CdS量子点荧光光度法测定蛋白质的含量
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
基 金项 目 ：国 家 自然 科 学 基 金 项 目（０ ７ ０ ２ 和 省 部共 建 河 南 大 学 科研 项 目资 助 ２８５２）
第３卷， ２ １ 第 期
２０ １ １年 ２月
光
谱
学 与 光
谱
分
析
Ｓ ｅｔｏ ｃ ｐ ｎ ｐ ｃｒ ｌ ｐ ｃｒ ｓ ｏ ｙ ａ ｄ Ｓ ｅ ｔａ ａｙ ｉ Ａｎ ｌ ｓｓ
Ｖｏ ． １ Ｎｏ ２ ｐ ４ ４４ ２ １３ ， ． ，ｐ ４ — ４ Ｆ ｂ ｕ ｒ ，２ １ ｅｒａｙ ０ １
１ ２ Ｃ ｓ量 子 点 的 制 备 ． ｄ
在 ８ Ｌ的烧 杯 中，依 次加入 蒸馏水 ５ Ｉ、Ｃ Ｃ ２ ＯＩ ｎ ０ｍ ｄ １
ｍＬ、 偏 磷 酸 钠 ３ｍＩ 巯 基 乙 酸 ５ｍＬ， Ｎａ Ｈ 溶 液 调 节 六 Ｊ 、 用 ０
种很有 发展潜力 的新犁荧光生物探针 ， 光学 特性 与传统 其
２ 结果与讨论 １ 实验部分
２ １ 量 子 点 合 成 条 件 的 选 择 ． １ １ 试 剂 与 仪 器 ． 牛血 清 白蛋 自 （ Ｓ Ｂ Ａ，国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司 ） ；Ｄ
收稿 日期 ：２ １ ５１ ，修订 日期 ：２ １－８２ ０ ００ ０ ０ ００ —０
Ｆ ７０ 荧光光 度计 （ －０ ０ 日本 日立 Ｈｉ ｃ ｉ 司） ａｔｃ－ ｔ ｈ公 ａ ；Ｌ ｂｅｈ １０ ０ ０紫外一 可见分光 光度计 （ 北京 莱伯泰 科仪 器有 限公 司） ；
ｐ －Ｃ 犁 酸度 计 （ 海 大 普 仪 器 有 限 公 司 ） Ｄ ４型 恒 温 ＨＳ３ Ｔ 上 ；Ｃ
ＲБайду номын сангаас 冲溶液 、含 适量 Ｂ Ａ 的溶 液 ，蒸 馏水 稀 释至 刻 度 ，摇 Ｓ
匀 。于 １ ５℃温 度 下 反 应 １ ｎ ５ｍｉ，在 激 发 波 长 ３ ２ｒ 发 射 ７ ｍ， ｉ 波 长 ５ ０ｎ ｌ 进 行 荧 光 测 定 。 ３ ｎ 处
关系 。 据此 ， 建立 了 Ｃ Ｓ ， ｄ 荧光法测定蛋 白质含量的新 方法 。
Ｃ Ｓ量子 点 荧光 光 度法测 定 蛋 白质 的含量 ｄ
胡 卫平 ，焦 嫂 ，董 学 芝 ， 王 鑫
河 南 大 学 化学 化 工 学 院 环 境 与 分析 科 学 研 究 所 ， 南 开 封 河 ４ ５ ０ ７０ ４
摘 要
利用荧光光度法测定食品 中蛋 白质的含量 ；实验 以六 偏磷酸钠 为稳定剂 ，巯基 乙酸为修饰 剂水相 范围
ｐ 值到 ７０ 在磁力搅 拌器作 用下 ，缓慢加 入 ＮａＳ３ｍＬ Ｈ ．。 ｚ ，
搅 拌 ２ｈ ，得 到 一定 粒 径 大 小 的 Ｃ Ｓ ｄ。
１ ３ 实 验 方 法 ． 在 １ ｏｍＬ容 量 瓶 中 ， 入 ２ ５ｍＩＣ Ｓ溶 液 、 ． １ Ｉ 加 ． ｄ １ ５ｎｌ ｝ Ｊ
合成了具有优异 光学性质 的 Ｃ Ｓ晕子点 。 ｄ 基于 Ｃ Ｓ与牛血清 白蛋 白（ Ｓ 反应后 ， ｄ Ｂ Ａ） 荧光强度显著增强 ， 建立 了 Ｃ Ｓ荧光光度法测定蛋白质 的新方法 ； 系的荧光强度与 Ｂ Ａ浓度在 ０ ０ １４ ～Ｏ ２０ｍｇ・ ｄ 体 Ｓ ． ０ ３ ． ５ ｎ ｍｇ・ 『 该法用于牛奶、蛋清 中蛋 白质 含量 的测定 ， 与标 准方 法（ ｍＬ ； 并 双缩脲法） 做对照 ， 结果满意 。 关键词 虽 子点 ；牛血清白蛋白；荧光光 谱
的维持 ， 遗传信息的传递 ， 物质的代尉及 运转都 与蛋 白质有
关， 故蛋 门质是人体重要的营养物质 ， 是食 品中重要 的营 也 养指标 。目前蛋 ｆ质含量的测 定方法很 多，主要 为甲醛滴定 Ｌ ｊ
法 ｆ 、 光 光 度 法 、 振 光 散 射 法 ｌ 、电 感 耦 合 等 离 子 体 质 分 ｆ 共 ２ ］
中 图 分 类号 ： ６ ７ ３ ０ ５．
引 言
蛋 白质是生命 的物质基础 ，人体 内的酸碱平衡 、水平衡
混 合 溶 液 ， ０ ０ ｌ Ｉ 的 Ｎ ＯＨ 调 至所 需 ｐ 值 ） 用 ． ２ｍｏ ・ ａ Ｈ ；巯 基 乙酸 （． ｌ Ｌ ） 六 偏 磷 酸 钠 （． ｌ Ｌ ） Ｃ Ｃ ２ Ｏ１ ｍｏ ・ ， Ｏ１ ｍｏ ・ ， ｄ １ （． ｌ Ｌ ） ＮａＳ ０ １ｍｏ ・ ） Ｏ １ｍｏ ・ ， ２ （． ｌ Ｌ ，所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 ，实 验用 水 为 二 次 蒸 馏 水 。
有机染料 干 比有 明显 的优越性 ，冈此在生命科学 中有很好 的 Ｈ
发 展 前 景 。 最 近 ， 过 不 同方 法 合 成 的 革 子 点 已 有 不 少 报 道 ¨ ， 通 ６ 但 一 利 用 合 成 的荧 光量 子 点 对 样 品 中蛋 白质 的 测 定 报 道 较 少 。 本 实 验 以 六 偏磷 酸钠 为 稳 定 剂 ， 基 乙酸 为 修 饰 剂 水 相 合 成 了 巯 荧 光 试剂 Ｃ Ｓ昔 子 点 ， 究 表 明 ，随着 Ｂ Ａ 的加 入 ，Ｃ Ｓ荧 ｄ 研 Ｓ ｄ 光 强 度增 强 ， 日与 ｔ Ａ 浓 度 在 一 定 范 围 内 有 良好 的 线 性 并 ｜ ｋ Ｓ
文献标识码 ： Ａ Ｒ缓 冲溶 液 （ 浓 度 均为 ０ ０ ｌ Ｌ 的 硼 酸 、磷 酸 、 酸 取 ． ４ｍｏ ・ 醋 内 呈 良好 的线 性 关 系 ， 性 方 程 为 Ｆ一５４ ４ ３ １０ ＋４ ． ２ ９，相 关 系 数 ｒ ．９ ， 出 限 为 ０ ０ １４ 线 ４ ． ０ ３ ３３ ７３ ｃ 一０ ９ ６６ 检 ． ０
谱间接法 等 。荧光法凶具有 多种测定参 数 、 择性好 、灵 ｊ 选 敏度高而应用 厂 泛 ，但 是 ，由于蛋 白质 本 身 的 内源 荧 光很
弱 ， 采 用 有 机 染 料 结 合 法 。近 年 来 ，量 子 点 （ Ｄｓ作 为 多 Ｑ ）
一
加热磁力搅拌器（ 郑州长城科工贸有限公 司） 。
第３卷， ２ １ 第 期
２０ １ １年 ２月
光
谱
学 与 光
谱
分
析
Ｓ ｅｔｏ ｃ ｐ ｎ ｐ ｃｒ ｌ ｐ ｃｒ ｓ ｏ ｙ ａ ｄ Ｓ ｅ ｔａ ａｙ ｉ Ａｎ ｌ ｓｓ
Ｖｏ ． １ Ｎｏ ２ ｐ ４ ４４ ２ １３ ， ． ，ｐ ４ — ４ Ｆ ｂ ｕ ｒ ，２ １ ｅｒａｙ ０ １
１ ２ Ｃ ｓ量 子 点 的 制 备 ． ｄ
在 ８ Ｌ的烧 杯 中，依 次加入 蒸馏水 ５ Ｉ、Ｃ Ｃ ２ ＯＩ ｎ ０ｍ ｄ １
ｍＬ、 偏 磷 酸 钠 ３ｍＩ 巯 基 乙 酸 ５ｍＬ， Ｎａ Ｈ 溶 液 调 节 六 Ｊ 、 用 ０
种很有 发展潜力 的新犁荧光生物探针 ， 光学 特性 与传统 其
２ 结果与讨论 １ 实验部分
２ １ 量 子 点 合 成 条 件 的 选 择 ． １ １ 试 剂 与 仪 器 ． 牛血 清 白蛋 自 （ Ｓ Ｂ Ａ，国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限 公 司 ） ；Ｄ
收稿 日期 ：２ １ ５１ ，修订 日期 ：２ １－８２ ０ ００ ０ ０ ００ —０
Ｆ ７０ 荧光光 度计 （ －０ ０ 日本 日立 Ｈｉ ｃ ｉ 司） ａｔｃ－ ｔ ｈ公 ａ ；Ｌ ｂｅｈ １０ ０ ０紫外一 可见分光 光度计 （ 北京 莱伯泰 科仪 器有 限公 司） ；
ｐ －Ｃ 犁 酸度 计 （ 海 大 普 仪 器 有 限 公 司 ） Ｄ ４型 恒 温 ＨＳ３ Ｔ 上 ；Ｃ
ＲБайду номын сангаас 冲溶液 、含 适量 Ｂ Ａ 的溶 液 ，蒸 馏水 稀 释至 刻 度 ，摇 Ｓ
匀 。于 １ ５℃温 度 下 反 应 １ ｎ ５ｍｉ，在 激 发 波 长 ３ ２ｒ 发 射 ７ ｍ， ｉ 波 长 ５ ０ｎ ｌ 进 行 荧 光 测 定 。 ３ ｎ 处
关系 。 据此 ， 建立 了 Ｃ Ｓ ， ｄ 荧光法测定蛋 白质含量的新 方法 。
Ｃ Ｓ量子 点 荧光 光 度法测 定 蛋 白质 的含量 ｄ
胡 卫平 ，焦 嫂 ，董 学 芝 ， 王 鑫
河 南 大 学 化学 化 工 学 院 环 境 与 分析 科 学 研 究 所 ， 南 开 封 河 ４ ５ ０ ７０ ４
摘 要
利用荧光光度法测定食品 中蛋 白质的含量 ；实验 以六 偏磷酸钠 为稳定剂 ，巯基 乙酸为修饰 剂水相 范围
ｐ 值到 ７０ 在磁力搅 拌器作 用下 ，缓慢加 入 ＮａＳ３ｍＬ Ｈ ．。 ｚ ，
搅 拌 ２ｈ ，得 到 一定 粒 径 大 小 的 Ｃ Ｓ ｄ。
１ ３ 实 验 方 法 ． 在 １ ｏｍＬ容 量 瓶 中 ， 入 ２ ５ｍＩＣ Ｓ溶 液 、 ． １ Ｉ 加 ． ｄ １ ５ｎｌ ｝ Ｊ
合成了具有优异 光学性质 的 Ｃ Ｓ晕子点 。 ｄ 基于 Ｃ Ｓ与牛血清 白蛋 白（ Ｓ 反应后 ， ｄ Ｂ Ａ） 荧光强度显著增强 ， 建立 了 Ｃ Ｓ荧光光度法测定蛋白质 的新方法 ； 系的荧光强度与 Ｂ Ａ浓度在 ０ ０ １４ ～Ｏ ２０ｍｇ・ ｄ 体 Ｓ ． ０ ３ ． ５ ｎ ｍｇ・ 『 该法用于牛奶、蛋清 中蛋 白质 含量 的测定 ， 与标 准方 法（ ｍＬ ； 并 双缩脲法） 做对照 ， 结果满意 。 关键词 虽 子点 ；牛血清白蛋白；荧光光 谱
的维持 ， 遗传信息的传递 ， 物质的代尉及 运转都 与蛋 白质有
关， 故蛋 门质是人体重要的营养物质 ， 是食 品中重要 的营 也 养指标 。目前蛋 ｆ质含量的测 定方法很 多，主要 为甲醛滴定 Ｌ ｊ
法 ｆ 、 光 光 度 法 、 振 光 散 射 法 ｌ 、电 感 耦 合 等 离 子 体 质 分 ｆ 共 ２ ］
中 图 分 类号 ： ６ ７ ３ ０ ５．
引 言
蛋 白质是生命 的物质基础 ，人体 内的酸碱平衡 、水平衡
混 合 溶 液 ， ０ ０ ｌ Ｉ 的 Ｎ ＯＨ 调 至所 需 ｐ 值 ） 用 ． ２ｍｏ ・ ａ Ｈ ；巯 基 乙酸 （． ｌ Ｌ ） 六 偏 磷 酸 钠 （． ｌ Ｌ ） Ｃ Ｃ ２ Ｏ１ ｍｏ ・ ， Ｏ１ ｍｏ ・ ， ｄ １ （． ｌ Ｌ ） ＮａＳ ０ １ｍｏ ・ ） Ｏ １ｍｏ ・ ， ２ （． ｌ Ｌ ，所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 ，实 验用 水 为 二 次 蒸 馏 水 。
有机染料 干 比有 明显 的优越性 ，冈此在生命科学 中有很好 的 Ｈ
发 展 前 景 。 最 近 ， 过 不 同方 法 合 成 的 革 子 点 已 有 不 少 报 道 ¨ ， 通 ６ 但 一 利 用 合 成 的荧 光量 子 点 对 样 品 中蛋 白质 的 测 定 报 道 较 少 。 本 实 验 以 六 偏磷 酸钠 为 稳 定 剂 ， 基 乙酸 为 修 饰 剂 水 相 合 成 了 巯 荧 光 试剂 Ｃ Ｓ昔 子 点 ， 究 表 明 ，随着 Ｂ Ａ 的加 入 ，Ｃ Ｓ荧 ｄ 研 Ｓ ｄ 光 强 度增 强 ， 日与 ｔ Ａ 浓 度 在 一 定 范 围 内 有 良好 的 线 性 并 ｜ ｋ Ｓ
文献标识码 ： Ａ Ｒ缓 冲溶 液 （ 浓 度 均为 ０ ０ ｌ Ｌ 的 硼 酸 、磷 酸 、 酸 取 ． ４ｍｏ ・ 醋 内 呈 良好 的线 性 关 系 ， 性 方 程 为 Ｆ一５４ ４ ３ １０ ＋４ ． ２ ９，相 关 系 数 ｒ ．９ ， 出 限 为 ０ ０ １４ 线 ４ ． ０ ３ ３３ ７３ ｃ 一０ ９ ６６ 检 ． ０
谱间接法 等 。荧光法凶具有 多种测定参 数 、 择性好 、灵 ｊ 选 敏度高而应用 厂 泛 ，但 是 ，由于蛋 白质 本 身 的 内源 荧 光很
弱 ， 采 用 有 机 染 料 结 合 法 。近 年 来 ，量 子 点 （ Ｄｓ作 为 多 Ｑ ）
一
加热磁力搅拌器（ 郑州长城科工贸有限公 司） 。