蛋白尿性肾脏病-12-3-2010ppt

足细胞分子（podocyte molecules)
如ACTN4、CD2AP、TRCP6
基因编码蛋白为肾小球基底膜结构分子
如LAMB2、ITGB4
基因编码蛋白是足细胞发育和维持功能所必需的转 录因子或酶
如WT1、LMX1B、PLCE1、GLA
基因编码产物为溶酶体（SCARB2）、线粒体 （COQ2、PDSS2、MTTL1）蛋白或DNA核小体 重组调节子（SMARCAL1）
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蛋白尿性肾脏病的基因检测
显著作用
药物治疗的参考 疾病以及遗传咨询 疾病预后估计 肾移植预后 再生育咨询，产前诊断 病因和疾病分型 认识足细胞以及裂孔隔膜结构与功能，开发新药物(?)
中国人群
属于不同地域、种族

??
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蛋白尿性肾脏病的基因检测
蛋白尿性肾脏病
以蛋白尿为主要或明显症状的肾脏病，伴或不伴血 尿
分组
先天性肾病综合征 激素耐药性肾病综合征
家族型 散发性
伴有肾脏表现的综合征
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蛋白尿性肾脏病的基因检测
分组
先天性肾病综合征 激素耐药性肾病综合征
家族型 散发性
伴有肾脏表现的综合征
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先天性肾病综合征
+
+
+
+
+
NR
+
+
NR
+
NR NR
+
+
NR
+
+
NR
+
NR NR NR NR NR
+
NR NR NR NR NR
+
+
NR NR NR NR
散发性 SRNS
其他综 合征
+
+
NR NR NR
+
+
NR NR NR
+
+ + +
NR
+
+
NR NR
+
+
NR NR NR
DDS Pierson 综合征
+
CNF：先天性NS芬兰型；IDMS：孤立性弥漫系膜硬化；FS：Fraseir综合征；DDS：Denys-Drash综合征 NR：未见报道；AR：常 染色体 15 15 隐性；AD常染色体显性。
根据有无家族史
家族性 散发性
根据发病年龄
先天性 婴儿型 儿童型 青少年型 成人型肾病综合征
根据有无其他系统受累
非系统性（孤立性） 系统性肾病综合征
18
遗传性肾病综合征有关的基因——18个+
肾小球裂孔膈膜蛋白分子
如NPHS1、NPHS2、KIRREL）
编码非选择性阳离子通道蛋白分子 家族性 FSGS 发病较晚：青少年或成人早期阶段 缓慢进展Slowly progression 常染色体显性遗传
30
激素耐药性肾病综合征——家族性
2000年Kaplan和Weins等确定并报道了另一个家族性肾病综合征的致病 基因 Nat Genet, 2000 and J Am Soc Nephrol, 2005 ACTN4 编码蛋白 -actinin-4
蛋白尿
肾小管
重吸收
肾小管疾病
溢出性
血浆蛋白
单一蛋白成分：骨髓瘤、血红蛋白尿、
肌红蛋白尿
多种蛋白成分：炎症
4
蛋白尿的病理生理
肾小球
滤液漏出
肾小球疾病（肾炎、肾病等）
肾小球滤过屏障
肾小管疾病
蛋白尿
肾小管
重吸收
溢出性
血浆蛋白
单一蛋白成分：骨髓瘤、血红蛋白尿、
肌红蛋白尿
多种蛋白成分：炎症
5
肾小球滤过屏障
肾小球
毛细血管壁
7
5
足细胞
裂孔隔膜

“章鱼”样脏层上皮细胞

相邻足细胞的足突形
成指状交叉

交叉间形成滤过裂隙

接近基底膜处的一层 薄膜 裂孔隔膜
8
6
肾小球滤过屏障——裂孔隔膜
9
肾小球滤过屏障——裂孔隔膜
裂孔隔膜
10
扫描电镜示足细胞及其足突
11
TRPC6
2005
12
7
蛋白尿
肾脏病重要和常见症状 肾小球疾病和肾小管疾病 自1998年, 显著进展 Nephrin (NPHS1) identified in Finnish-type congenital nephrotic syndrome 逐渐确定了更多致病基因及其突变 尽管表型存在异质性，但多有共性 进展性（ESRD） 激素耐药（抵抗） “Hereditary proteinuria syndrome”, Tryggvason, 2006 对维系滤过屏障（及裂孔隔膜）结构和功能至关重要的 蛋白分子
蛋白尿性肾脏病的遗传学研究进展
丁洁 北京大学第一医院儿（肾）科 2010-12
1
蛋白尿（Proteinuria）



肾脏疾病最常见症状 肾脏病进展至肾衰竭的独立危险因素 防止和控制蛋白尿是临床重要工作 待开发更多有效手段 蛋白尿发生机制尚未解决
2
4
3
蛋白尿的病理生理
肾小球
滤液漏出
肾小球疾病（肾炎、肾病等）
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激素耐药性肾病综合征——家族性
常染色体显性遗传型于2008年报道 Chin J Nephrol, 2008 31 个家系 晚发型: 34.312.5 yrs 判断：至少两位家系成员为FSGS，或1位FSGS同时另 有一位蛋白尿或肾衰竭 100 个正常对照DNA PCR and directly sequencing ACTN4, TRPC6 and NPHS2 除外 HIV-associate FSGS, Alport as well as Fabry
氨基 酸
1241 383 2302 1798 500
分子量 KD
185 42 230 192 54 54 56 56 71 105 106
NPHS1 NPHS2 PLCE1 LAMB2
602716 604766 60Hale Waihona Puke Baidu414 609049
WT1
607102
11p13
47753
10
2978
WT1 (4个亚型)
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蛋白尿性遗传性肾脏疾病相关基因简介
OMIM # 基因 定位
19q13.1 1q25～q32 10q23.32q24.1 3p21
基因 大小 bp
25883 25393 33440 4 12053
外显 子
29 8 34 33
mRNA bp
4868 1853 7992 5817
编码 蛋白
nephrin podocin PLCε1 Laminin β2
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Components of the SlitDiaphragm Protein Complex That Form a Porous SlitDiaphragm Filter
New Engl J Med, 2006
Nephron
Podocyte, Foot Processes Lancet, 2003
蛋白尿性遗传性肾病相关的致病基因
NPHS 1
CNF
NPHS 2
WT 1
NR
LAMB 2
NR
PLCE1
NR
ACTN 4
NR NR NR NR
TRPC 6
NR NR NR NR
CD2A P
NR NR NR NR
先天性 肾病 家族性 肾病
+
NR
+ +
IDMS 其他CNS ARSRNS ADFSGS 小于1岁 大于1岁 FS
组成： 带窗孔的血管内皮细胞 肾小球基底膜（GBM） 上皮细胞足突间的裂孔隔膜 (slit diaphram)
6 Physiology, 2005, 20: 96-101
肾小球滤过屏障结构和功能的异常致蛋白尿
带“窗孔”的内皮细胞 肾小球基底膜 足细胞：裂孔隔膜（slit diaphragm, SD ）
E8:G928A(D310N), E14:1893～1900del and E21:G2869C (V957L)
突变分别在父、母确定
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先天性肾病综合征
北京大学第一医院 约1/6 先天性肾病综合征发现有WT1突变
2 岁女孩，生后3个月发病 激素耐药 肾活检: FSGS 核型分析：正常 PCR and directly sequencing WT1 杂合突变（heterozygous mutations）: IVS 9+5 G>A
33
激素耐药性肾病综合征——家族性
结果 Chin J Nephrol, 2008 2/31家系检测到突变 ACTN4
Missense mutation: L316P on-set age: 38.7 7.4 yrs
TRPC6
Missense mutation: Q889K on-set age: 38.0 4.2 yrs
1998年, 分析芬兰型先天性肾病综合征，确定 了首个裂孔隔膜基因 NPHS1 芬兰型：more than 90%
Fin-major (2 bp deletion in exon 2), 78% Fin-minor (non-sense mutation in exon 26), 16%
Steroid-resistant Nephrotic Syndrome as a Result of Genetic Defects
16
Steroid-resistant Nephrotic Syndrome as a Result of Genetic Defects
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遗传性肾病综合征“分类”
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蛋白尿性肾脏病的基因检测
分组
先天性肾病综合征 激素耐药性肾病综合征 家族性 散发性 伴有肾脏表现的综合征
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激素耐药性肾病综合征——散发性
NPHS2 突变 许多报道 白种人 Pediatr Res, 2005 早发肾病中检出率较高
8-20%

激素耐药 FSGS, or MsPGN or MCD 进展(6.1 years) 肾移植后极少出现肾病再发
497 517 514
CD2AP ACTN4 TRPC6
604241 604638 603652
6p12.3 19q13 11q21-22
14870 7 82844 13229 3
18 21 13
5425 3893 4537
CD2AP α-actinin-4 TRPC6
639 911 931
14 14

成人期发病的家族性FSGS 激素耐药 常染色体显性遗传 缓慢进展至 ESRD
约占家族性FSGS 的 4%
31
激素耐药性肾病综合征——家族性
2004年，北京大学第一医院首先发现并报道了中国人群的家族性肾病综合征的基 因突变 Pediatr Nephrol, 2004 先证者 77天龄女孩，生后25天发病 激素耐药 生后3各月肾活检: FSGS 女孩兄 7.岁随发现肾病 激素耐药 + FSGS 9.5 岁病故 PCR, DHPLC and sequencing NPHS2 突变 复合杂合突变compound heterozygous 467_468insT and 503G>A 2008年余等报道了另一例 Chin J Pediatr, 2008 估计检出率: 25%
European familial SRNS NPHS2 mutation: 44-45%
Pediatr Res, 2005
29
激素耐药性肾病综合征——家族性
2000年Winn 和Pollak首先报道了TRPC6基因突变Science,
2005 and Nat Genet, 2005

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蛋白尿性肾脏病的基因检测
分组
先天性肾病综合征 激素耐药性肾病综合征
家族性 散发性
伴有肾脏表现的综合征
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蛋白尿性肾脏病的基因检测
分组
先天性肾病综合征 激素耐药性肾病综合征
家族性
散发性 伴有肾脏表现的综合征
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激素耐药性肾病综合征——家族性
2000年Boute等首先确定了第一个家族性激素耐药 性肾病综合征致病性基因突变 Nat Genet, 2000 NPHS2 编码蛋白 podocin 常染色体隐性遗传 激素耐药 进展性，ESRD 2005年 Caridi等报道
非芬兰型：
少见 不到 30%
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先天性肾病综合征
中国于2005年第一次确定 NPHS1 基因突变 Shi Yan, et al, Peking University First Hospital Chin J Pediatr, 2005 生后45天男孩，足月，出生体重个2700g, 胎盘大小正常 生后10天出现肾病综合征 PCR and directly sequencing NPHS1 复合杂合突变compound heterozygous mutations 新（Novel ）突变：