实验三寄生虫学粪便检查法三
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B、平皿幼虫分离法:
取培养好的粪样1-2g_放入平皿中 _加40℃的温水(以浸没粪便为宜)_ 静置(5-10′)_去粪便_镜检平皿中 的液体。
C、直接检查法:
取少量培养好的粪样_置于载玻片上 _滴清水_静置(30′)_镜检
作业: 将计算方法和检查结果写出。
麦克马斯特操作方法:
取样(2g)_加饱和盐水(58ml)_ 充分混匀_过滤_混匀后立即用吸管注 入计数室内_静置(1-2分钟)_镜检。
计算公式:
每克粪便中的虫卵数=全部计数室的 虫卵总数/计数室的个数×200
2、线虫幼虫的检查法:
方法:在平皿中垫上一层吸水纸--将含有虫 卵的粪便(混匀)--放入平皿中(如粪便太 干燥时洒适量的水,如太湿时应洒适量的炭 末)--塑成半球状(压平并略高出平皿口)-放入恒温箱内(25-30℃,夏天可放在室 内,根据情况可适当洒点水,以保持吸水纸 的潮湿度)--经过7-10天的时间--就会发育 成第三期幼虫。
实验三、寄生虫学粪便检查法(三)
一、目的
通过本次实验学习掌握线虫幼虫的检查方
法、学习掌握虫卵的计数方法;了解线虫幼 虫的形态。
二Βιβλιοθήκη Baidu内容
1、学习虫卵计数法
a)简易计数法
b)麦克马斯特计数法
2、学习线虫幼虫检查法
a)幼虫培养法
b)温水引诱法
本次实验的意义:
学习虫卵计数法的操作技术,对于我 们判定宿主感染寄生虫病的强度,或者 检验驱虫药使用后的效果如何,都有着 重要的参考价值。
实验内容:
1、虫卵计数法:(只适用于线虫卵和球虫卵囊) (1)简易计数法: (2)斯陶尔法; (3)麦克马斯特计数法。 2、线虫幼虫检查法: (1)线虫幼虫的培养方法; (2)温水引诱法; (3)毛蚴孵化法:
四、操作方法
1、虫卵计数法:
(1)、简易计数法:
取粪样(1g)_加清水(10-15倍)_ 搅拌均匀_过滤_静置(30-40分钟) _倒去上清液_再加饱和盐水_混匀_ 倒入青霉素瓶_用吸管加满并使之凸出 瓶口_加上盖玻片_静置(20-30分钟) _垂直取下盖玻片_镜检_并盖上另一 块盖玻片(一般要检三片以上)。
再接一个沉淀管,并准备一个止水夹和铜 滤筛。
滤筛
漏斗 胶管 试管
操作方法:
取培养好的粪样(10-20g)_用两层纱 布包扎好_置于漏斗中的铜筛中_沿漏斗边 缘加入37-40℃的温水(以淹盖粪样为佳) _静置(1-2小时)_夹好止水夹_取下沉 淀管_吸去上清液_取沉渣镜检。
如果没有沉淀管时,在加温水之前应夹好 止水夹,静置(1-2小时)后,收集下面一 部分水,进行离心后取沉渣镜检。
观察:
线虫的种类很多而它们排出的虫卵, 在形态、结构和大小上极为相似,因此, 以虫卵来鉴别线虫的种类是较困难的, 只有通过培养出第三期幼虫(即具有感 染力的幼虫),才能根据幼虫的形态结 构来进行鉴定。
(2)、温水引诱法:
A、贝尔曼法: 该方法检出率高,适用于检查各种线虫的 幼虫,包括土壤、饲料和器官内的幼虫检查。 贝尔曼分离器装制:用一个直径为10- 15cm的漏斗,下接一条10-15cm长的胶管,
1、寄生虫排卵有一定的规律性,因此,宿主 所排出的粪便中虫卵的含量就会有所很大差异, 而且虫卵在同一个粪样中,分布也是不均匀的;
2、粪便的浓稠程度的不同,虫卵的含量也会 不同。
如果要想获得较为准确的数据,不仅要克服主 观上的不足外,还要将被检宿主在24小时内所排 出的粪便全部收集起来,经充分混合均匀后,称 量好总量,按一定的比例来称取粪样,通过换算 后,得出的结果才是较为准确的数据。
用吸管将粪液加满并使之凸出瓶口
(2)、麦克马斯特计数法;
麦克马斯特计数板的规格:它由两块玻片 所组成,其间隔距离为1.5mm,上面的盖 玻片上一般有1-2个1 平方厘米的方格, 每个计数室的体积为o.15立方厘米,容量 为o.15ml。
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麦克马斯特计数板
原理:
由于计数室内充满了用漂浮液制成的 粪液,因此,在计数室内体积小、比重 轻的虫卵漂浮在上面,而粪渣则沉于下 面,当视野感觉模糊时往往所看到的是 该室的底部沉渣,当清晰见到上面的线 条时,才能找到虫卵,由于有线条的规 范,有效地防止了漏检或重检。