银杏叶黄酮的提取与含量测定
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银杏叶黄酮的提取与含量测定
摘要:本论文以银杏叶为原材料,用乙醇提取法提取银杏中的黄酮类物质,分别以银杏叶重量的9倍量和6倍量的7O%乙醇回流浸提两次,减压浓缩,加水沉降离心,过大孔吸附树脂柱,以80%乙醇洗脱,减压浓缩,真空
干燥。得到的银杏叶提取物其黄酮含量在33%以上,并以不同浓度的乙醇
和水来分析黄酮的收率。
关键词:黄酮;大孔树脂;提取;乙醇
Abstract: The present paper take the gingko leaf as material,ethanol
extraction of Ginkgo biloba extract flavonoids substances , Ginkgo biloba
respectively to the weight of nine times and six times the volume of 7O %
ethanol extraction twice ,decompression nrichment,Centrifugal water
settlement , with the pocket adsorption Resin Column, To 80% ethanol
eluting , decompression enrichment, Vacuum Drying .The flavonoid content
above 33% about the extraction of Ginkgo leaf, The yield of flavonoids was
analyzed by the ethanol and water with different concentrations.
Keywords: Flavonones ,he pocket adsorption Resin Column,xtraction,thanol
1 前言
银杏 (G inkgob iloba)为银杏科(Ginkgoaceae)银杏属(Ginkgo)多年落叶乔木,属于距今二亿多年前中生代侏罗纪的裸子植物,现仅存一科一属一种,有裸子植物“活化石”之称[1]。盛产我国、日本及朝鲜半岛。银杏的果实称白果,其中富含脂油、蛋白质、淀粉、碳水化合物、胡萝卜素、维生素以及多种氨基酸。而银杏叶因其提取物中含有大量药用有效成分银杏黄酮及内脂,而倍受青睐。1.1 银杏叶资源分布
我国是银杏资源大国,拥有量占全世界总量的70%以上,资源相当丰富,大部分地区都有种植,北起辽宁,南至广东,东自台湾,西达甘肃,覆盖20多个省区,栽培中心在江苏、安徽、浙江一带。
随季节、产地、树龄和品种等的不同,银杏叶中黄酮类和内脂36类含量明显不同,4月份银杏叶总黄酮含量最高为1.4﹪,8月份稍低为0.6﹪,不同季节银杏叶总黄酮和总内脂的含量变化,也认为银杏叶若以黄酮为主要成分,采收的最
适宜季节为5月,如果以内脂为主要成分,采收的最适宜季节为9月。综合两个指标,8-9月份采收的银杏叶总内脂及总黄酮含量均高[2]。
居调查采集同一地区,同一时间的银杏叶,4年生树黄酮含量为1.26﹪,20年生树降为0.51﹪, 20年生树降0.02﹪。各研究表明,银杏黄酮和银杏内脂都以1-6年生幼树中含量最高,因此在生产银杏叶提取物时应以幼树采集较好。
1.2 银杏叶有效成分的应用
20世纪70年代以来,国内外学者对银杏叶的化学成分、药理作用及应用开发进行了大量研究工作。它主要运用于改善心脑血管循环 ;保健食品;化妆品等几个方面[3]。
1.3 银杏叶主要化学成分及结构
银杏叶中己发现了100多种化学成分。主要有黄酮类、内脂类、聚异戊烯醇类、有机酸、银杏酚酸类及烷基酚、烷基酚酸等。银杏叶中主要有效成分是黄酮类和内脂类化合物[4]。
2 实验材料与仪器
2.1 实验材料
银杏叶(采于校园)、芦丁、大孔树脂、亚硝酸铺、硝酸铝、无水乙醇均为AR 级、自来水等。
2.2 实验仪器
电子天平、烧杯、DS~1型高速组织捣拌机、电热恒温水浴锅、紫外可见分光光度计、高速冷冻离心机、真空浓缩仪、玻璃棒、纱布、抽滤纸。
3 实验步骤
(1) 称取干燥粉碎的银杏叶100g,加入900ml不同浓度的乙醇水浴加热浸提,水浴温度控制在70~75度,间隔搅拌浸提2h,纱布过滤。
(2) 滤渣再加入600m不同浓度的乙醇水浴加热浸提2h,纱布过滤,合并浸提液,抽滤,残渣弃之。
(3) 真空减压蒸馏回收乙醇,得浓缩液200ml。
(4) 浓缩液加3倍量的蒸馏水自然沉降5h,离心分离,得澄清透明离心液沉降残渣可下批套用再次沉降。离心时间为15min,离心机转速为12000rpm,温度为l6℃。
(5) 为使提取物中黄酮含量进一步提高,采用大孔树脂对离心液进行分离精制按树脂体积的4倍量取离心液过柱,待离心液流过后,用蒸馏水过柱洗涤,至流出液清亮为止,再加入25%乙醇洗涤,用量与树脂体积等同,流干洗涤液,然后用80%乙醇洗脱。收集颜色较深部分,洗脱液减压浓缩,真空低温干燥,得到淡黄色产品。
4 实验的工艺流程
5 讨论与分析
5.1 浸取溶剂的选择
浸取时所选用的溶剂一般要求价廉、无腐蚀性、闪点高、无爆炸性、无毒、选择性好,易于除去和回收。由于银杏叶黄酮类化合物主要用于药物,食品和化妆品,因此所选用的浸取溶剂除具有一般要求外,还应不含有任何致癌物质。目前,从银杏叶中浸取黄酮类化合物主要有热水抽提和有机溶剂浸取。常用的有机溶剂是乙醇、丙酮和甲醇。由于甲醇、丙酮等毒性较大,因此一般采用乙醇作为浸取剂[5]。
乙醇作为浸取剂具有选择性高,渗透性强,浸出率高等优点,但乙醇具有蒸