羊肚菌菌丝生物学特性的研究

收稿日期:2006—02—28

作者简介:高成华(1980-),女,辽宁法库县人,助教,主要从事酶的提取纯化、食用菌及植物组织培养等方面研究.【实验技术研究】

羊肚菌菌丝生物学特性的研究

高成华,吴　雪

(抚顺师专,辽宁抚顺113006)

摘　要:从固体培养基、液体培养基、碳源、氮源、酸碱度、温度、光照等方面探讨羊肚菌菌丝的生物学特性.结果表明,羊肚菌菌丝适宜在PDA 固体培养基以及黄豆芽———玉米粉液体培养基中生长;羊肚菌菌丝生长的最适碳源为葡萄糖,最适氮源为硫酸铵;羊肚菌菌丝生长的最适pH 范围为6～7,最适温度为25～33℃之间,并且在光照条件为弱光时羊肚菌菌丝生长状况较好.

关键词:羊肚菌;菌丝体;生物学特性

中图分类号:Q93915 文献标识码:A 文章编号:1008-5688(2006)04-0104-04

羊肚菌又名羊肚菜,是一种营养丰富、风味特殊、食药兼用的珍贵真菌.目前,大规模商业人工栽培羊肚菌有一定困难,但有资料显示,60年代以来,美、法等国开始大规模生产羊肚菌菌丝体,用以制造调味品,在市场上颇受欢迎.这说明羊肚菌菌丝体的应用价值也是相当高的,而且,羊肚菌菌丝体的生产

较子实体的生产要容易[1].因此,深入了解羊肚菌菌丝的生物学特性,进而使菌丝体的产量增大,具有十

分重要的意义[3].本实验对此进行研究,材料由沈阳农业大学土地与环境学院微生物教研室提供.

1　实验方法[2]、[4]

111　不同固体培养基试验(见表1)

表1　固体培养基种类及配方

培养基名称

配 方查氏(M1)

蔗糖30g ,硝酸钠3g ,磷酸氢二钾1g ,氯化钾015g ,硫酸镁015g ,硫酸铁0101g ,琼脂20g ,水1000m L ,pH=7葡萄糖硝酸盐(M2)

葡萄糖20g ,硝酸钾1g ,磷酸氢二钾015g ,硫酸镁015g ,氯化钠015g ,琼脂20g ,水1000m L ,pH =7高氏一号(M3)

淀粉20g ,硝酸钾1g ,硫酸铁0101g ,磷酸氢二钾015g ,氯化钠015g ,琼脂20g ,水1000m L 淀粉铵(M4)

淀粉10g ,硫酸铵2g ,磷酸氢二钾1g ,硫酸镁1g ,碳酸钙3g ,氯化钠1g ,琼脂20g ,水1000m L PDA (M5)土豆200g ,蔗糖20g ,琼脂20g ,水1000m L ,pH =7

112　不同液体培养基试验(见表2)

113　不同碳源试验按照表1中葡萄糖硝酸盐培

养基配方,以硝

酸钾为氮源进行

碳源试验,记录

表2　液体培养基种类及配方

培养基名称

配 方PY P (I )土豆20%,酵母膏011%,蛋白胨011%,葡萄糖2%,硫酸镁011%,磷酸二氢钾011%MY P (II )麦芽汁30%,酵母膏011%,蛋白胨011%,硫酸镁115%,磷酸二氢钾011%CYG (Ⅲ)玉米粉2%,酵母膏011%,葡萄糖011%,硫酸镁015%,磷酸二氢钾011%黄豆芽———玉米粉(Ⅳ

)黄豆芽(煮汁)100g ,玉米粉30g ,磷酸二氢钾015g ,硫酸镁013g ,水1000m L 计算筛选出最适合羊肚菌菌丝生长的碳源.

114　不同氮源试验

仍采用113中的固体培养基配方,以葡萄糖为碳源,进行氮源试验.记录一次菌丝密度、菌落颜色,并测量一次平板菌落直径,计算筛选出最适合羊肚菌菌丝生长的氮源.

115　不同pH 值试验

根据表3数据,混合配制成5个pH 梯度缓冲液.

记录计算筛选出最适合羊肚菌菌丝生长的pH 值.116　不同温度试验

表3　缓冲液的配制 单位:ml pH 56789磷酸氢二钠1013012163161471914520100柠檬酸91907137315301550 选取3个温度梯度(17℃、25℃、33℃

),将接种后的土豆加富培养基在3个温度下遮光培养.记录第8卷第4期2006年12月 辽宁师专学报Journal of Liaoning T eachers College V ol 18N o 14Dec 12006

计算筛选出最适合羊肚菌菌丝生长的温度.

117　不同光照试验

将接种后的土豆加富培养基分别置于强光(直射光)、弱光(散射光)的条件下培养,进行不同光照试验.记录计算筛选出最适合羊肚菌菌丝生长的光照条件.

2　结果与分析

211　羊肚菌菌丝在不同固体培养基中的生长效应

由表4、图1可知供试羊肚菌菌丝在所配制的5种固体培养基

中均可生长,其中,在PDA 培养基中生长最好,在葡萄糖硝酸盐

培养基中生长较好.

表4　羊肚菌菌丝在不同固体培养基中的生长效应

培养基菌丝密度菌落颜色

菌落日平均伸展速度(mm/d )M1++浅黄绿

710M2+++纯　白

818M3++纯　白

813

M4+纯　白

817M5+++浅　黄910

注:(1)菌丝密度“+++”、“++”、“+”分别表示浓密、

较密、稀少,下同.

(2)菌落日平均伸展速度为5次重复的平均值,下同.

212　羊肚菌菌丝体在不同液体培养基中的生长效应

由表5、图2可知,供试羊肚菌菌丝体在所配制的4种液

体培养基中均可生长,其中,在黄豆芽———玉米粉培养基中

生长最好.

表5　羊肚菌菌丝在不同液体培养基中的生长效应

培养基

菌丝体干重重复1(mg Π100m L )菌丝体干重重复2(mg Π100m L )平均I

122710012361001231

150Ⅱ

167910013251001502100Ⅲ

404100442100423100Ⅳ185710015031001680100

213　不同碳源对羊肚菌菌丝生长的影响

由表6、图3可知,供试羊肚菌菌丝在3种不同碳源的培养基中

均可生长,说明这3种碳源均可为供试羊肚菌菌丝所利用.其中,

菌丝在以葡萄糖作为碳源的培养基中生长最好.此外,蔗糖是这3

种碳源中较好的碳源,而淀粉作为碳源相对于另外两种较差.

表6　不同碳源对菌丝生长的影响

碳　源菌丝密度菌落颜色

菌落日平均伸展速度(mm/d )葡萄糖+++浅黄绿

910蔗　糖+纯　白

814淀　粉++纯　白710

214　不同氮源对羊肚菌菌丝生长的影响

由表7、图4(见106页)可知,供试羊肚菌菌丝在3种不同氮

源的培养基中均可生长,说明此3种氮源均可为供试羊肚菌菌丝所

利用.其中,菌丝在以硫酸铵为氮源的培养基中生长最好,而硝酸铵、硝酸钾作为氮源相对于硫酸铵较差.

215　不同pH 值对羊肚菌菌丝生长的影响

由表8、图5(见106页)可知,供试羊肚菌菌丝在pH 为5～9的范围均可生长,pH 为5时,菌丝长势较弱,pH 为6～7时,菌丝长势最强,当pH 为8～9时,菌丝长势又变弱.因此,羊肚菌菌丝生长的最适pH 值为6～7.

表7　不同氮源对菌丝生长的影响氮　源菌丝密度菌落颜色菌落日平均伸展速度(mm/d )硝酸钾+纯　白1119硝酸铵++纯　白1115硫酸铵+++纯　白1212501高成华,等羊肚菌菌丝生物学特性的研究