咪唑啉酮类、喹啉羰酸类） —— 咪唑乙烟酸
2020/7/3
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除草剂生物测定
一、黄瓜幼苗形态法
（一）实验目的
1. 掌握黄瓜幼苗形态法的生物测定原理——以不同剂量的药剂所引起黄瓜幼苗 形态上的不同变化来测定样品活性；
2. 了解黄瓜幼苗形态法的生物测定方法。
（二） 实验仪器设备
微量可调移液器，万分之一电子天平，数字瓶口移液器，恒温培养箱，培养皿，量 筒，烧杯各，容量瓶，吸耳球，镊子，滤纸，玻璃棒。
（三）实验材料
黄瓜种子、72%2,4-D丁酯乳油。
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除草剂生物测定
一、黄瓜幼苗形态法
（四）实验内容与方法
除草剂生物测定
如何选择指示植物？
➢ 供试植物易于培养； ➢ 供试植物个体一致； ➢ 在一定的剂量范围内，供试植物对除草剂的反
应随着剂量的增加，而有规律的提高；
➢ 在环境条件相同或相似的条件下，对被测定除
草剂的反应可重现。
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除草剂生物测定
如何确定培养条件？
生物测定是以生物材料测定除草剂的活性，而生物的 生长发育受环境条件的影响。所以，环境条件将导致生物 对除草剂反应的差异，从而影响测定结果的准确性与再现 性。可见，稳定的环境条件是保证生物测定高度准确性的 必要条件。在环境条件中，温度、水分、光照最易影响生 物测定结果。不同的生物测定方法中，需要确定不同的培 养条件。
各盘的平均值(mm)
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
三次重复 平均值(mm)
抑制率（％）
对照根长 处理根长 对照根长
100
抑制率(％)
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除草剂生物测定
二、玉米根长法
（一）实验目的
1. 掌握玉米根长法的生物测定原理——药剂浓度与玉米主根根长呈显著的相关 关系；
2. 了解玉米根长法的生物测定方法。
（二） 实验仪器设备
3．推算出未知药液的浓度。
各处理 浓度(mg/L)
ck 0.1（0.01） 0.5 （0.025） 1 （0.05） 3 （0.075） 5 （0.1） 7 （0.125） 未知药液
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除草剂生物测定
(4) 酶水平测定
对那些已知作用靶标酶的除草剂，如乙酰乳酸 合成酶抑制剂、乙酰辅酶A抑制剂，在生物测定时， 可在酶水平进行。通过测定除草剂对这些酶活性抑 制的强度来确定它们活性的大小。
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8Leabharlann 除草剂生物测定 实验安排：
第一组：玉米根长法（磺酰脲类、咪唑啉酮类、喹啉羰酸类） —— 二氯喹啉酸
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除草剂生物测定
如何选择评价指标？
指示植物对除草剂的反应可以通过各种指标来测定，适宜 的测定指标应当反应明显、容易观察与测量。由于除草剂类型 与品种不同，测定指标也各式各样，如种子发芽情况，根长、 芽长与株高，根、芽或植株的鲜重与干重以及生理与形态的变 化等。这些测定指标可以分为如下四类：
除草剂生物测定
1.概念 除草剂生物测定是通过测定除草剂对生物影响程度，来确定 它的生物活性、毒力或浓度的方法。 2. 应用 是除草剂品种筛选、研究除草剂活性、吸附、淋溶、降解及 在环境中归趋的重要手段。 3.除草剂生物测定的程序 ① 选择指示植物 ② 确定培养条件 ③ 选择评价指标
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除草剂生物测定
(2) 组织或器官水平测定
在组织或器官水平上的生物测定一般在实验室进行，常 用的有种子、叶片。用植物的种子进行生测时有两种方法：
一种是待测的药液加入底部铺有滤纸的培养皿或小杯中、 然后将种子置于滤纸上，盖上盖子后放在生长箱中培养。
另一种是在培养皿中装满沙子或蛭石，加入药液后再在 中间播一排种子，盖好盖子后，斜放在生长箱中培养。待各处 理的根或芽之间差异较明显时，测量根、芽长或鲜重，如用玉 米根长测定磺酰脲类等。
A. 整株水平测定
B. 组织或器官水平测定
C. 细胞或细胞器水平测定
D.酶水平测定
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除草剂生物测定
(1) 整株水平测定
整株水平测定是用整株植物来测定除草剂的毒力。一般是 在温室用盆栽方法培养供试植物，播前，或播后苗前，或苗后 喷药，培养的植物根据试验的需要来确定。在新除草剂筛选生 物测定时，整株测定是必不可少的一步。在整株测定中，评价 的指标可以是出苗率、株高、地上部的重量或地下部重量等， 也可根据植物受害的症状进行分级。对那些已知作用机制的除 草剂的生物测定，也可根据作用特点，测定特定的生理指标， 如CO2的释放量等。
配制药液
制作玻板
加药液
培养
观察结果
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除草剂生物测定
二、玉米根长法
（四）实验内容与方法-测咪唑乙烟酸
玉米种子催芽
配制药液
制作玻板
加药液
培养
观察结果
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除草剂生物测定
二、玉米根长法
（五）作业与数据记录
1．测量各处理玉米主根根长，并求相对抑制率。
2．求出二氯喹磷酸、咪唑乙烟酸系列浓度与玉米主根根长相对抑制率之间的回归方程。
准备种子
配制药液
摆放种子
加药液
培养
观察结果
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除草剂生物测定
一、黄瓜幼苗形态法
（五）作业与数据记录
1．描述2.4-D丁酯各处理的结果，并按比例绘出形态图谱。
2．求出2.4-D丁酯系列浓度与黄瓜初生根根长抑制率之间的直线回归方程。
3．推算出未知药液的浓度。
各处理 浓度(mg/L)
ck 0.5 1.0 10 100 1000 未知药液
微量可调移液器，万分之一电子天平，数字瓶口移液器，恒温培养箱，培养皿，量 筒，烧杯各，容量瓶，吸耳球，镊子，滤纸，玻璃棒，直尺等。
（三）实验材料
催芽的玉米、50%二氯喹磷酸可湿性粉剂、5％咪唑乙烟酸水剂 。
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除草剂生物测定
二、玉米根长法
（四）实验内容与方法-测二氯喹啉酸
玉米种子催芽
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除草剂生物测定
(3) 细胞或细胞器水平测定
细胞或细胞器水平测定一般是针对特定作用机制的除草剂， 常用的细胞器有叶绿体和线粒体。在离体叶绿体条件下，用分光 光度计或比色计在420nm处的吸收率来测定高铁氰化物还原的总 量，可测定出光合电子传递抑制剂活性。高铁氰化物还原量越大， 除草剂活性越低。在离体线粒体条件下，用瓦氏呼吸装置测定氧 的吸收和磷氧比，从而确定呼吸作用抑制剂活性。除草剂的活性 与氧吸收量和磷氧比成负相关，氧吸收越少，磷氧比越低，除草 剂的活性越强。
第三组：玉米根长法（磺酰脲类、咪唑啉酮类、喹啉羰酸类） —— 咪唑乙烟酸
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除草剂生物测定
一、黄瓜幼苗形态法
（一）实验目的
1. 掌握黄瓜幼苗形态法的生物测定原理——以不同剂量的药剂所引起黄瓜幼苗 形态上的不同变化来测定样品活性；
2. 了解黄瓜幼苗形态法的生物测定方法。
（二） 实验仪器设备
微量可调移液器，万分之一电子天平，数字瓶口移液器，恒温培养箱，培养皿，量 筒，烧杯各，容量瓶，吸耳球，镊子，滤纸，玻璃棒。
（三）实验材料
黄瓜种子、72%2,4-D丁酯乳油。
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除草剂生物测定
一、黄瓜幼苗形态法
（四）实验内容与方法
除草剂生物测定
如何选择指示植物？
➢ 供试植物易于培养； ➢ 供试植物个体一致； ➢ 在一定的剂量范围内，供试植物对除草剂的反
应随着剂量的增加，而有规律的提高；
➢ 在环境条件相同或相似的条件下，对被测定除
草剂的反应可重现。
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除草剂生物测定
如何确定培养条件？
生物测定是以生物材料测定除草剂的活性，而生物的 生长发育受环境条件的影响。所以，环境条件将导致生物 对除草剂反应的差异，从而影响测定结果的准确性与再现 性。可见，稳定的环境条件是保证生物测定高度准确性的 必要条件。在环境条件中，温度、水分、光照最易影响生 物测定结果。不同的生物测定方法中，需要确定不同的培 养条件。
各盘的平均值(mm)
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
三次重复 平均值(mm)
抑制率（％）
对照根长 处理根长 对照根长
100
抑制率(％)
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除草剂生物测定
二、玉米根长法
（一）实验目的
1. 掌握玉米根长法的生物测定原理——药剂浓度与玉米主根根长呈显著的相关 关系；
2. 了解玉米根长法的生物测定方法。
（二） 实验仪器设备
3．推算出未知药液的浓度。
各处理 浓度(mg/L)
ck 0.1（0.01） 0.5 （0.025） 1 （0.05） 3 （0.075） 5 （0.1） 7 （0.125） 未知药液
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除草剂生物测定
(4) 酶水平测定
对那些已知作用靶标酶的除草剂，如乙酰乳酸 合成酶抑制剂、乙酰辅酶A抑制剂，在生物测定时， 可在酶水平进行。通过测定除草剂对这些酶活性抑 制的强度来确定它们活性的大小。
2020/7/3
8Leabharlann 除草剂生物测定 实验安排：
第一组：玉米根长法（磺酰脲类、咪唑啉酮类、喹啉羰酸类） —— 二氯喹啉酸
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除草剂生物测定
如何选择评价指标？
指示植物对除草剂的反应可以通过各种指标来测定，适宜 的测定指标应当反应明显、容易观察与测量。由于除草剂类型 与品种不同，测定指标也各式各样，如种子发芽情况，根长、 芽长与株高，根、芽或植株的鲜重与干重以及生理与形态的变 化等。这些测定指标可以分为如下四类：
除草剂生物测定
1.概念 除草剂生物测定是通过测定除草剂对生物影响程度，来确定 它的生物活性、毒力或浓度的方法。 2. 应用 是除草剂品种筛选、研究除草剂活性、吸附、淋溶、降解及 在环境中归趋的重要手段。 3.除草剂生物测定的程序 ① 选择指示植物 ② 确定培养条件 ③ 选择评价指标
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除草剂生物测定
(2) 组织或器官水平测定
在组织或器官水平上的生物测定一般在实验室进行，常 用的有种子、叶片。用植物的种子进行生测时有两种方法：
一种是待测的药液加入底部铺有滤纸的培养皿或小杯中、 然后将种子置于滤纸上，盖上盖子后放在生长箱中培养。
另一种是在培养皿中装满沙子或蛭石，加入药液后再在 中间播一排种子，盖好盖子后，斜放在生长箱中培养。待各处 理的根或芽之间差异较明显时，测量根、芽长或鲜重，如用玉 米根长测定磺酰脲类等。
A. 整株水平测定
B. 组织或器官水平测定
C. 细胞或细胞器水平测定
D.酶水平测定
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除草剂生物测定
(1) 整株水平测定
整株水平测定是用整株植物来测定除草剂的毒力。一般是 在温室用盆栽方法培养供试植物，播前，或播后苗前，或苗后 喷药，培养的植物根据试验的需要来确定。在新除草剂筛选生 物测定时，整株测定是必不可少的一步。在整株测定中，评价 的指标可以是出苗率、株高、地上部的重量或地下部重量等， 也可根据植物受害的症状进行分级。对那些已知作用机制的除 草剂的生物测定，也可根据作用特点，测定特定的生理指标， 如CO2的释放量等。
配制药液
制作玻板
加药液
培养
观察结果
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除草剂生物测定
二、玉米根长法
（四）实验内容与方法-测咪唑乙烟酸
玉米种子催芽
配制药液
制作玻板
加药液
培养
观察结果
2020/7/3
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除草剂生物测定
二、玉米根长法
（五）作业与数据记录
1．测量各处理玉米主根根长，并求相对抑制率。
2．求出二氯喹磷酸、咪唑乙烟酸系列浓度与玉米主根根长相对抑制率之间的回归方程。
准备种子
配制药液
摆放种子
加药液
培养
观察结果
2020/7/3
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除草剂生物测定
一、黄瓜幼苗形态法
（五）作业与数据记录
1．描述2.4-D丁酯各处理的结果，并按比例绘出形态图谱。
2．求出2.4-D丁酯系列浓度与黄瓜初生根根长抑制率之间的直线回归方程。
3．推算出未知药液的浓度。
各处理 浓度(mg/L)
ck 0.5 1.0 10 100 1000 未知药液
微量可调移液器，万分之一电子天平，数字瓶口移液器，恒温培养箱，培养皿，量 筒，烧杯各，容量瓶，吸耳球，镊子，滤纸，玻璃棒，直尺等。
（三）实验材料
催芽的玉米、50%二氯喹磷酸可湿性粉剂、5％咪唑乙烟酸水剂 。
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除草剂生物测定
二、玉米根长法
（四）实验内容与方法-测二氯喹啉酸
玉米种子催芽
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除草剂生物测定
(3) 细胞或细胞器水平测定
细胞或细胞器水平测定一般是针对特定作用机制的除草剂， 常用的细胞器有叶绿体和线粒体。在离体叶绿体条件下，用分光 光度计或比色计在420nm处的吸收率来测定高铁氰化物还原的总 量，可测定出光合电子传递抑制剂活性。高铁氰化物还原量越大， 除草剂活性越低。在离体线粒体条件下，用瓦氏呼吸装置测定氧 的吸收和磷氧比，从而确定呼吸作用抑制剂活性。除草剂的活性 与氧吸收量和磷氧比成负相关，氧吸收越少，磷氧比越低，除草 剂的活性越强。