乳粉中乳糖、蔗糖及总糖含量的测定 (1)

乳粉中乳糖、蔗糖及总糖含量的测定
（GB5413.5—2010第二法莱因―埃农氏法）
班级：组别：姓名：
一、原理
乳糖：试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝为指示剂，直接滴定已标定过的费林氏液，根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。

蔗糖：试样经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解为还原糖，再按还原糖测定。

水解前后的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。

二、试剂与配制
1、乙酸铅。

2、草酸钾。

3、磷酸氢二钠。

4、盐酸。

5、硫酸铜。

6、浓硫酸。

7、酒石酸钾钠。

8、氢氧化钠。

9、酚酞。

10、乙醇。

11、次甲基蓝。

12、乙酸铅溶液（200g/L）：称取200g乙酸铅，溶于水并稀释至1000mL。

13、草酸钾—磷酸氢二钠溶液：称取草酸钾30g，磷酸氢二钠70g，溶于水
并稀释至1000mL。

14、盐酸（1+1）：1体积盐酸与1体积的水混合。

15、氢氧化钠溶液（300g/L）：称取300g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000mL。

16、费林氏液（甲液和乙液）
16.1、甲液：称取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5mL浓硫酸，加水至
500mL。

16.2、乙液：称取173g 酒石酸钾钠及50g 氢氧化钠溶解于水中，稀释至500mL ，
静置两天后过滤。

16.3、费林氏液的标定 16.3.1、用乳糖标定
16.3.1.1、称取预先在94℃±2℃烘箱中干燥2h 的乳糖标样约0.75g （精确到
0.1mg ），用水溶解并定容至250mL 。

将此乳糖溶液注入一个50mL 滴定管中，待滴定。

16.3.1.2、预滴定：吸取10mL 费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL 三角烧瓶
中。

加入20mL 蒸馏水，放入几粒玻璃珠，从滴定管中放出15mL 样液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min 内沸腾，保持沸腾状态15s ，加入3滴次甲基蓝溶液，继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为止，读取所用样液的体积。

16.3.1.3、精确滴定：另取10mL 费林氏液（甲、乙液各5mL ）于250mL 三
角烧瓶中，再加入20mL 蒸馏水，放入几粒玻璃珠，加入比预滴定量少0.5mL ～1.0mL 的样液，置于电炉上，使其在2min 内沸腾，维持沸腾状态2min ，加入3滴次甲基蓝溶液，以每两秒一滴的速度徐徐滴入，溶液蓝色完全褪尽即为终点，记录消耗的体积。

1.1.4按式（1）、（2）计算费林氏液的乳糖校正值（f1）：
1
111142501000
m V m V A ⨯=⨯⨯=
(1)
11
114AL m V f ⨯⨯=
(2)
式中：
A1——实测乳糖数，单位为毫克（mg ）；
V1——滴定时消耗乳糖溶液的体积，单位为毫升（mL ）； m1——称取乳糖的质量，单位为克（g ）； f1——费林氏液的乳糖校正值；
AL 1——由乳糖液滴定毫升数查表1所得的乳糖数，单位为毫克（mg ）。

16.3.2、用蔗糖标定
16.3.2.1、称取在105℃±2℃烘箱中干燥2h 的蔗糖约0.2g （精确到0.1mg ），
用50mL 水溶解并洗入100mL 容量瓶中，加水10mL ，再加入10mL 盐酸（1+1），置于75℃水浴锅中，时时摇动，使溶液温度在67.0℃～69.5℃，保温5min ，冷却后，加2滴酚酞溶液（10.17），用氢氧化钠溶液（10.15）调至微粉色，用水定容至刻度。

16.3.2.2、预滴定：吸取10mL 费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL 三角烧瓶
中。

加入20mL 蒸馏水，放入几粒玻璃珠，从滴定管中放出15mL 样液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min 内沸腾，保持沸腾状态15s ，加入3滴次甲基蓝溶液，继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为止，读取所用样液的体积。

16.3.2.3、精确滴定：另取10mL 费林氏液（甲、乙液各5mL ）于250mL 三
角烧瓶中，再加入20mL 蒸馏水，放入几粒玻璃珠，加入比预滴定量少0.5mL ～1.0mL 的样液，置于电炉上，使其在2min 内沸腾，维持沸腾状态2min ，加入3滴次甲基蓝溶液，以每两秒一滴的速度徐徐滴入，溶液蓝色完全褪尽即为终点，记录消耗的体积。

16.3.2.4、按式（3）、（4）计算费林氏液的蔗糖校正值（f2）：
2
22225263.1095.01001000
m V m V A ⨯⨯=⨯⨯⨯=
(3)
2
2
225263.10AL m V f ⨯⨯=
(4)
式中：
A 2——实测转化糖数，单位为毫克（mg ）；
V 2——滴定时消耗蔗糖溶液的体积，单位为毫升（mL ）； m 2——称取蔗糖的质量，单位为克（g ）；
0.95——果糖分子质量和葡萄糖分子质量之和与蔗糖分子质量的比值； f2——费林氏液的蔗糖校正值；
AL2——由蔗糖溶液滴定的毫升数查表1所得的转化糖数，单位为毫克（mg ）。

17、酚酞溶液（5g/L ）：称取0.5g 酚酞溶于100mL 体积分数为95%的乙醇中。

18、次甲基蓝溶液（10g/L）：称取1g次甲基蓝于100mL水中。

三、仪器和设备
1天平：感量为0.1mg。

2水浴锅：温度可控制在75℃±2℃。

四、实验步骤
2、乳糖的测定
2.1试样处理
2.1.1称取婴儿食品或脱脂粉2g，全脂加糖粉或全脂粉2.5g，乳清粉1g，精
确到0.1mg，用100mL水分数次溶解并洗入250mL容量瓶中。

2.1.2徐徐加入4mL乙酸铅溶液（10.12）、4mL草酸钾—磷酸氢二钠溶液（10.13，
并振荡容量瓶，用水稀释至刻度。

静置数分钟，用干燥滤纸过滤，
弃去最初25mL滤液后，所得滤液作滴定用。

2.2滴定
2.2.1、预滴定：吸取10mL费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL三角烧瓶中。

加入20mL蒸馏水，放入几粒玻璃珠，从滴定管中放出15mL样液
于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，保持沸腾状
态15s，加入3滴次甲基蓝溶液，继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为
止，读取所用样液的体积。

2.2.2、精确滴定：另取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧
瓶中，再加入20mL蒸馏水，放入几粒玻璃珠，加入比预滴定量少
0.5mL～1.0mL的样液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，维持沸
腾状态2min，加入3滴次甲基蓝溶液，以每两秒一滴的速度徐徐
滴入，溶液蓝色完全褪尽即为终点，记录消耗的体积。

3蔗糖的测定
3.1样液的转化与滴定
3.1.1取50mL样液（2.1.2）于100mL容量瓶中，加水10mL，再加入10mL
盐酸（1+1），置于75℃水浴锅中，时时摇动，使溶液温度在67.0℃～
69.5℃，保温5min，冷却后，加2滴酚酞溶液（10.17），用氢氧化
钠溶液（10.15）调至微粉色，用水定容至刻度。

3.1.2预滴定：吸取10mL 费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL 三角烧瓶中。

加入20mL 蒸馏水，放入几粒玻璃珠，从滴定管中放出15mL 样液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min 内沸腾，保持沸腾状态15s ，加入3滴次甲基蓝溶液，继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为止，读取所用样液的体积。

3.1.3精确滴定：另取10mL 费林氏液（甲、乙液各5mL ）于250mL 三角烧
瓶中，再加入20mL 蒸馏水，放入几粒玻璃珠，加入比预滴定量少0.5mL ～1.0mL 的样液，置于电炉上，使其在2min 内沸腾，维持沸腾状态2min ，加入3滴次甲基蓝溶液，以每两秒一滴的速度徐徐滴入，溶液蓝色完全褪尽即为终点，记录消耗的体积。

五、分析结果的表述
1、乳糖
试样中乳糖的含量X 按式（5）计算
m V f F X ⨯⨯⨯⨯=
111100
25.0 (5)
式中：
X ——试样中乳糖的质量分数，单位为克每百克（g/100g ）； F1——由消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数，单位为毫克（mg ）； f1——费林氏液乳糖校正值；
V1——滴定消耗滤液量，单位为毫升（mL ）； m ——试样的质量，单位为克（g ）。

以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位
有效数字。

2、蔗糖
利用测定乳糖时的滴定量，按式（6）计算出相对应的转化前转化糖数X1。

m V f F X ⨯⨯⨯⨯=
122110025.0 (6)
式中：
X 1——转化前转化糖的质量分数，单位为克每百克（g/100g ）；
F 2——由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表1所得转化糖数，单位为毫克
（mg ）；
f 2——费林氏液蔗糖校正值；
V 1——滴定消耗滤液量，单位为毫升（mL ）； m ——样品的质量，单位为克（g ）。

用测定蔗糖时的滴定量，按式（7）计算出相对应的转化后转化糖X2。

m V f F X ⨯⨯⨯⨯=
2232100
50.0 (7)
式中：
X 2—转化后转化糖的质量分数，单位为克每百克（g/100g ）； F 3——由V 2查得转化糖数，单位为毫克（mg ）； f 2——费林氏液蔗糖校正值； m ——样品的质量，单位为克（g ）；
V 2——滴定消耗的转化液量，单位为毫升（mL ）。

试样中蔗糖的含量X 按式（8）计算
()95.012⨯-=X X X (8)
式中：
X ——试样中蔗糖的质量分数，单位为克每百克（g/100g ）； X1——转化前转化糖的质量分数，单位为克每百克（g/100g ）； X2——转化后转化糖的质量分数，单位为克每百克（g/100g ）。

以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位
有效数字。

3、若试样中蔗糖与乳糖之比超过3:1时，则计算乳糖时应在滴定量中加上
表2中的校正值数后再查表1。

数据记录表格
费林氏液的标定（乳糖）实验记录和数据处理
附表
乳粉中乳糖、蔗糖及总糖含量测定结果报告单
操作员：
检测地点：
年月日。