蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监测中应用
微核1
蚕豆根尖细胞微核技术检测的应用摘要：利用微核检测技术，用蚕豆跟尖作材料，以蒸馏水为对照，检测工业污水、生活污水、自来水、阳性因子（NaN3）的诱变能力。
结果表明，阳性因子对蚕豆跟尖的诱变效果最明显，微核率为106.6‰。
关键词：微核；蚕豆跟尖；阳性因子；诱变微核（micronuclei,MCN）是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变的另一种形式，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的〔1〕。
蚕豆根尖细胞微核试验(Micronucleus test，MC—NT)技术，它灵敏度高、操作技术简单，且蚕豆根尖细胞的染色体大，DNA含量高。
因此，微核检测方法可用于环境污染，辐射损伤，化学诱变剂等的监测[2-6]。
近年来，蚕豆微核试验被广泛应用于环境污染，辐射损伤，化学诱变剂等的监测。
我国在1985年开始研究应用蚕豆根尖微核技术直接监测淡水湖泊的水质情况[7-8]。
因而，诱变物污染状况的研究对环境整治有非常重要的现实意义。
本文用蚕豆根尖细胞微核技术对阳性因子(NaN3)诱变能力进行检测。
1.材料与方法1.1试验材料本实验选用四川农业大学提供的优质蚕豆(Vicia faba)种子。
试剂：6mol/L盐酸甲醇冰乙酸醋酸洋红、叠氮钠（NaN3）、EMS、工业污水、生活污水等。
器皿：显微镜计数器镊子载玻片盖玻片烧杯瓷盘剪刀等。
1.2 实验方法1.2.1 材料制备与处理浸种催芽：按实验需要选取大小均匀、的蚕豆种子，直接放入盛有自来水的烧杯中，在23.6℃下浸种24h，此间换水2次，所换水预温25℃。
种子吸胀后，将蚕豆种于有锯木榍的瓷盘中，用草纸覆盖并浇上自来水保持湿度，在23.6℃恒温箱中催芽48h。
大部分初生根长至1-2cm时，根毛发育良好，便可以进行检测。
用待测液处理根尖：本组选取24粒初生根生长良好、根长一致的种子，放入盛有阳性因子的培养皿中，浸没根尖。
另外用自来水作对照、各处理根尖12h。
根尖细胞恢复培养：用蒸馏水浸洗3次，每次3 -5 min；再剪去幼芽，洗净后在置于有锯木榍的瓷盘中，在23.6℃进行恢复培养24 h。
应用蚕豆微核技术监测渭河宝鸡段水质污染状况
应用蚕豆微核技术监测渭河宝鸡段水质污染状况李爱玲;贾盼【摘要】The root tip cell micronucleus of V icia faba treated with water samples of upstream、midstream and downstream re-gion of Weihe River Baoji section respectively was test. The results showed that the Baoji section on the middle and lower reaches of Weihe River water samples of micronucleus rate were 1.23‰,1.65‰ and 1.74‰ on average,respectively. Pollution index were 1.84(light pollution),2.46(moderate pollution) and 2.60(moderate pollution). As the degree of water pollution be-ing aggravating,the content of H2O2 and MDA showed a trend of rise.%采用蚕豆根尖细胞微核技术,对渭河宝鸡段的上、中、下游水样进行检测.结果表明,渭河宝鸡段上、中、下游水样的微核率平均分别为1.23‰、1.65‰和1.74‰;污染指数分别为1.84(轻度污染)、2.46(中度污染)和2.60(中度污染).随着水污染程度的加重,过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)呈升高趋势.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2017(056)024【总页数】4页(P4727-4730)【关键词】蚕豆;渭河;微核率;污染指数【作者】李爱玲;贾盼【作者单位】陕西学前师范学院生命科学与食品工程学院,西安 710061;陕西学前师范学院生命科学与食品工程学院,西安 710061【正文语种】中文【中图分类】X522;X132宝鸡市依托渭河而立，是中原通往西南、西北的交通枢纽，陕、甘、川、宁四省（区）毗邻地区的商贸和物流中心，是西部大开发承东启西的重要支点。
环境污染物的蚕豆根尖微核试验
环境污染物的蚕豆根尖微核试验实验内容随着工农业生产的迅速发展，新的化学物质和工业“三废”不断地进入人们的生活环境，它们中有许多可能对遗传物质产生损害并造成致癌、致畸、致突变等遗传毒理效应的环境致突变物，可对人类健康和生存构成严重危害。
微核试验(Themicro nucleu stest, MN T)是以动植物为材料，采用细胞生物学手段，观测其出现的微核率来表示材料受遗传损伤程度的一种检测遗传毒物的方法。
微核是无着丝点的染色体断片，在有丝分裂后期不能向两极移动，所以游离于细胞质中，在间期细胞核形成时，即可在它附近看到一到几个很小的圆形结构，直径大约是细胞直径的 1 ／20 － 1 ／ 5 ，这就是微核（micronucleus ）。
微核是常用的遗传毒理学指标之一，指示染色体或纺锤体的损伤。
由于这种损伤会因细胞受到的外界诱变因子的作用而加剧，而微核产生的数量又可与诱变因子剂量的强弱呈正比，因此可以用微核出现的频率来评价环境诱变因子对生物遗传物质的损伤程度。
蚕豆(Vicia faba)是一种理想的细胞遗传学研究材料。
蚕豆的染色体大，数量少(2n=12),根尖中含有较多的分裂相细胞，非常适合显微观察，而且蚕豆根尖细胞周期中的大部分时间对诱变剂敏感，便于遗传毒性检测实验，因此，早在1959年，放射生物学家已经用蚕豆的根尖细胞来进行X射线的遗传损伤研究。
到了上世纪70年代，蚕豆根尖染色体畸变技术已发展得相当成熟，作为一种检测化学品遗传学毒性的方法为人们所知并被广泛采用。
蚕豆根尖微核试验在1986 年已被中国环保局列为一种环境生物测试的规范方法，它作为一种环境变异的检测手段，在我国不少地区的环保部门和医疗卫生系统中都有广泛的应用。
蚕豆根尖微核试验在对水体污染物、空气污染物、农药、重金属、化妆品、工业化学品等的致突变性检测方面，都得到了较广泛的应用，在此仅以农药污染的蚕豆微核实验为例介绍其相应的实验方法与步骤，学生在具体开展相关环境污染物的蚕豆根尖微核试验时可参考使用。
4蚕豆微核试验在环境监测中的应用-交大生命讲解
2. 绘制两个蚕豆根尖细胞图，一个含
微核，一个正常细胞（注意绘图的要 求)。
3. 后面4道思考题目。
感悟思考：人类与自然的和谐发展。
同学操作实验步骤
1.倒去固定液，加入水解分离液1ml，室温下 水解20分钟；
每个样品准备2张玻片，取出根尖
将根尖置于载玻片上
伸长区
分生区
根尖生长点
压片的制作
染色10min
根尖材料要分散！
6、镜检
低倍(10x)镜检后，选择细 胞分散均匀，细胞无损，染色 良好的区域，也可在高倍镜 (40x)下观察。
蚕豆微核（10X）
蚕豆微核（40X）
蚕豆微核移动玻片（10X）
五．实验报告
2、微核可能形成机制
1.染色体复制过 程中产生的染 色体断片，丧 失了着丝点；
2.由于纺锤体的 损伤导致染色 体无法向两极 正常移动。
3、微核是遗传毒理学指标
指示染色体或纺锤体的损伤。 微核产生的数量与诱变因子剂量的 强弱呈正比，因此可以用微核率来 评价环境诱变因子对生物遗传物质 的损伤程度。
蚕豆根尖微核试验具有准确、 快速、操作简便、有明显剂量—效 应关系、适合大批量样品检测等特 点。
三．实验原理—— 1.微核
微核 细胞核
• 微核是无着丝点的染色 体断片；有丝分裂后期 不能向两极移动，游离 于胞质中，在间期细胞 核形成时，即可在它附 近看到一到几个很小的 圆形结构；微核直径大 约是细胞的
1／20－1／5。
人淋巴细胞微核
鼠肝细胞微核
四膜虫微核
人白血病细胞系微核 鼠淋巴瘤细胞微核
软化：对细胞壁起腐蚀作用， 使细胞具有一定韧性，并使染液 易于透过。
利用蚕豆根尖细胞微核技术对新疆伊犁河水质检测
利用蚕豆根尖细胞微核技术对新疆伊犁河水质检测买孜拉木·肉扎洪;麦合甫再木·阿不都热合曼;吾尔麦提汗·麦麦提明;谢仁娜依·甫拉提;艾尔肯·热合曼【摘要】[目的]研究新疆伊犁河水域的不同位点的水质污染程度.[方法]利用蚕豆根尖微核技术对新疆伊犁河水域的30个水样进行动态监测和评价.[结果]各样点MCN‰和对照组相比差异极显著(P＜0.01),30个水样点中有12个水样点无污染(PI值在0～1.5);10个水样点轻度污染(PI值在1.5 ～2.0);8个水样点中度以上污染(PI值2.0以上).[结论]新疆伊犁河水质受到不同程度的污染,部分区域中度以上污染,应及时加以治理.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2014(000)017【总页数】4页(P5369-5371,5379)【关键词】蚕豆根尖;微核技术;污染指数;伊犁河【作者】买孜拉木·肉扎洪;麦合甫再木·阿不都热合曼;吾尔麦提汗·麦麦提明;谢仁娜依·甫拉提;艾尔肯·热合曼【作者单位】新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046【正文语种】中文【中图分类】S643.6随着城市工业化的发展，城市污水量在逐年增加，污水成分日趋复杂，污水中含有大量的病原体、致癌原以及对人有急慢性毒作用的化学物质和放射性物质［1］。
在多种监测方法中，生物学方法的优越性就在于能直接监测污染物对生物危害程度的生物效应。
所谓微核是指由于生物受到内外环境因素的影响，染色体的结构发生异常变化，形成无着丝粒断片或染色体在后期时移动滞后，在细胞分裂后期，无着丝粒断片或滞后染色体不能向细胞的两极运动，而是残留在细胞中央的赤道板附近，当子代细胞形成时，游离于细胞浆中形成微核［2］。
蚕豆根尖细胞微核技术监测水体污染的研究
理与 分析 。
１材料与方法
１ １ 料 ．材
通鲜 一号 蚕豆 （ ｉａ ｆｂ ） Ｖｃ ａ ａ ，购干 ｉ
南通 市 种子 公司 。 １ ２ 法 ．方
有价值的建议。
多 懈
｜
＿
蚕 豆 根 尖细 胞 ；微 核 率 ；水体 污 染指 数
ｄ ｆｒｎ ｉ ｉ ｅｅｔ ｎ ｆ ＭＣ ％０ ｆ ｖ ｒ ｓ ｅ Ｐ ｖ ｌ ｓ ｆ Ｎ ｏ ｅ ｅｙ ｉ ． Ｉ ａ ｅ ｏ ５ ｔ ｕ
ｓ ｅ ａ ｎ ７ ａ ｌ ｉ ｓ ｅ ｅ ｏ ｅ ２． ｎ ｌ’ Ｓ ｉ ｓ ｍｏ ｇ ｓ ｍｐ ｓｔ ｗ ｒ ｖ ｒ ｔ ｅ ｅ ａｄ ｔ
（ ｏ ＭＣＮ％ ）及污 染指 数 （ ） Ｐ１ ，并进 行 了统 计 分析 。结果 表明：各采样 点 ＭＣＮ‰有显著 性差异 ，７个采样 点 中有 ５个 采样 点的 ＰＩ 在 ２ 以 上 ，和 对 照 组 相 比 差 异 极 显 著 （ ＜ ０． Ｐ ０１） ，表 明南通市郊 区的水 质受到 不 同程度
１２ １ ． ． 采样点的确立和水样采集在 南通 市郊 区选择 了具 有代表性 的 采样 点 至海港引河，西至通扬运河。本实验采 样点 的布 设原 则 ：有大 量废 水排 入河 流 的居 民 区 、工 、区的 主要排 污 口；市郊 ｌ 居民生活污水排放 口；水资源集 中的水
・ ｔ ｜ｌ √ ｌ ｜ ＿ √ ＿ ／ 试 终 点 的 植 物 微 核 检 测 方 法 。 它 是 一 ７个 。 南至 南 川河 ，北 至通 吕运 河 ，东 ｜ 耐 种应 用于监 测 环境 致突 变物 对人 体和 其 他 生物 体 的 遗 传物 质产 生 危 害的 技 术 ， 并从 细胞遗 传 学水 平 上探 讨植物 遗 传物 质的 改变状 况 与环 境污 染程 度 的相互 关
蚕豆根尖微核试验在水环境污染物检测中的应用
蚕豆根尖微核试验在水环境污染物检测中的应用
贺磊;刘智峰
【期刊名称】《广东农业科学》
【年(卷),期】2011(38)1
【摘要】简述了蚕豆根尖微核试验的方法和评价指标,对其在地表水、工业废水、重金属污染水体和农药污染水体污染物检测中的应用进行了综述.
【总页数】3页(P171-173)
【作者】贺磊;刘智峰
【作者单位】陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西汉中,723001;陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西汉中,723001
【正文语种】中文
【中图分类】X172
【相关文献】
1.蚕豆根尖微核试验在辣子草化感作用研究中的应用
2.蚕豆根尖微核试验在环境致突变物检测中的应用
3.蚕豆根尖细胞微核试验尼古丁引起蚕豆根尖细胞损伤的诱变效应
4.应用蚕豆根尖细胞微核试验检测苏州城区河水污染的研究
5.青弋江芜湖市段水环境质量的蚕豆根尖微核检测
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水质污染对蚕豆根尖细胞微核的影响
水质污染对蚕豆根尖细胞微核的影响陆汉祥通州区新联中学一前言遗传伤害是污染物对人类和其他生物危害中最值得重视的问题，植物微核作为检测环境中致变因子的方法已得到肯定。
最早的报道是美国马德修教授在70年代后期用紫露草（Tradescantia paludosa）花粉母细胞微核(Micronacleus,MCN)数量来测定环境的污染。
现在，这一技术已被美国国家环境保护局定为检测环境污染的常规指标之一。
八十年代初，我国山东海鲜学院方宗熙教授等也用紫露草微核观察来检测空气和海水中的污染程度，取得了初步的成果。
微核检测法代替染色体畸变分析法来检测环境对生物遗传物质的伤害具有简便、快速和灵敏性较高等特点。
本文用蚕豆根尖为材料，通过观测环境中致变污染物对生物遗传物质作用所产生的微核，为环境污染程度提供细胞学指标，从而为保护水源、治理污染提供科学依据。
二实验材料与方法1实验材料：本实验所用材料是江苏南通市新联种子公司出售。
测试水样为南通市新联镇新韩河卞西村段污水，以及1/1000g/L AgNO3溶液和1/2500g/L AgNO3溶液。
2实验方法：2.1根尖培养将蒸馏水浸湿的蚕豆包裹于潮湿的纱布中，25℃，培养2-3天。
2.2、根尖和染毒:根尖长至0.5cm左右，将其放在泡沫塑料块的小孔中，根尖向下露出。
再将泡沫塑料块放于不同的处理液中，使根尖染毒，染毒24小时。
（处理液分别是：100%新韩河卞西村段污水，50%新韩河卞西村段污水。
1/1000g/L AgNO3溶液、1/2500 g/L AgNO3溶液以及作对照用的蒸馏水。
）2.3恢复培养：经染毒24小时的蚕豆根尖（长至1cm左右）转至蒸馏水，恢复培养24小时。
2.4根尖固定恢复培养的根尖长至1-2cm后，于下午1时左右，将根尖剪下，用新配的卡诺固定液（无水酒精：冰醋酸=3：1）固定24小时，于70%酒精溶液中保存，待用。
2.5根尖制片从70%酒精中取出根尖，用蒸馏水漂洗，再放于1N的HCL中，在60%水浴中解离8-10分钟。
利用蚕豆根尖微核技术监测长江南京段水质
用水安 全存在 隐患 。长江南 京段水 质污染 通常 是利 根 尖 ，加新 配卡诺 氏 液 （ 乙醇 ： 冰 乙 酸 ＝３ ：１ ） 用物理 化学手段 进行 监测 ，有 关致 突变 物的监 测较 固定 ２ ，然 后 换 人 ７ ％ 的 乙 醇 中保 存 待 用 。 ４ｈ ０ 少 。诱 变剂 由于会对 生物 产生遗传 毒理效 应 ， １益 用 ５ｍ ｌＬ的盐 酸 于 ２ ３ ｏ ／ ８℃ 酸解 根 尖 １ ｎ ２ｍｉ，然 后
十江苏省环境保护科技发展基金项 目（ 编号 ：０ ４ １ ） ２０ ０ ２ 。 收 稿 １期 ： ０７一Ｏ ３ ２０ ９—１ ２０ ５； ０ ７—１ ２ ０— ９修 回 作 者 简介 ： 小 颖 ， ，９ ３年 生 ， 郭 女 １７ 工程 师 ， 要从 事环 境 生 物毒 理 学 的 研 究 与 监测 工作 。Ｅ—ｍ ｉ：ｕｘａｙｎ７ ＠ １６ ｃｒ 主 ａ ｇｏｉｏｉｇ３ ２ ．ｏ ｌ ｎ
维普资讯
２０ ０ ８年第 ３期
环
保
科
技
利 用蚕 豆 根 尖微 核 技术 监 测 长 江 南京 段水 质 木
郭 小 颖
（ 苏 省 环 境 监测 中心 ，江 苏 南 京 江 ２０３） １０ ６
摘 要 利 用蚕豆根 尖微核 技 术监测 了长 江南京段 水 质 污 染状 况。结 果表 明 ， 点位 均 能 引起微 各
・
４７ ・
维普资讯
２０ ０ ８年第 ３期
环
保
科
技
Ｖ１ ４ ｏ ０ ．１ Ｎ ．３
（ 凡数字 在上下 限值 时定 为上 下一级 污染 ）
比对 照组 高 。对 各 采样 点 和对 照 组 的 ＭＣ Ｎ进 行 Ｆ
检 验 ，在监 测 的断面 中 ，江 宁河 口３个点 的 Ｆ值分
3--蚕豆根尖微核实验
蚕豆根尖微核实验（诱导与检测部分）一、实验目的1、了解环境诱变物对微核产生的原理。
2、掌握微核试验技术。
3、了解毒理遗传学在环境监测中的应用及意义二、实验原理微核是无着丝点的染色体断片，在有丝分裂后期由于不能向两极移动而游离于细胞质中，在间期细胞核形成时，可在它附近看到若干个圆形的结构，直径大约是细胞直径的1/20到1/5，这就是微核。
微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。
在细胞间期微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外、大小应在主核1/3以下。
微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。
一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，但有些实验也证明整条的染色体或多条染色体也能形成微核。
这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥便形成了第三个核块。
已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点和染色体畸变的情况一样。
所以可用简易的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。
由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们需要有一套高度灵敏、技术简单的测试系统来监视环境的变化。
只有真核的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。
且有研究显示以植物进行微核测试与以动物进行的一致率可达99%以上。
目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。
利用蚕豆根尖作为实验材料进行微核测试，可准确的显示各种处理诱发畸变的效果，并可用于污染程度的监测。
微核产生的概率可与诱变因子的剂量成正比，因此可以用微核出现的频率来评价环境诱变因子对生物遗传物质的损伤程度。
三、实验器具、药品1、实验材料蚕豆种子2、实验器材光学显微镜、试管（10ml）、蚕豆发芽盒、镊子、手术刀、载玻片、盖玻片、滤纸等。
3、试剂1）NaN3(叠氮钠)2）卡诺氏固定液（乙醇和冰醋酸按照体积比3：1混合配制）4）6mol/L盐酸：配制：取49.5ml 37.5%的盐酸，再加入50.5ml水稀释至100ml容量瓶.四、实验步骤1、种子处理：蚕豆种子洗涤干净，室温（25℃）下用蒸馏水浸泡发芽24小时，此间至少换水两次，所换水应预温至25℃。
蚕豆根尖微核试验在水环境污染物检测中的应用_贺磊
蚕豆根尖微核试验在水环境污染物检测中的应用贺磊，刘智峰（陕西理工学院化学与环境科学学院，陕西汉中723001）摘要：简述了蚕豆根尖微核试验的方法和评价指标，对其在地表水、工业废水、重金属污染水体和农药污染水体污染物检测中的应用进行了综述。
关键词：蚕豆根尖微核试验；污染物；微核千分率；污染指数中图分类号:X172文献标识码:A文章编号:1004-874X（2011）01-0171-03微核试验是以动植物为材料，采用细胞生物学手段，观测其出现的微核率来表示材料受遗传损伤程度的一种检测遗传毒物的方法。
微核是指位于细胞质中独立于主核、直径小于主核1/20~1/3、完全与主核分开的圆形或椭圆形的微小核，微核的产生主要是由外界损害因素(生物、物理、化学)作用于细胞后，导致细胞染色体丢失或断裂，从而在细胞质中形成一个或数个小核[1]。
微核试验现已发展为多种试验种类，总体上可分为哺乳动物的骨髓嗜多染红细胞和外周血细胞微核试验、人外周血淋巴细胞及上皮细胞微核试验、高等植物细胞微核试验。
而高等植物微核试验根据操作原理又可分为利用减数分裂形成微核的四分体微核试验和利用有丝分裂形成微核的根尖微核试验两种类型。
蚕豆(Vicia faba)是一种很好的细胞遗传学研究材料，蚕豆的染色体组型为6对相当大的染色体，而且根尖含有较多的分裂相细胞，非常适合显微观察，因此作为一种环境污染物的检测手段，已得到广泛的应用。
1986年蚕豆根尖微核试验被我国环保局列为水环境生物测试的规范方法，用于检测水体的致突变性。
1蚕豆根尖微核试验的方法和评价指标蚕豆微核技术检测环境污染物的诱变效应，常用蚕豆根尖细胞或叶尖细胞。
根尖细胞的制备主要有2种方法：（1）选择大小均匀的蚕豆种子，流水浸种10~24h、23~25℃催芽，当初生根长至1.2~1.5cm时，待测液浸泡处理2h，自来水冲洗，修复24h后，切取根尖，卡诺氏液固定，孚尔根染色、压片，观察计数间期细胞的微核千分率(MCN‰)。
利用蚕豆根尖微核检测技术监测校园水质
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第２ ３卷 第 ２期
２ ０１ ３伍
信阳农业高等专科学校学报
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蚕豆根尖细胞微核技术监测南太湖水质污染状况的研究
蚕豆根尖细胞微核技术监测南太湖水质污染状况的研究徐雪丽,于淑池*,叶杰君,沈燕霞,彭忠(湖州师范学院生命科学学院,浙江湖州313000)摘要 [目的]为综合评价水质状况和保护人体健康提供参考,同时为建立太湖生态监测机制提供基础资料。
[方法]利用蚕豆根尖细胞微核技术对湖州市太湖南岸的水质进行了检测,测定相同采样点不同月份的水样微核千分率(M CN )、污染指数(P I)及主要化学指标,并进行统计分析。
[结果]经南太湖水处理的蚕豆根尖细胞出现微核和染色体畸变,可观察到单微核、双微核、三微核、分裂后期染色体桥和染色体断片。
太湖水质污染比较严重,各月份M CN 和对照组相比差异极显著(P <0.01),5月份湖水污染最为严重,其PI 值达到4.08。
太湖水质主要污染物为氮、磷等营养盐和耗氧有机物。
[结论]对被污染水体的治理提出了有价值的建议,为治理太湖污染提供了科学借鉴。
关键词 蚕豆根尖细胞;微核率;污染指数;化学指标中图分类号 X832 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)17-07839-02R e se a rch on th e W a te r Q ua lity -m on ito rin g o f th e So u th e rn T a ih u Lak e w ith M ic ro n u c le u s T e ch n ique o f V icia f aba R oo t T ip Ce ll X U X u e -li e t a l (D epa rtm en t o f L ife S cien ce s ,H u zh ou T ea ch e rs C o lle ge ,H u zh ou,Z h e jian g 313000)A b s tra c t [O b jectiv e]T h e re fe ren ce fo r th e i n te g ra ted eva lu a tiono f w a te r qu a lity an d th e pro te ction o f h um an h e a lth andth e bas ic da tai nth e es tab lish -m en t o f th e m e ch an ismo f eco log ica l m on ito r in T a ih u L ak e w e re prov ided.[M e th od]T h e w a te r qu a lity o f th e sou th ern T a ih u L ak e w a s m on itored w ithth e m icron u cleu s tech n iqu e o f V ic ia faba ro o t tip ce ll an d th e m a in ch em ic in dex es su ch a s M CN an d PI inth e sam p les a t fixed p lace in d iffe ren t m on th s w ere de te rm in ed an d s ta tis tica lly an a ly zed.[R esu lts]T h e m icron u cleu s an d ch rom osom a l aber ra tion s in th e V icia faba ro o t tip ce lls ,w h ich w e re tre a ted w ith sou th ern T a ihu L ak e w a te r ,cou ld be obse rved ,in clu din g th e sin g le m icro -n u clea r ,tw o m icron u cle i ,th re e m icron u cle i ,an aph a se ch rom o so m e b ridge and ch rom o som e fragm en t .T h e w a te r po llu tion inth e sou th e rn T a ih u L ak e w a s h eav y and th e M CN w a s s ign ifican t diffe ren ce(P <0.01)be tw eenth e m on th s an d th e C K ,respe ctive ly.T h e PI o f th e sam p le tak enin M ay w as th e h igh es t(4.08),w h ichind ica ted th e w a ter po llu tion w a s m o st se r iou s .M a jo r po llu -tan t in th e sou th ern T a ih u L ak e w as nu tr ien ts su ch a s n itro gen an d ph o sph o ru s an d o th e r o rgan ic m a tter o f oxy gen con sum p tion.[C on clu sion ]T h e va lu ab le su gge stion on h owto adm in iste r th e po llu ted w a te r w a s adv ised w h ich cou l d be tak en a s scien tific re fe ren ce fo r th e en v ironm en ta l i m pro vem en t o f sou th e rn T a ohu L ak e.K e y w o rd s V icia faba roo t ti p ce ll ;M icron u cleu s ra te ;W a te r po llu tion in dex ;C h em ic in dex作者简介徐雪丽(1986-),女,浙江湖州人,本科生,专业:生物工程。
微核技术在环境监测中的应用概况
240理论研究0 引言 现阶段，微核技术主要应用于药物筛选、肿瘤防治和环境检测等多种领域，其应用范围较广。
无论是国内还是国外诸多国家和机构，已将微核技术作为一种诱变试验的标准检测方法。
1 微核检测技术概述 微核检测技术是一项实用而有效的试验技术，主要应用于环境检测领域，无论是国内还是国外，将微核检测技术作为检测水环境生物的标准性方法。
除此之外，还可以将其应用于水体的致突变性检测领域。
所谓微核是指生物遭受环境因素的影响之后，其染色体结构会逐渐发生改变，形状和颜色都会随之发生变化。
细胞分裂后期，无着丝粒断片或滞后染色体不能向细胞的两极运动，而是残留在细胞中央的赤道板附近。
微核可以检测环境的污染程度，其测量单位为频率。
微核技术主要应用于细胞水平上的遗传毒性研究和微核进行环境污染检测这两方面。
前者主要是通过微核试验展开药物分析与研究，主要成果应用于医学领域。
后者主要是采用植物微核技术检测环境的污染程度，所用的材料主要包括紫露草、蚕豆、洋葱等。
2 微核技术在环境检测中的应用2.1 紫露草四分体微核技术 美国科学家以紫露草作为原料，借助特殊工具处理致癌物质之后，可以观察到乙烷气体处理之后会诱发小孢子。
这是产生微核的主要过程。
依据实验结果表明，微核数量的多少与乙烷气体的浓度息息相关，且呈正相关关系。
这就初步验证了紫露草微核检测系统的功能与作用。
表明该技术可用于室内空气质量的检测。
随着科学技术的不断进步，微核技术逐渐被应用于环境检测领域，用于检测水分的污染频率。
2.2 蚕豆根尖微核技术 该技术建立在紫露草分体微核技术基础之上，属于一种生物短期检测方法，是国内国外应用较为普遍的一种环境检测模式。
该技术被提出之前，不少科学家将其拥有检测X-射线、丝裂霉素C等，用于检测淡水污染诱变剂损伤的微核效应，从而建立了诱变剂检测系统。
该系统能够快速获取相关遗传信息，对致突变物的敏感度较高，可直接用于水污染的检测。
相较于紫露草四分体微核技术而言，该技术具有以下优势：其一，实验周期短。
应用蚕豆根尖微核实验技术监测2
２４一 ， Ｄ丁 酯 的展着性 好 ， 透力 强 ， 易进 入 植物 体 渗 容
内， 而不易被雨水冲刷 ， 严重污染着生态环境 ， 尤其是对
水、 农作 物乃 至人 类 的 健康 造 成 危 害 。 因此 近几 年 ， 括 包 ２４一 ， Ｄ丁酯在 内的除草 剂对作 物 的 影 响 已经受 到学 者 广
镜检。
微 核是 常用 的遗传 毒理 学指 标之 一 ， 指示 染 色体 或纺 锤体 的损 伤 。蚕 豆根 尖 细胞 微 核 实 验技 术 是 根 据在 细胞
质内产生核小体频率增加 的现象来检测某些理化因素诱 导染色体损伤作用 的一种简便 、 快速的遗传学毒理方法。
由于这种 损伤 会 因细胞 受 到 的外 界诱 变 因子 的作 用 而 加 剧 ， 诱变 因子剂 量 的强弱 与微 核 产生 的 数量 呈 正 比 ， 且 因 此 可 以用 微核 出现 的频 率 来 评 价 环境 诱 变 因 子对 生 物 遗
ｍＬ Ｌ６个浓 度 。 ／
１２ 试 验方 法 ．
１２ １ 材 料制 备及 处理 选取 大均 匀 的蚕豆 种 子用 蒸馏 ．． 水浸 泡 ２ ３ ｈ 种 子 吸胀 后 ， 种 子 置 于 有 湿 纱 布 的培 ４～ ０ ， 将 养皿 中催 芽 ４ ｈ 大 部分 初生 根长约 １ ２ｍ） ８（ ～ ｃ 。选 取 ６ 粒 ０ 初 生 根 良好 ， 长一 致 的 种 子 ， 别 放人 盛 有 ６种 不 同浓 根 分 度 的 ２４一 ， Ｄ丁酯 的培养 皿 中 ， 取 １ 另 ０粒用 蒸馏 水培养 作 为 对照 ， 理 ｌｈ然后 用蒸 馏 水 浸洗 ３次 ， 置 于湿 纱 布 处 Ｏ， 再
蚕豆根 尖微 核实 验技术 早 在 １８ 就被 我 国环 保 局 ９６年 列 为 一种水 环境 生物 测试 的规 范方法 ， 作为 一 种环 境 致 它 突变性 的监 测手 段 ， 在我 国不 少地 区 的环 保部 门和 医疗 卫 生 系统 中都 有广 泛的应 用 。 目前 ， 国内外学 者 多采 用微 核 方法来 检 测 、 评价 水体 污染物 对作 物遗 传物 质 的损 伤及
利用蚕豆根尖微核技术检测水质污染程度
利用蚕豆根尖微核技术检测水质污染程度罗怀勇四川农业大学农学院，四川雅安（625014）E-mail：lhy_20030573@摘要：本试验应用蚕豆根尖细胞微核技术对青衣江、 江和纸厂污水水质污染程度进行了研究，分别测定了3个水样的蚕豆根尖细胞微核千分率(MCN‰)及污染指数(PI),其中 江下游采样点水样的微核率为19.6 ‰,青衣江采样点水样的微核率为10.9 ‰, 纸厂污水采样点水样的微核率为24.3 ‰ , 污染指数分别为1.96,1.09,2.43．结果表明青衣江水质已经存在着轻度污染, 江下游中度污染, 而纸厂污水重度污染。
并对造成水质污染的原因、污染危害及防治对策进行了讨论．关键词：蚕豆根尖微核技术，微核率，污染指数1 引言蚕豆根尖细胞微核技术是一种以染色体断裂及纺锤体损伤等为测试终点的植物微核检测方法，由于断裂后的片段不具有着丝点，到细胞分裂末期，断片流失在细胞质中成为微核。
实验证明，环境诱变因子的强弱与诱发的微核率成正比，因此可用微核率大小来表示诱变因子的强弱。
利用蚕豆根尖细胞微核技术监测水质污染有以下优越性：灵敏度高，可靠性强；技术简单，易于操作，而且有显而易见的实用性；实验周期短，且蚕豆根尖细胞周期中大部分时间处于对诱变剂敏感的间期，便于遗传毒性检测试验，精确度也比较高[1]。
目前，国内学者运用该技术已开展了乌鲁木齐河、淮河、扬中市地表水，家居饮用水等水污染研究，以及化学物质、汽车尾气、香烟焦油等有害物质环境污染研究等[2～6]。
本试验应用蚕豆根尖细胞微核技术对水质进行了检测，测定了3个水样的蚕豆根尖细胞微核千分率(MCN‰)及污染指数(PI)。
本文的测定结果可为有关部门提供参考。
2 材料与方法2.1 材料蚕豆地方品种2.2 水样按采样方法分别在以下地点采取水样：青衣江：彩虹大桥下濆江：雅安宾馆旁纸厂污水：纱龙纸业有限公司2.3 方法2.1.1 材料准备与处理1.浸种催芽：选择无虫子、饱满的蚕豆种子放入盛有自来水的烧杯中，在24℃恒温培养箱中浸泡24h。
蚕豆根尖微核技术监测农药污染的研究
伤害。从保护淀康的观点来看 ， 麴监趔具 ■！
有 更直 接 的 意 义 。 在 生物 监 测 法 中 ，蚕豆 根
尖微核技术是比较好的生塑堕 方法，该技
术 是 根 据 在细 胞 质 内产生 核 小 体 频 率 增 加 的 现 象 来 检测 某 些 理 化 因索 诱 导 染 色体 损 伤 作 用 的 一 种 简便 、 速 的 遗 传毒 理 学 方 法 “ 。 快 本 实 验应 用该 技术 对农 药 污 染 的 监 测 ，进 一 步 阐 明和 完 善这 一 技 术 ，使 之 在 环境 污 染 的 监 测 中发 挥 更大 作用 。
型垫竖
‘ 苏 省 常 州市 环 境 监 澍 站 讧 常州，
／ 予
Ａ 摘 要 实验应用蚕豆根尖徽桉技术对农药 ．一Ｄ ２４ 和甲胺辟进行诱变性研究，结果表明；
农药 ２ ４ Ｄ和 甲胺 磷达 到一 定 浓度 时 即成为 诱 变污 染物 ，能 明 显诱发 蚕豆 根尖 馓核 率 的增高 ， ，一 在 一定 范 围 内显示 出较 好 的剂量效 应关 系 ， 说 明 蚕 豆 根 尖 数核技术 是监 捌环 境 污染 的一 种有效
Ｒ Ｏ Ｐ ＣＥ Ｌ Ｍｌ Ｒ Ｎ Ｃ Ｅ Ｅ Ｈ Ｑ Ｅ Ｏ Ｔ Ｔｌ Ｌ Ｃ Ｏ Ｕ Ｌ ＵＳ Ｔ Ｃ ＮＩ Ｕ
Ｌ ｌ Ｃｈ ｎ ｕＩ ａｈ （ ａ ｇ ｈ ｕ Ｅｎ ｉｏ ｍｅ ｔ ］Ｍｏ Ｊ ｏ ｉ ｇ Ｓ ａｔ ｎ ｍ ｎ ｓ ｕ Ｃｈ ｎ ｚ ｏ ｖ ｒ ｎ ｎ ａ ｎｔ ｒｎ ｔ ｉ ｏ ｇｈ ）
关系。因此 该技术是监测农药污染的一种有
效手 段 。
维普资讯
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环ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
蚕豆根尖微核技术在污染源废水监测中的应用研究
蚕 豆根 尖微核 技 术在 污染 源 废水 监测 中的应 用研 究
王勇 张和 平
（ ． 锦 市 环 境 监测 站 ， 锦 １４ １ ；２ 锦 市 环 保 技 术 开 发 科 研 中心 ， １ 盘 盘 ２ ００ ． 盘 盘锦 １４ １ ） ２ ０ ０
收 稿 日期 ：０ ８ Ｏ — ５ 修 订 日期 ：０ ８ ０ — ２ ２０ 一 １ １ ； ２０—７ ０。
作 者简 介 ： 王勇 ， ，９ ８年生 ， 级 工 程 师 ， 男 １６ 高 主要 从 事 生 态 环 境 监 测 与 研 究 工 作 。
摘
要 ： 用 工 业 污 染 源废 水 对 蚕 豆 根 尖细 胞 进 行 处 理 ，根 据 蚕 豆 根 尖 细胞 微 核 千 分 率 的 大 小来 监 测 废 水 的致 突 变 能 力 ； 利
并通过污染指数（ ） 评价 水质 的综合毒性 口。 ］
关键词 ： 豆根 尖； 蚕 细胞 微 核 ； 业 污 染 源 ； 染指 数 ； 水 监 测 工 污 废
Ａｂ ｔａ ｔ ｈ ｃａ ｆ ｂ ｏ ｔｔ ｅｌ ｒ ｒ ａｅ ｉ ｎ ｕ ｔ ａ ｓｅ ａ ｅ ，ａ ｄ ｔ ｅ ｍｕ ａ ｅ ｉ ｆ ｃ ｓｏ ｅ ｗ ｓｅ ａ ｅ ｒ ｅｅ ｔｄ ｓ ｒ ｃ ：Ｔ ｅＶｉ ｉ ａ ａ ｒ ｏ ｉ ｃ ｌ ａ ｅ ｔｅ ｔｄ ｗ ｔ ｉ ｄ ｓ ｌｗａ ｔ ｗ ｔｒ ｎ ｈ ｔｇ ｎ ｃ ｅｆ ｔ ｆｔ ａ ｔｗ ｔｒａ ｄ ｔ ｃｅ ｐ ｓ ｈ ｉ ｒ ｅ ｈ ｅ ｗ ｔ ｅｖ ｌ ｅ ｆ ｃ ａｆｂ Ｎ％。 ｔ ｅ ｅｃ ｍｐ ｅ ｅ ｓｖ ｏ ｉ ｉ ｆ ｈ ａ ｔｗａｅ ｖ ｌａ ｅ ｙｔ ｅＰ ａ ｕ ｓ ｉ ｔ ａｕ ｓ ｉ ａＭＣ ｈｈ ｏ Ｖｉ ａ ， ｈ ｎ ｔ ｏ ｒ ｈ ｎ ｉ ｅｔｘ ｃｔ ｏ ｅｗ ｓｅ ｔｒ ｓｅ ａ ｕ ｔ ｄ ｂ １ｖ ｌｅ ， ｈ ｙ ｔ ｉ ｈ
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蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
2020/12/5
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
种植物。如，大蒜，韭菜，玉米，大豆，洋葱等
等。
n 监测对象也扩展到水体，土壤，大气等。
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
3.蚕豆细胞微核技术原理
n
根据之前的概念可知，植物细胞在分裂时之
所以产生微核，是因为受到了有害因子的攻击，
而有害因子来源有两种：（1）细胞代谢（2）外
部环境
n
而经过大量的实验表明，由细胞自身原因所
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
蚕豆根尖细胞微核
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
n
到现在，植物微核技术已经发展成为一种比
较成熟的环境污染监测技术，多个国家已将其列
入监测环境污染的常规项目，其中我国也于1986
年将其编入《环境监测技术规范》。
n
实验材料也由当初的紫露草和蚕豆扩展到多
植物细胞微核技术
• 植物细胞微核技术是根据遗传学上染色体畸变
而建立的一种环境污染的生物监测方法。
•细胞微核(micronucleus , MN )
• 细胞在进行有丝分裂或减数分裂的早前期，
染色体受到有害因子的攻击而发生断裂，产生染 色体片段，游离于细胞之中，形成小核，即微核。
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
2011.08.16 5000、77、150000
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
1.研究背景及相关概念
随着人类活动对环境的影响的加剧， 环境中的有害物质越来越多，为了检测及 监测这些有害物质，人们发展出了很多种 方法，而植物微核技术就是其中的一种。
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
4.蚕豆细胞微核技术具体方法
（1）试验材料
一般选取华中师范大学陈光荣教授筛选的松 滋青皮豆。
此外还有培养蚕豆种子的相关设备和试剂。
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
（2）试验步骤 第一步:蚕豆浸种、催芽
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
n 第二步：用待测样品对蚕豆根染毒 n 第三步：蚕豆根尖修复 n 第四步：根尖细胞的固定（卡诺氏固定液） n 第五步：水解 n 第六步：制片镜检
蚕豆根尖细胞微核技术 在环境污染监测中应用
2020/12/5
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
主要内容
n 1.背景及相关概念 n 2.植物细胞微核技术的发展 n 3.蚕豆细胞微核技术原理 n 4.蚕豆细胞微核技术方法 n 5.关于数据 n 6.小结
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
度，间接体现环境污染的程度。
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
以蚕豆为例
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
蚕豆根尖细胞微核技术(micronucleustest,MCNT)
一种以蚕豆根尖细胞微核出现的频率为测 试终点的植物微核监测方法。
•为什么选择蚕豆作为试验材料？
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
5.关于数据处理
•PI:污染指数（pollution index）
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
PI的等级划分
PI
0~1.50 1.50~2.00 2.00~3.50
污染等级 基本无污染 轻污染
中污染
>3.50 重污染
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
（1）敏感度较高（1985，陈光荣）且本底微核率低。
（2）蚕豆属高等植物系统，较接近哺乳类动物系 统，由此外推于人类，可作为可信度较高的依据。
•（3）此外，蚕豆和哺乳类动物细胞对环境污染物 的 致突变等定性反应一致性课达到99%。
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
得了良好的效果。
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
紫露草花粉母细胞四分体微核
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
上世纪八十年初期，美国Degrass和Schmid 建立了蚕豆根尖细胞微核检测系统。
1985年，华中科技学院陈光荣教授发表了国 内第一篇关于利用蚕豆根尖细胞微核技术监测淡 水湖泊污染的报告。
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
小结
（1）该方法具有操作简便，成本低，技术条件要 求不高的优点。
（2）植物细胞微核技是一种对污染物的综合测定， 能较好的反应出环境有害物质对哺乳类动物的致 畸变程度，对人类具有更好的可比性。
产生的微核数量会因植物种类的不同而异，但总
体上维持在一个稳定的、较低的水平。
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
n
由此，可以利用这一特性，通过计量—反应
关系来测定外部环境对细胞微核数量的影响程度。
具体：以未污染的植物细胞微核数量作为对照值，
在细胞分裂后，观测受污染的植物细胞微核数量，
以此来测定环境污染对生物细胞染色体的畸变程
细胞微核的特征：体积小于1/3真核体积、常成 圆形或椭圆形、游离于细胞质
蚕豆根尖细胞微核技术在环境污染监 测中应用
2.植物细胞微核技术的发展
n
上世纪七十年代Matter和Schmid在研究人类
和哺乳动物的细胞损伤是初步建立了细胞微核测
定技术。
n
1978年马德休先生以美国产紫露草通过花粉
母细胞四分体微核数量来测定环境污染技术，取