高效液相色谱法流动相配制标准操作规程

流动相配制操作规程

1 目的

明确高效液相色谱法流动相的配制过程，保证操作过程的规范性。

2 适用范围

适用于实验室高效液相色谱法流动相的配制。

3 职责

实验室分析人员负责按本规程进行操作。

4 定义

无。

5 内容

5.1 流动相批号的编写原则

流动相的批号按配制日期编制。如批号20150609代表2015年06月09日配制的流动相。

5.2流动相的配制

5.2.1含水流动相和不含水流动相的配制所用量筒应区分开。配制不含水的有机溶剂类流动相所用量筒必须是干燥的，不得有水。

5.2.2根据流动相配制规定的体积比例，在清洁的带塞量筒中分别倒入相应的溶剂；若该流动相需加入适量酸或碱，则戴上一次性手套，用专用注射器吸取规定体积的酸或碱，加入量筒；盖上塞子，摇匀，振摇过程中应注意排气。

5.2.3含盐的缓冲液类流动相的配制应根据流动相配制规定的体积比例，分别称取规定重量的盐于清洁的带塞量筒中，加入适量纯水，振摇；待固体完全溶解后，再加纯水至规定刻度，盖上塞子，摇匀。

5.2.4若该流动相对pH值有特殊要求，根据流动相配制规定的体积比例，用酸/碱调节pH值，用pH计测定，直至流动相的pH值在规定范围内。

5.3 流动相的抽滤

5.3.1 含水流动相和不含水流动相的抽滤装置应区分开。抽滤不含水的有机溶剂类流动相所用装置必须是干燥的，不得有水。

5.3.2抽滤装置准备：将过滤器套在三角瓶上，用镊子夹取0.45um的水系或有机滤膜一张，放在过滤器上（滤膜应将滤孔完全覆盖住）；再将量杯压在滤

膜上，量杯边缘和过滤器的边缘对齐；用夹子将过滤器和量杯的边缘固定在一起（注意调整夹子的位置，不得将抽滤嘴挡住）；将抽滤软管口润湿后，套在抽滤嘴上。

5.3.3 抽滤：将少量配制好的流动相倒入量杯，观察是否有漏液。若有漏液现象，须重新固定过滤器和量杯。若无漏液现象，则继续往量杯中倒入流动相（注意：不要超过最大刻度），开启真空泵进行抽滤。抽滤结束时，先将抽滤软管拔下，再关闭真空泵。

5.4 流动相的储存及标识

将适量抽滤好的流动相倒入流动相专用储液瓶，润洗一次后倒入废液瓶，再将剩余流动相全部倒入专用储液瓶；填写《流动相标签》，并将标签贴在储液瓶上。《流动相标签》见附录1。更换流动相时应及时更新《流动相标签》。

5.5 流动相效期

例如：纯甲醇使用日期是2015年06月11日，有效期至2015年09月10日；甲醇与缓冲盐混合溶液配制日期是2015年03月10日，有效期至2015年03月16日。

5.6 配制流动相用量筒和抽滤器具的清洁

5.6.1配制含水流动相用量筒和抽滤器具的清洁：先用自来水清洗配制用量筒及抽滤所用的三角瓶、过滤器和量杯，再用纯水润洗3次，待用。

5.6.2配制不含水流动相用量筒和抽滤器具的清洁：先将适量配制待用的纯有机溶剂倒入安装好的抽滤装置中，润洗后抽滤，再将抽滤后的纯有机溶剂倒入量筒中润洗，待用。

5.7记录填写流动相配制后，配制人员将配置过程记录在实验记录本或检验记录上。

5.8注意事项

5.8.1流动相配制应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水。

5.8.2过滤流动相时应注意区分水系膜和油系膜的使用范围，防止误用。

5.8.3配制不含水流动相的抽滤器具及储存容器应清洁干燥，不得带水。

5.8.4每次使用前应对流动相进行超声波脱气处理5－10分钟（瓶盖松开）。

5.8.5不含有机溶剂的水溶液类流动相的专用储液瓶每次使用前应进行刷洗，再用自来水冲洗，最后用纯水润洗3次。

6 相关文件

6.1《中国药典》附录高效液相色谱法

6.2《柱液相色谱分析法通则》GB/T 16631

7 相关记录

7.1流动相配制标签

8 附录1 流动相标签