人参_西洋参及桔梗的凝胶电泳鉴别

文章编号:1004-2113(1999)04-0256-02

收稿日期:1999-05-30;修回日期:1999-09-24作者简介:杨九艳(1963~)女,内蒙古医学院药学系讲师。

人参、西洋参及桔梗的凝胶电泳鉴别

杨九艳1,青 梅1,杰俊峰2,郭艳春2

(1.内蒙古医学院药学系;2.药学系95级实习生)

摘 要: 目的:对人参、西洋参和桔梗进行蛋白电泳分析。方法:聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果:人参、西洋参和桔梗的电泳谱带有明显差异。结论:用该法能够鉴别三种药材,且方法简便,结果可靠。

关键词:人参;西洋参;桔梗;凝胶电泳中图分类号:R93115 文献标识码:A

蛋白质是生命活动的体现者,它在生物种属间就不会是同质的,蛋白质序列是种的特征,因此,利用蛋白质种类的不同来鉴别那些亲缘关系相近、性状类同的中药是有理论依据的,在实验方法上也是有效可行的

[1]

。聚丙烯酰胺凝胶电泳就是近些年

据此而发展起来的中药鉴定新技术,且得到了广泛应用。由于传统的性状鉴别易受人为因素影响,通常需要多种方法配合才能准确鉴定。目前,中药鉴定的发展方向是,中药鉴别客观化、标准化、现代化。凝胶电泳鉴别技术,为中药鉴别学科开辟了新的领域,并提供了一项新的检测手段和生化指标,使中药鉴别方法更趋合理,完善[2]。本文用此法对几种药材进行鉴别,方法简便,结果可靠。

人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.M ey.)的干燥根,西洋参为五加科植物西洋参(panax quinquefolium L.)的根,桔梗为桔梗科植物桔梗[Platycodon g randiflorum (Jacq.)A.DC.]的干燥根。人参与西洋参因同科同属,亲缘关系相近,外部形态相似,极易混淆

[3]

。且人参、西洋参为名

贵药材,价格较高,而桔梗来源广泛、价格较低,因此在市场上有冒充人参、西洋参出售的现象。本文采用凝胶电泳技术对人参、西洋参、桔梗进行了鉴别。

1 材料和方法1.1 材 料

人参,取自药学系中草药教研室;西洋参、桔梗

为市售品。以上材料均经鉴定。1.2 方 法

1.2.1 实验试剂及凝胶的制备参照文献[4,5]方

法进行。

1.2.2 样品制备 分别把实验材料捣碎,过50目筛,各称取样品粉末015g,分别加入稀释4倍的浓缩胶缓冲液4m l,在研钵中研磨匀浆,转移到离心

管中,3500r/min 离心15min,取上清液置冰箱中

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备用。

1.2.3 电泳 取样品上清液,用微量进样器点样20L l,在上槽的电极缓冲液中加入2滴溴酚蓝指示剂示踪。电泳开始时电流控制在10mA,待样品进入分离胶后电流加大到20mA,整个电泳过程维持电流强度不变。待示踪指示剂距前沿约1cm 时停止电泳,取出胶板,用011%的考马斯亮蓝R 250染色,在37e 染色1h,再用含20%甲醇和7%醋酸的脱色液脱色,反复更换脱色液,直至背景清晰为止。

2 结果和讨论

根据胶板的前沿位置及各级谱带的位置,计算各谱带的电流迁移率(Rf),并由此绘制电泳图谱。电泳谱带根据染色深浅可分为三级:染色深而明显的为一级带,染色较深的为二级带,染色浅但可以分辨的为三级带

[6]

。

由图可知,人参有2条一级带,1条二级带;西

洋参有2条一级带,1条三级带;桔梗有2条一级带,1条二级带,1条三级带。以上结果表明人参、西洋参和桔梗的谱带条数、级别,分布及Rf 均有明显差异,可以作为三者的鉴别依据。以上实验重复多次,重现性好,结果可靠。3 参考文献

1 周荣汉.药用植物化学分类学[M ].上海:上海科学技术出版

社,1985.178~182

2 李隆云,刘榴.电泳技术在中药材中的应用进展[J ].中国中医

药科技.1998,5(1):63~64

3 任仁安,陈瑞华.中药鉴定学[M ].上海:上海科学技术出版社,

1992.121~126

4 袁晓华,植物生理生化实验[M ].北京:高等教育出版社,1983.

223~243

5 石俊英.山东鬼针草属种子的电泳分析[J ].中国中药杂志.

1992,17(12):717~719

6 黄韶光,王祖恩.冬虫夏草及其混淆品的蛋白电泳鉴别[J ].中

国中药杂志.1990,15(1):13

IDENTIFICATION OF PANAX GINSENG ,P.QUINQUEFOLIUM AND PLATYCODON GRANDIFLORUM BY GEL ELECTROPHORESIS

YANG Jiu -yan,QING M ei,JIE Jun -feng,GUO Yan -chun

(Dep ar tment of Phar macy ,I nner M ongolia M edical College,H ohhot 010059)

Abstract Objective:To analyse the electrophoretograms of Panax ginseng,P.quinquefolium and Platycodon g randiflorum.M ethods:Polyacry lamide gel electrophoresis (PAGE ).Results:The protein

electrophoretograms of Panax ginseng,P.quinquefolium and Platycodon grandiflorum were quite different.Each of them has its own characteristic band.Conclusion:This provides a method for the identification of the three drugs.T he method is simple and convenient.The result is reliable and good.

Key words Panax ginseng;P.quinquefolium;Platycodon grandiflorum;PAGE

(责任编辑:牛亚华)

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