36份枣品种SSR指纹图谱的构建_麻丽颖

园艺学报 2012，39（4）：647–654 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@https://www.360docs.net/doc/d07740183.html, 36份枣品种SSR指纹图谱的构建

麻丽颖1，孔德仓2，刘华波1，王斯琪1，李颖岳1，庞晓明1,*

（1北京林业大学计算生物学中心，林木育种国家工程实验室，林木、花卉遗传育种教育部重点实验室，北京 100083；2河北省沧县枣树国家良种基地，河北沧州 061000）

摘 要：利用12对SSR引物对36个枣品种进行分析，采用荧光M13毛细管电泳技术进行多态检测，共检测到99个多态位点，每对引物的多态位点数达到8.25，PIC值变幅为0.62 ~ 0.85，平均为0.75。依

据12对SSR引物在36个品种中扩增的特异带型组合，采用引物—带型组合法构建了36个枣品种的指纹

图谱，并对这36份枣品种做聚类分析，遗传相似系数在0.6667 ~ 0.9444之间。研究结果为枣树分类、种

质鉴定和分子育种提供了重要的工具。

关键词：枣；SSR；指纹图谱；毛细管电泳；遗传相似性

中图分类号：S 665.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2012）04-0647-08 Construction of SSR Fingerprint on 36 Chinese Jujube Cultivars

MA Li-ying1，KONG De-cang2，LIU Hua-bo1，WANG Si-qi1，LI Ying-yue1，and PANG Xiao-ming1,*（1Center for Computational Biology，National Engineering Laboratory for Tree Breeding，Key Laboratory of Genetics and Breeding in Forest Trees and Ornamental Plants，Ministry of Education，Beijing Forestry University，Beijing 100083，China；2National Improved Cultivar Station of Jujube，Cangzhou，Hebei 061000，China）

Abstract：In this study，36 Chinese jujube cultivars were analyzed by capillary electrophoresis using fluorescent M13 multi-state detection method with 12 pairs of newly developed SSR primers. Totally，99 polymorphic alleles were revealed，with an average of 8.25 for each primer pairs. Polymorphism information content values for the primer pairs ranged from 0.62–0.85，with an average of 0.75. A strategy of combining primer pair with distinct alleles for fingerprint construction was developed and applied to the 36 cultivars. The genetic similarities among cultivars range from 0.6667 to 0.9444，on which a phenetic tree showing the relationship among the cultivars was constructed. The present results provide valuable tools for the cultivar classification，germplasm identification and molecular breeding of Chinese jujube.

Key words：jujube；SSR；fingerprint；capillary electrophoresis；genetic similarity

枣（Ziziphus jujuba Mill.）原产于中国，至今已经发现和记载的枣树品种和优良类型达880多种（刘孟军和汪民，2009）。但枣树品种或类型命名比较混乱，同名异物和同物异名的情况较严重，如“冬枣”就有多个不同地方命名的品种，因此亟需准确的种质和品种鉴定方法。传统形态鉴别法不仅鉴定周期长、可利用标记少和易受环境因素的影响，而且对一些性状差异小的品种鉴定困难。RAPD、

收稿日期：2011–12–22；修回日期：2012–03–26

基金项目：中央高校基本业务费项目（BLYX200924，JD-03）；林业公益性行业专项（201004017）

* 通信作者Author for correspondence（E-mail：xmpang@https://www.360docs.net/doc/d07740183.html,）

648 园艺学报39卷

AFLP、SRAP和ISSR等分子标记也被用于枣的指纹图谱构建和亲缘关系分析（彭建营等，2002；赵锦和刘孟军，2003；刘平等，2005；马庆华和续九如，2006；王永康等，2007；李莉等，2009；乔勇等，2009），但由于各自的局限都未被广泛应用。SSR和SNP在国际植物新品种权保护联盟（UPOV）的BMT分子测试指南中被确定为构建DNA指纹数据库的标准标记方法，由于SSR标记技术比较成熟，成为当前各个作物建库的首选标记（UPOV，2007）。

SSR是指基因组中存在的1 ~ 6个碱基的简单串联重复序列，又称为微卫星DNA，广泛分布于真核生物基因组的编码区和非编码区，具有丰富的多态性（Wu & Huang，2007）。SSR标记为共显性标记，稳定性好且适合于自动化分析。这些优点使其成为一种理想的分子标记而广泛应用于种质资源保存、遗传多样性分析、基因定位、DNA指纹和分子标记辅助育种等方面的研究（Li et al.，2002）。现已构建了玉米（王凤格等，2003）、水稻（庄杰云等，2006）、小麦（Róder et al.，2002）、柑橘（雷天刚等，2009）、番茄（Bredemeijer et al.，2002）等主要作物的基于SSR标记的指纹图谱。近期Ma等（2011）开发了一批枣树SSR引物，但至今尚未见枣树SSR指纹图谱构建的报道。作者利用本实验室新开发的高多态性SSR引物分析了36个枣树品种，并开发了一种指纹图谱构建的方法，以期为枣树品种鉴定和亲缘关系分析等提供工具。

1 材料与方法

1.1材料

36个枣品种（表1）保存在北京林业大学枣树育种和栽培实践基地（河北沧州）。2011年5月，取春季刚长出的新鲜叶片，用保鲜袋封存后置于冰盒带回北京林业大学林木育种国家工程实验室/林木、花卉遗传育种教育部重点实验室，液氮冷冻后放置于–70 ℃冰箱中保存待用。

表 1 供试材料

Table 1 List of materials used in the study

编号样品材料原产地用途形态特征

Code Sample name Origin Usage Main characteristics

S01 绵枣 Mianzao河北 Hebei鲜食 Fresh 果实圆柱形，果皮红色 Fruit cylindrical，peel red

S02 三变丑 Sanbianchou河南 Henan制干 Dry 果实长椭圆形或长卵形，果皮中厚偏薄

Fruit long ellipsoid or long ovate，peel medium thick，partial thin

S03 酥枣 Suzao河南 Henan鲜食 Fresh 果实卵圆形，果皮紫红 Fruit ovoid，peel purple

S04 美蜜枣 Meimizao山西 Shanxi鲜食 Fresh 果实圆柱形，果皮红色 Fruit cylindrical，peel red

S05 广洋大枣

Guangyang Dazao 河南 Henan制干 Dry 果实近圆形，果皮薄，深红色

Fruit nearly round，peel thin and dark red

S06 灵宝大枣 Lingbao Dazao 河南 Henan制干 Dry 果实多为短圆筒形，果皮深红Fruit short cylindrical，peel dark red S07 紫枣Zizao 河北 Hebei兼用 More usages果实近圆形，果皮紫红色，有紫黑色点

Fruit nearly round，peel purple with purple black spots

S08 满城屯屯Manchengtuntun河北 Hebei制干 Dry果实短而宽，果皮浅红色Fruit of short and wide，peel light red

S09 辣椒枣 Lajiaozao河北 Hebei鲜食 Fresh 果实长锥形或长椭圆形，果皮薄，紫红色

Fruit long-tapered or long ellipsoid，peel thin and purple

S10 官滩枣 Guantanzao山西 Shanxi制干 Dry 果实长圆形，果皮厚，深红色 Fruit oblong，peel thick and dark red S11 早脆王 Zaocuiwang河北 Hebei鲜食 Fresh 果实卵圆形，果皮鲜红 Fruit ovoid，peel bright red

S12 冷白玉 Lengbaiyu山西 Shanxi鲜食 Fresh 果实倒卵圆形，果皮薄Fruit ovoid pour，peel thin

S13 冬枣6号

Dongzao 6河北 Hebei鲜食 Fresh果实近圆形；果皮脆薄，赭红色

Fruit nearly round，peel thin and red ochre

S14 八升湖 Bashenghu陕西 Shaanxi兼用 More usages果实近圆形，果皮鲜红Fruit nearly round，peel bright red

S15 上海白葡

Shanghai Baipu 上海 Shanghai鲜食 Fresh果实长鸡心形，果皮薄，赭红色

Fruit long chicken heart-shaped，peel thin and red ochre

S16 灰枣3号 Huizao 3河南 He’nan兼用 More usages果实长卵形，果皮橙红色 Fruit long-ovoid，peel salmon pink S17 长木枣 Changmuzao山东 Shandong制干 Dry 果实长圆形，果皮浅红色 Fruit oblong，peel light red

4期 麻丽颖等：36份枣品种SSR 指纹图谱的构建 649

续表1

编号 样品材料 原产地

用途 形态特征 Code Sample name Origin

Usage Main characteristics

S18 义乌枣 Yiwu Zao 浙江 Zhejiang

蜜枣

Sugar treatment

果实圆柱形，果皮较薄，赭红色

Fruit cylindrical ，peel thin and red ochre

S19 连县木枣

Lianxian Muzao 广东 Guangdong 蜜枣

Sugar treatment 果实中等大，圆锥形，果皮中厚，红

Fruit medium to large and conical ，peel medium thick and red

S20 板枣50号 Banzao 50 山西 Shanxi

兼用 More usages 果实扁倒卵形，果皮中厚，紫红色

Fruit ovoid pourd and flat ，peel medium thick and purple

S21 软核枣 Ruanhezao 不详 Unknown 制干 Dry 果实长圆形，果皮赭红色 Fruit oblong ，peel red ochre

S22 婆枣52号 Pozao 52 河北 Hebei 制干 Dry

果实长圆形，果皮薄，棕红色 Fruit oblong ，peel thin and palm red S23 宣城圆枣

Xuancheng Yuanzao 安徽 Anhui

蜜枣

Sugar treatment

果实大，近圆形，果皮薄，赭红色

Fruit large and nearly round ，peel thin and red ochre S24 短果长红

Duanguo Changhong 山东 Shandong 制干 Dry

果实短柱形，果皮赭红色

Fruit short cylindrical ，peel red ochre

S25 金丝硕星Jinsi Shuoxing 河北 Hebei

兼用 More usages 果色鲜红，果点小 Peel bright red with smaller fruit dots S26 金丝小枣 Jinsixiaozao 河北 Hebei

兼用 More usages 果实小，果形多样，果皮薄，鲜红色

Fruit small and shape varied ，peel thin and bright red

S27 金丝4号 Jinsi 4 山东 Shandong 兼用 More usages 果实长圆形，果皮薄，浅红棕色

Fruit oblong ，peel thin and light palm red S28 蜂蜜罐 Fengmiguan 陕西 Shaanxi 鲜食 Fresh 果实近圆形，果皮薄，鲜红色Fruit nearly round ，peel thin and bright red S29 怀柔大脆枣

Huairou Dacuizao 北京 Beijing 鲜食 Fresh

果实卵圆形或长椭圆形，果皮褐色

Fruit ovoid or long ellipsoid ，peel brownish

S30 小木枣 Xiaomuzao 河北 Hebei 兼用 More usages 果实卵圆或长圆形，果皮紫红色Fruit ovoid or oblong ，peel purple S31 磨塞子枣 Mosai Zizao 山东 Shandong 制干 Dry

果实卵圆形，果皮赭红色 Fruit ovoid ，peel red ochre S32 蚂蚁枣 Mayizao 宁夏 Ningxia 鲜食 Fresh 果实短柱形，果皮深红色 Fruit short cylindrical ，peel dark red S33 黎城小枣 Licheng Xiaozao 山西 Shanxi 兼用 More usages 果实卵圆形，果皮红色 Fruit ovoid ，peel red

S34 无核76 Wuhe 76 河北 Hebei

制干 Dry

果实扁圆柱形，果皮薄，鲜红色

Fruit cylindrical and flat ，peel thin and bright red

S35 鲁枣10号 Luzao 10 山东 Shandong 鲜食 Fresh

果实呈短圆形 Fruit short round

S36

鲁枣8号 Luzao 8

山东 Shandong 兼用 More usages 果实呈椭圆形 Fruit oval

1.2 枣叶片DNA 提取和SSR-PCR 扩增

取1片新鲜叶片，用改良CTAB 方法提取基因组DNA 。在研磨叶片时加入适量PVP ，65 ℃水浴60 min 后用等体积酚︰氯仿

（1︰1）抽提后再用等体积氯仿抽提，用等体积冰冻的异丙醇沉淀DNA ，用2%琼脂糖凝胶电泳检测含量后保存于–20 ℃冰箱待用。

SSR 引物（表2）由金唯智（北京）生物科技有限公司合成，利用三引物法PCR （即在5′端加有M13尾巴序列的特异正向引物、特异反向引物及带有荧光标记的通用型M13引物，利用毛细管

表 2 SSR 引物信息表

Table 2 SSR primers used in this study

引物名称

Primer name

重复基序 Repeat motifs

正向引物（5′–3′） Forward primer

反向引物（5′–3′） Reverse primer

目标片段长度/bp Expected length

BFU0277 (GA)11 GCACTACCCTGTGGAACTCAA AGTGTTGACCTGGCAAGAAGA 236 BFU0083 (CT)13 TTTTCCAACCCTCCCTCCA CCTCATAACTGCGACGGCTT 181 BFU0574 (CA)7 GAAGGTTGAAGATGCTCTCTCT CCTGACATCCATTTGAAGGAA 114 BFU1205 (CA)8 TGTTGCTGGTTCAATTCCAG CTTATGGCTTTTTCATTTTGTGA 151 BFU0528 (TC)8 TTTGTGAGGTATAATGGCTTTCA

GCCTCTGTTGAAGCAAGGAA 244

BFU1157 (GA)9 TCCCTAAATTACCCTTCCCAAT AAAGCGACAGCGAAAACTGT 234 BFU0581 (CA)7 TGAGAAGGTTGAAGATGCTCTC CCTGACATCCATTTGAAGGAA 117 BFU1248 (ATTA)4 TCCCACCACTTTCCTCTCAT TTTTTCAAGACCTCCACGATG 163 BFU0377 (CT)10 CCAGCTGGTATCCAATTGCT ACGACGATGCCATGAAAGAT 283 BFU0561 (CT)7 CCAGATGTGTCTCGATGCTT TGCTCCATGCTTCTGGTATG 235 BFU1383 (ATTA)3 TGTTGCTGGTTCAATTCCAG CTTATGGCTTTTTCATTTTGTGA 151 BFU0308 (TC)11 TTTCCACCCCAAAATACCAA

AGACGCTGGATGAGGATGAT 176

650 园艺学报39卷

电泳技术可以同时检测不同荧光染料标记的多个SSR位点）扩增SSR位点。

SSR-PCR反应体系为10 μL，包括成分为：10 ~ 15 ng基因组DNA，5 μL 2 × Taq PCR mix（博迈德生物科技有限公司），反向引物和带荧光标记的M13正向引物各3.2 pmol，0.8 pmol 正向引物。PCR程序如下：94 ℃ 5 min预变性；94 ℃ 30 s 、55 ℃ 40 s、72 ℃ 45 s，30个循环；94 ℃ 30 s、53 ℃ 40 s、72 ℃ 45 s，8个循环；72 ℃ 10 min（Schuelke，2000）。

1.3毛细管电泳检测

PCR产物送金唯智（北京）生物科技有限公司进行毛细管电泳检测，用Gene-Marker软件（Soft Genetics LLC，USA）进行数据分析。

1.4数据分析

对Gene-Marker软件获得原始数据经Flexibin（Amos et al.，2007）程序修正后转化成0，1格式，建立原始矩阵后用NTSYS-pc 2.10e软件（Rohlf，1994）进行后续分析。计算多态性位点百分率P（%）=（k/n）× 100，其中k是多态位点数，n为所测位点总数。SSR位点的多态性信息量（poly- morphism information content，PIC）按如下计算公式进行计算：PIC = 1–ΣP i2，式中P i表示第i个等位位点出现的频率（Botstein et al.，1980）。利用NTSYS中的Qualitative date模块计算任意两个品种间的相似系数（GS）。其计算公式为GS = 2N ij /（N i + N j），其中N i j为材料i和j共有的扩增片段总数，N i为材料i中出现的扩增片段数，N j为材料j中出现的扩增片段数。以clustering程序中SHAN 进行UPGMA（非加权组平均法）聚类分析，绘制亲缘关系树状图。

1.5指纹图谱构建

以所分析的SSR引物名称为前缀，该标记在某样品上扩增带的分子量为后缀，得到每个品种在某个标记的带型编号。按照固定的引物排序综合不同引物分析结果，串联各带型编号，形成该品种的SSR指纹图谱。

2 结果与分析

2.1毛细管电泳结果

从本实验室开发的冬枣SSR引物中筛选出12对引物，对36份样品进行分析。12对引物在36个品种中共扩增出99条带且都是多态条带，多态位点百分率达100%；各引物多态条带数量为3 ~ 16，平均每对引物能扩增到8.25个多态性片段。各引物的PIC值变幅为0.62 ~ 0.85，平均为0.75（表3）。

表3 12对SSR引物的多态检测

Table 3 Twelve pairs of SSR primers detected polymorphism

引物名称Primer name 多态位点数

Polymorphic loci

number

多态信息含量

PIC

引物名称

Primer name

多态位点数

Polymorphic loci

number

多态信息含量

PIC

BFU0277 6 0.62 BFU0581 10 0.74

BFU0083

7 0.76 BFU1248

5 0.78 BFU0574

10 0.73 BFU0377

10 0.77 BFU1205

6 0.7

7 BFU0561

9 0.70 BFU0528

8 0.81 BFU1383

3 0.62 BFU1157 9 0.80 BFU0308 16 0.85

总计 Total 99

平均 Mean 8.25 0.75

4期 麻丽颖等：36份枣品种SSR 指纹图谱的构建 651

图1为部分枣品种用引物BFU1205扩增检测图示例，以其中的单峰图为例，表示在172.6 bp 处为单一扩增片段，扩增DNA 产物的相对数量为10 000。

图1 两个枣品种在BFU1205号引物中的毛细管电泳检测图

Fig. 1 Two sample images of capillary electrophoresis detection results for jujube cultivars with BFU1205 primer

2.2 指纹图谱

根据12对核心引物扩增结果的峰图，准确读出条带的大小，经Flexibin （Amos et al.，2007）修正，可以将所有品种区分开，最少只用4对引物组合（BFU0574、BFU0581、BFU0377和BFU0308）就可以将36份品种完全区分（表4）。其中引物BFU0308的多态位点数达16个，可以区分绵枣、广阳大枣、三变丑等19个品种。

表4 36个枣品种的SSR 指纹图谱

Table 4 Fingerprint of 36 jujube cultivars based on SSR markers

品种编号Cultivar code

指纹图谱Fingerprint

S01 BFU0574，107，141/BFU0581，109，143/BFU0377，299，303/BFU0308，192，194 S02 BFU0574，107，107/BFU0581，109，109/BFU0377，295，303/BFU0308，190，192 S03 BFU0574，107，107/BFU0581，109，109/BFU0377，295，299/BFU0308，172，194 S04 BFU0574，107，137/BFU0581，109，139/BFU0377，295，303/BFU0308，190，192 S05 BFU0574，107，137/BFU0581，109，139/BFU0377，295，301/BFU0308，170，198 S06 BFU0574，107，115/BFU0581，109，117/BFU0377，295，295/BFU0308，170，194 S07 BFU0574，107，129/BFU0581，109，131/BFU0377，295，303/BFU0308，172，194 S08 BFU0574，129，137/BFU0581，131，139/BFU0377，295，295/BFU0308，158，172 S09 BFU0574，113，137/BFU0581，115，139/BFU0377，295，297/BFU0308，170，192 S10 BFU0574，107，113/BFU0581，109，115/BFU0377，295，301/BFU0308，158，172 S11 BFU0574，107，137/BFU0581，115，139/BFU0377，295，303/BFU0308，170，172 S12 BFU0574，113，137/BFU0581，115，139/BFU0377，295，303/BFU0308，170，172 S13 BFU0574，107，137/BFU0581，139，141/BFU0377，295，301/BFU0308，194，196 S14 BFU0574，107，119/BFU0581，109，121/BFU0377，295，301/BFU0308，178，192 S15 BFU0574，107，107/BFU0581，109，109/BFU0377，289，295/BFU0308，170，192 S16 BFU0574，129，141/BFU0581，131，143/BFU0377，295，303/BFU0308，172，192 S17 BFU0574，107，115/BFU0581，109，117/BFU0377，301，303/BFU0308，192，198 S18 BFU0574，107，113/BFU0581，109，115/BFU0377，295，299/BFU0308，172，196 S19 BFU0574，113，121/BFU0581，115，123/BFU0377，295，301/BFU0308，172，194 S20 BFU0574，113，121/BFU0581，115，123/BFU0377，301，303/BFU0308，174，196 S21 BFU0574，113，121/BFU0581，115，123/BFU0377，295，303/BFU0308，172，180 S22 BFU0574，119，121/BFU0581，121，123/BFU0377，291，295/BFU0308，178，178 S23 BFU0574，107，113/BFU0581，109，115/BFU0377，299，301/BFU0308，170，196 S24 BFU0574，121，123/BFU0581，123，125/BFU0377，281，301/BFU0308，164，172 S25 BFU0574，107，139/BFU0581，109，141/BFU0377，301，303/BFU0308，170，192 S26 BFU0574，107，139/BFU0581，109，141/BFU0377，301，303/BFU0308，172，178 S27 BFU0574，107，113/BFU0581，109，115/BFU0377，295，295/BFU0308，172，192 S28 BFU0574，107，107/BFU0581，109，109/BFU0377，299，303/BFU0308，192，198 S29 BFU0574，121，137/BFU0581，123，139/BFU0377，299，303/BFU0308，186，192 S30 BFU0574，107，107/BFU0581，109，109/BFU0377，297，301/BFU0308，168，170

652 园艺学报39卷

续表4

品种编号Cultivar code指纹图谱Fingerprint

S31 BFU0574，107，107/BFU0581，109，109/BFU0377，295，303/BFU0308，176，194

S32 BFU0574，107，121/BFU0581，109，123/BFU0377，295，301/BFU0308，158，170

S33 BFU0574，107，141/BFU0581，109，141/BFU0377，295，305/BFU0308，170，174

S34 BFU0574，107，139/BFU0581，109，139/BFU0377，295，295/BFU0308，170，192

S35 BFU0574，107，115/BFU0581，109，117/BFU0377，279，279/BFU0308，156，170

S36 BFU0574，107，139/BFU0581，109，139/BFU0377，295，295/BFU0308，158，194 注：品种详见表1。

Note：Cultivar see Table 1.

2.3聚类分析

以各品种12对引物的扩增带型为基础，以0，1格式表示，其中数据缺失记为2，用NTSYS 软件进行UPGMA法聚类分析得出36个品种的聚类图（图2）。各品种间遗传相似系数范围为0.6667 ~ 0.9444，平均相似系数为0.82，其中绵枣（S01）与早脆王（S11），金丝硕星（S25）与无核76（S34）相似系数最大，说明亲缘关系很近；冬枣6号（S13）与短果长红（S24）之间的遗传相似系数为0.6667，说明这两个品种之间的亲缘关系较远；金丝硕星（S25）、无核76（S34）、长木枣（S17）和小木枣（S30）都与金丝小枣（S26）有较近的亲缘关系，聚成了一个小类群。本研究结果把鲁枣10号（S35）和黎城小枣（S33）也聚在了这一小类群内，鲁枣10号是金丝小枣的实生后代，所以与金丝小枣的亲缘关系比较近，而黎城小枣（S33）与鲁枣8号（S36）遗传相似系数达到0.9286，说明黎城小枣（S33）也与此类群有较近的亲缘关系；婆枣52（S22）与其它35个品种的遗传相似系数都比较低，在0.7左右，说明与其它品种的亲缘关系较远。

图2 36个枣品种的SSR聚类分析图

品种详见表1。

Fig. 2 Dendrogram of 36 jujube cultivars based on SSR markers

Cultivar see Table 1.

4期麻丽颖等：36份枣品种SSR指纹图谱的构建 653 3 讨论

本研究中揭示的枣的多态等位位点（allele）比率为100%，而白瑞霞（2008）用AFLP和SRAP 标记的结果分别为64.30%和54.87%。一方面可能是由于本研究所用SSR引物是从1 489条引物中经过两次筛选得到的多态性引物，具有很高的区分能力，多态位点比率达100%；另一方面可能是所分析的材料中有较多的亲缘关系很近的品种，会使多态位点比率偏低。本研究分析的枣品种之间平均相似系数为0.82，相比核桃（0.70）等树种更高，表明枣栽培品种的遗传多样性相对比较小。

在聚类图中，不同采集地的枣品种并没有聚在一起，反映了枣品种复杂的亲缘关系，可能是由于各地之间品种交流频繁所导致。无核76、长木枣和小木枣都与金丝小枣有较近的亲缘关系，聚成了一个小类群，这与用AFLP和SRAP的聚类分析（白瑞霞，2008）和RAPD分析（赵锦和刘孟军，2003）的结果一致。金丝硕丰是由在河北省沧县发现的一个变异类型选育而成，与无核76有较近的亲缘关系，其来源尚待进一步的研究。金丝4号为金丝小枣的实生后代，但并没有与金丝小枣聚成一类，而与连县木枣聚在一起，可能其父本与连县木枣有较近的亲缘关系。

指纹图谱在植物品种鉴定、亲子分析、品种注册、分辨真假杂种以及知识产权保护等方面具有重要作用。本研究采用毛细管电泳检测技术，建立了一个枣种质SSR标记分析系统，并采用以片段分子量为基础的核心引物组合法来构建枣品种的指纹图谱。与聚丙烯酰胺凝胶电泳法相比，尤其是在分析大量材料时，毛细管电泳技术具有突出的优点，既节约大量贵重试剂，降低成本，又可减少排废污染（易红梅等，2006）。但毛细管电泳检测技术较灵敏，容易检测出PCR的非目标扩增产物，稳定的标记应通过聚丙烯酰胺凝胶或扩增产物序列测定等方法验证。本研究中采用的核心引物组合法构建指纹图谱，直观、清晰、简单，具有较好的扩展性。今后可能需要更多的多态引物去构建枣种质资源的指纹库，引物—带型组合法可以很方便地增加新引物。

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