生活饮用水标准检验方法微生物指标[1]
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修订后的标准,微生物学指标增加为6项:菌落总数、总 大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和 隐孢子虫。
同时在资料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆 菌。
水质常规指标及限值
微生物指标
修订前
限值
修订后
微生物指标
限值
细菌总数 100 CFU/mL
菌落总数/(CFU/mL)
100
总大肠菌/(MPN/100mL或
培养条件:36±1℃ 培养4h ➢紫外灯:波长366nm,功率6W
➢酶底物法定义:在选择培养基上能产生β-半乳糖苷酶分 解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化,并能产 生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释放出荧光产物,使菌落 能够在紫外光下产生特征性荧光,以此技术来检测大肠埃 希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。
产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性 气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无 无芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜 芽胞杆菌。 粪便,具有指示菌的一般特征,故以 此作为粪便污染指标评价饮水的卫生 质量。 结果:5个10ml 管中阳性管数为0时, 结果:5个10ml 管中阳性管数为0时 MPN值为0(主要针对出厂自来水或 ,MPN值<2.2 需每天检验一次的水样)
修订前
修订后
微生物指标 限值 微生物指标
限值
-
肠球菌/(CFU/100mL)
0
-
产气荚膜梭状芽胞杆/(CFU/100mL)
0
一、菌落总数
修订前 细菌总数
原理:细菌总数是指水样在一定 条件下培养后(培养基成分、培 养温度和时间、pH、需氧性质等 )所得1ml水样所含菌落的总数。 按本规范规定所得结果只包括一 群能在营养琼脂上发育的嗜中温 的需氧的细菌菌落总数
培养条件:37℃ 18-24h
厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以
检测水中总大肠菌群的方法。
培养条件:37℃ 24±2h
酶底物法
酶底物法定义:总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β半乳糖苷酶的细菌群组,该细菌群组能分解色原底物释放出色原体 使培养基呈现颜色变化,以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。 培养基:MMO-MUG培养基(Minimal Medium ONPG-MUG)。 本方法可分为定性和定量。 定量法:10管法、51孔定量法 培养条件: 36±1℃ 24h
总大肠菌群 每100mL水样中不得检出 CFU/100mL)
不得检出
耐热大肠菌/(MPN/100mL
粪大肠菌群 每100mL水样中不得检出 或CFU/100mL)
不得检出
游离余氯
在与水接触30min后应不 大肠埃希氏菌/(
低于0.3mg/L,管梢末水不 MPN/100mL或CFU/100mL 不得检出
修订前
滤膜法
修订后
滤膜法原理:用孔径为0.45μm的 滤膜法定义:总大肠菌群滤膜法
微孔滤膜过滤水样,细菌被截留在 是指用孔径为0.45μm的微孔滤
滤膜上,将滤膜贴在选择培养上, 膜过滤水样, 将滤膜贴在添加乳
经培养后,计数生长在滤膜上的典 糖的选择培养上, 37℃ 培养24h
型大肠菌群菌落数。
,能形成特征菌落的需氧和兼性
生活饮用水标准检验方法微 生物指标[1]
我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB574985,标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用 水标准相比,主要差别在于微生物指标项目少,缺少有机 物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠 菌群2项,不能确切的评价水质的卫生状况。
应低于0.5mg/L
)
水质非常规指标及限值
修订前
修订后
微生物指标
限值
微生物指标
限值
-
贾第鞭毛虫/(个/10L)
<1
-
隐孢子虫/(个/10L)
<1
小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值
修订前
修订后
微生物指标
限值
微生物指标
限值
-
菌落总数/(CFU/100mL)
500
生活饮用水水质参考指标及限值
多管发酵法 24-72h 需要 较繁 显微镜 低
滤膜法 24-48h 需要 较简便 显微镜、过滤设备 低
酶底物法 24-28h 不需要 简便 压膜机 较高
三、耐热大肠菌群(埃希氏菌属、耐热克雷伯氏菌)
检测方法:多管发酵法、滤膜法
修订前
修订后
原理:用提高培养温度的方法将自 然环境中的大肠菌群与粪便中大肠 菌群区分开,在44.5℃仍能生长的 大肠菌群,称为粪大肠菌群。
能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点: 优点: ➢可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌 ➢检测时间较短,只需18-24h,最长需要28h ➢无需确证试验 ➢操作简单,对试验条件和人员要求低 ➢缺点: ➢检测成本高
时间 验证试验 步骤 特殊设备 价格
总大肠菌群三种方法的比较
修订后 菌落总数
定义:水样在营养琼脂上有氧条 件下37℃培养48h后,所得1ml水 样所含菌落的总数。
培养条件:36±1℃ 24h
36±1℃ 48h
二、总大肠菌群(埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷 伯氏菌属、肠杆菌属)
修除订多前管发酵法、滤膜法外,增修加订了后 酶底物检测方法
多群管在3发7℃酵法培原养理2:4h总能大发肠酵菌乳群糖多系、指管产一酸发酵总在法大37℃肠菌培群养定2义4h:能总发大酵肠乳菌糖群、指产一酸群产
定义:用提高培养温度的方法将自 然环境中的大肠菌群与粪便中大肠 菌群区分开,在44.5℃仍能生长的
大肠菌群,称为耐热大肠菌群。 Nhomakorabea四、大肠埃希氏菌
检测方法:多管发酵法、滤膜法、酶底物法 ➢大肠埃希氏菌多管发酵法定义:大肠埃希氏菌是指多管发酵法总大 肠菌群阳性,在含有荧光底物的培养基上44.5℃培养24h产生β-葡萄 糖酫酸酶,分解荧光底物释放出荧光产物,使培养基在紫外光下产生 特征性荧光的细菌,以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基:EC-MUG(4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖酫酸苷)。 培养条件:44.5±0.5℃ 培养24±2h。紫外灯:波长366nm,功率6W 大肠杆菌能产生β-葡萄糖酫酸酶分解MUG,菌落在366nm紫外光下产 生蓝色荧光 ➢滤膜法定义:用滤膜法检测水样后,将总大肠菌群阳性的滤膜 在含 有荧光底物的培养基上培养,能产生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释 放出荧光产物,使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光,以此来检测 水中大肠埃希氏菌的方法。 ➢培养基:NA-MUG
同时在资料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆 菌。
水质常规指标及限值
微生物指标
修订前
限值
修订后
微生物指标
限值
细菌总数 100 CFU/mL
菌落总数/(CFU/mL)
100
总大肠菌/(MPN/100mL或
培养条件:36±1℃ 培养4h ➢紫外灯:波长366nm,功率6W
➢酶底物法定义:在选择培养基上能产生β-半乳糖苷酶分 解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化,并能产 生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释放出荧光产物,使菌落 能够在紫外光下产生特征性荧光,以此技术来检测大肠埃 希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。
产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性 气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无 无芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜 芽胞杆菌。 粪便,具有指示菌的一般特征,故以 此作为粪便污染指标评价饮水的卫生 质量。 结果:5个10ml 管中阳性管数为0时, 结果:5个10ml 管中阳性管数为0时 MPN值为0(主要针对出厂自来水或 ,MPN值<2.2 需每天检验一次的水样)
修订前
修订后
微生物指标 限值 微生物指标
限值
-
肠球菌/(CFU/100mL)
0
-
产气荚膜梭状芽胞杆/(CFU/100mL)
0
一、菌落总数
修订前 细菌总数
原理:细菌总数是指水样在一定 条件下培养后(培养基成分、培 养温度和时间、pH、需氧性质等 )所得1ml水样所含菌落的总数。 按本规范规定所得结果只包括一 群能在营养琼脂上发育的嗜中温 的需氧的细菌菌落总数
培养条件:37℃ 18-24h
厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以
检测水中总大肠菌群的方法。
培养条件:37℃ 24±2h
酶底物法
酶底物法定义:总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β半乳糖苷酶的细菌群组,该细菌群组能分解色原底物释放出色原体 使培养基呈现颜色变化,以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。 培养基:MMO-MUG培养基(Minimal Medium ONPG-MUG)。 本方法可分为定性和定量。 定量法:10管法、51孔定量法 培养条件: 36±1℃ 24h
总大肠菌群 每100mL水样中不得检出 CFU/100mL)
不得检出
耐热大肠菌/(MPN/100mL
粪大肠菌群 每100mL水样中不得检出 或CFU/100mL)
不得检出
游离余氯
在与水接触30min后应不 大肠埃希氏菌/(
低于0.3mg/L,管梢末水不 MPN/100mL或CFU/100mL 不得检出
修订前
滤膜法
修订后
滤膜法原理:用孔径为0.45μm的 滤膜法定义:总大肠菌群滤膜法
微孔滤膜过滤水样,细菌被截留在 是指用孔径为0.45μm的微孔滤
滤膜上,将滤膜贴在选择培养上, 膜过滤水样, 将滤膜贴在添加乳
经培养后,计数生长在滤膜上的典 糖的选择培养上, 37℃ 培养24h
型大肠菌群菌落数。
,能形成特征菌落的需氧和兼性
生活饮用水标准检验方法微 生物指标[1]
我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB574985,标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用 水标准相比,主要差别在于微生物指标项目少,缺少有机 物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠 菌群2项,不能确切的评价水质的卫生状况。
应低于0.5mg/L
)
水质非常规指标及限值
修订前
修订后
微生物指标
限值
微生物指标
限值
-
贾第鞭毛虫/(个/10L)
<1
-
隐孢子虫/(个/10L)
<1
小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值
修订前
修订后
微生物指标
限值
微生物指标
限值
-
菌落总数/(CFU/100mL)
500
生活饮用水水质参考指标及限值
多管发酵法 24-72h 需要 较繁 显微镜 低
滤膜法 24-48h 需要 较简便 显微镜、过滤设备 低
酶底物法 24-28h 不需要 简便 压膜机 较高
三、耐热大肠菌群(埃希氏菌属、耐热克雷伯氏菌)
检测方法:多管发酵法、滤膜法
修订前
修订后
原理:用提高培养温度的方法将自 然环境中的大肠菌群与粪便中大肠 菌群区分开,在44.5℃仍能生长的 大肠菌群,称为粪大肠菌群。
能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色 酶底物法的主要特点: 优点: ➢可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌 ➢检测时间较短,只需18-24h,最长需要28h ➢无需确证试验 ➢操作简单,对试验条件和人员要求低 ➢缺点: ➢检测成本高
时间 验证试验 步骤 特殊设备 价格
总大肠菌群三种方法的比较
修订后 菌落总数
定义:水样在营养琼脂上有氧条 件下37℃培养48h后,所得1ml水 样所含菌落的总数。
培养条件:36±1℃ 24h
36±1℃ 48h
二、总大肠菌群(埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷 伯氏菌属、肠杆菌属)
修除订多前管发酵法、滤膜法外,增修加订了后 酶底物检测方法
多群管在3发7℃酵法培原养理2:4h总能大发肠酵菌乳群糖多系、指管产一酸发酵总在法大37℃肠菌培群养定2义4h:能总发大酵肠乳菌糖群、指产一酸群产
定义:用提高培养温度的方法将自 然环境中的大肠菌群与粪便中大肠 菌群区分开,在44.5℃仍能生长的
大肠菌群,称为耐热大肠菌群。 Nhomakorabea四、大肠埃希氏菌
检测方法:多管发酵法、滤膜法、酶底物法 ➢大肠埃希氏菌多管发酵法定义:大肠埃希氏菌是指多管发酵法总大 肠菌群阳性,在含有荧光底物的培养基上44.5℃培养24h产生β-葡萄 糖酫酸酶,分解荧光底物释放出荧光产物,使培养基在紫外光下产生 特征性荧光的细菌,以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。 培养基:EC-MUG(4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖酫酸苷)。 培养条件:44.5±0.5℃ 培养24±2h。紫外灯:波长366nm,功率6W 大肠杆菌能产生β-葡萄糖酫酸酶分解MUG,菌落在366nm紫外光下产 生蓝色荧光 ➢滤膜法定义:用滤膜法检测水样后,将总大肠菌群阳性的滤膜 在含 有荧光底物的培养基上培养,能产生β-葡萄糖酫酸酶分解荧光底物释 放出荧光产物,使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光,以此来检测 水中大肠埃希氏菌的方法。 ➢培养基:NA-MUG