五味子木脂素类成分提取分离及抗肝炎作用

五味子木脂素类成分提取分离及抗肝炎作用
刘正文v
,雷 婷(综述),刘光明
*
(审校)
(大理学院药学院,云南大理671000)
中图分类号:R285 文献标识码:A 文章编号:100622084(2009)2423790203
摘要:五味子为我国的传统中药,可收敛固涩、益气生津、补肾宁心。

现代植物化学和药理学研
究表明其富含木脂素类成分,且该类成分具有降酶保肝、增强肝脏解毒功能等多种作用,有较好的临床应用价值和研发潜力。

五味子的木脂素类成分的提取分离方法以及其抗肝炎作用的研究为五味子的开发提供理论依据。

关键词:五味子;木脂素;提取分离;抗肝炎
T he R ev i ew of E x tracti on and Separa ti on fro m Fru tu s Sch i zand rae and Its An ti 2h epa titis Acti v ity LIU Zheng 2w e n,L E I T i ng,LIU Guang 2m ing.(D e part m ent of Dhar m ac y,Da li univers it y ,Dali 671000,Ch i na )
Ab stract :Sch is andra c h i n ens i s(Turcz .)Ba il,l one of our Ch i nes e traditi onalm edici nes ,have the f un c 2ti on of arresti ng d isc h arge ,b enefiti ng q,i engenderi ng li quid ,t onifyi ng k i dney and qu i eti ng t he h eart .Phyt o 2che m i cal i n vesti gations and phar m acol og i ca l st ud i es d i splay that li gnan s are ri ch i n th i s herb and they can lo wer rel ated en z y m e t o protect t h e li ver and enhance t h e liver c s f unction of detoxication ,sho w i ng good val ues in cli n ical app licati on and poten tial devel opm en t .Them et h ods about the extracti on and separation of li gnan s
and the researches i n their an ti 2hep atitis activit y hel p to p rov i de a t heoreti cal basis for t he devel op m en t of
Sch i sandra ch i nen sis(Tu rcz .)Bail.l K ey word s :Fru t u s s ch izandrae ;L i ngans ;Extracti on and s eparati on;An ti 2h epatitis
五味子为木兰科植物五味子[Sc his andra c hine n 2sis (Turcz .)Bail.l ]或华中五味(Schisandra s phe nan 2t h era Rehd .etW ils)的干燥成熟果实。

前者习称/北五味子0,后者习称/南五味子0[1]。

其木脂素类化合物主要以1,2B 3,42联苯1,3环辛二烯为母核,为五味子治疗肝炎的主要药理活性成分[2]。

现对最近几年文献所涉及提取分离方法进行总结,并对其肝炎药理作用研究现状予以综述。

1 五味子木脂素类的提取分离1.1 溶剂提取法 利用药材在不同溶剂中溶解性不同而进行提取,是传统的提取方法。

该方法操作简单,成本低,易扩大生产。

但提取耗时、溶剂浪费且提取率低。

1.1.1 醇提法 提取木脂素常用方法。

潘新等[3]
优选出五味子甲素最佳提取工艺为40目粒度、4B 1液固比、80%乙醇溶液3h ,此时系统五味子甲素的收率已达94.2%。

尹湉[4]
进行醇提后用弱极性树脂AB 28对五味子总木脂素的纯化,纯化后,五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素3种有效成分的质量分数之和由1.197%提高到14.92%,总转移率为72.3%。

该法在保留五味子中有效成分的同时,显著降低固形物得率,可用于工业推广。

1.1.2 水提法 仅从提取木脂素类成分的效果看,水提取法远不如醇提法。

邢军等[5]
优选出五味子醇甲提取工艺为12倍量的水,浸泡7h ,回流提取3次,每次 1.5h ,提取率为6.40%。

姜怡等[6]
对五味子醇甲在水提的基础上进行醇沉提取。

该法可
作为五味子提取生产工艺的参考。

其最佳工艺为
粉碎成10目,用12倍量的
水,提取3次,每次1h ,滤液浓缩到1.0g 生药/mL 后醇沉至80%。

1.2 超声提取法 适用于中药材有效成分的萃取,是中药制药彻底改变传统的水煮醇沉萃取方法的新方法、新工艺。

该法无需高温、常压萃取,萃取工艺成本低,综
合经济效益显著。

裴毅
等[7]
确定了五味子甲素和五味子乙素的超声提取最佳工艺)))以8倍体积甲醇为溶剂,超声提取3次,每次10m in 。

1.3 超临界CO 2流体萃取法 以超临界流体为溶剂,可应用于多种液态或固态混合物中待分离组分
的萃取,具有萃取时间短、低温萃取、萃取彻底和有
利环保、痕量萃取等特点。

张怡[8]
得超临界CO 2流体萃取五味子提取物最佳工艺为萃取压力25MPa (1mmH g=0.133kPa),萃取温度50b C ,分离压力7MPa ,分离温度60b C ,萃取2.5h,CO 2流量15kg/h 。

1.4 超高压提取法 超高压技术是在常温高压条件下使原料有效成分迅速溶出,具有提取率高、提取
时间短、节能、无污染等诸多优点。

刘长姣等[9]
应用
超高压提取法提取五味子总木脂素,确定最优提取工艺为压力350MPa ,70%乙醇,固液比为1B 90,总木脂素得率为3.54%,常规回流提取方法的总木脂素
得率为2.593%,可见超高压提取方法更有利于总木脂素的提取。

1.5 法多索溶剂提取法 法多索溶剂是一类新的溶剂系统,主要由1,1,1,22四氟乙烷组成,具有不破坏臭氧层、无环境污染、耗能低且常温等优点。

刘本
等[10]
用法多索溶剂有效提取五味子甲素,提取率为0.45%(w /w),与10%甲醇调节的超临界CO 2的提
取率0.48%接近。

但与超临界流体提取设备相比,其设备较便宜。

1.6 微波萃取法 微波萃取是利用微波能来提高
萃取率的一种新技术。

具有设备简单、适用范围广、萃取效率高、重现性好、省时、污染小等特点。

在国#3790#医学综述2009年12月第15卷第24期 M ed i cal Recap i tu l ate ,Dec 2009,V o.l 15,No .24
内,微波萃取法用于中草药提取方面的研究报道还较少。

微波辅助提取五味子醇甲的优化工艺为:微波功率850W,乙醇浓度80%,料液比1B12,提取时间35m in,药材粉碎度80目。

1.7高速逆流色谱技术高速逆流色谱技术是一种不用任何固态载体或支撑体的液2液分配色谱技术。

Peng等[12]应用高速逆流色谱技术分离纯化五味子中五味子醇甲和五味子醇乙。

在应用D101大孔树脂进行初步纯化后,应用高速逆流色谱技术,以正己烷2醋酸乙酯2甲醇2水1B0.9B0.9B1,体积比为两相溶剂系统,从400mg初纯物中分离得到107mg五味子醇甲和36mg五味子醇乙,纯度分别为99.5%和99.1%,且用时<3h。

2五味子木脂素类抗肝炎作用
2.1保肝降酶作用
2.1.1对实验毒物引起的肝损伤作用五味子木脂素保肝作用比较全面。

最早期包天桐[13]用CCl
4
、硫代乙酰胺和乙炔雌二醇环戊醚引起小鼠肝损伤为模型,发现五仁醇均有不同程度的降低因化学物质引起的血清转氨酶升高作用,其有效成分存在于果仁中,且为脂溶性。

张明华等[14]研究五味子甲素和醇甲对血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、血清白蛋白和总蛋白的影响。

表明甲素和醇甲对四氯化碳所致肝损伤有一定的保护作用,二者作用无统计学意义,且有研究发现苯环中存在次甲二氧基的降酶作用较强[15]。

同时有研究认为[16]对CC l4引起的肝损伤作用机制,一方面是阻抑了#CCl3自由基对肝细胞膜的损害。

另一方面可能通过对肝微粒体细胞色素P450的影响而减少#CCl3的生成,肝细胞的损害因而减轻。

2.1.2对免疫性肝损伤作用高晔等[17]从免疫机制的角度证明五味子保肝降酶作用,其方法是用卡介苗+脂多糖激活致敏T淋巴细胞尤其是巨噬细胞,释放大量细胞因子,造成肝细胞损伤。

发现五味子对卡介苗+脂多糖诱发的肝损伤有显著的防治作用,其机制有待进一步研究。

2.1.3对其他肝损伤作用胡彦武[18]发现五味子藤茎能有效防治小鼠乙醇性肝损伤。

王洋等[19]发现五味子醇甲通过抑制库普弗细胞释放肿瘤坏死因子A、白细胞介素6、白细胞介素8来保护肝细胞及减少肝损害。

2.2抗脂质过氧化作用
2.2.1对乙醇引起脂质过氧化作用乙醇能引起肝脏损害,其原因之一是乙醇引起脂质过氧化。

实验发现预先口服五仁醇粗提取物、五味子酚或五味子乙素组別的小白鼠,肝脏组织内丙二醛含量与给予乙醇组比较显著降低[20]。

其他成分组如五味子醇甲和五味子醇乙的,并无显著抑制脂质过氧化作用,对小白鼠急性乙醇中毒所导致的肝脏丙二醛升亦无明显影响。

2.2.2对氧自由基脂质过氧化作用顾峥等[21]研究戈米辛J对氧自由基的作用,发现其可以清除氧自由基,对羟自由基的作用尤强,其两个对位酚羟基可能是它的活性基团。

但清除超氧阴离子的作用不是它抗脂质过氧化的惟一机制。

研究发现五味子乙素使肝细胞质液中超氧化物歧化酶及过氧化氢活性显著提高[22]。

这两种物质活性的提高,有利于体内清除O2-、-O H及H2O2,减轻氧自由基对细胞的损害。

2.2.3对其他脂质过氧化作用金昔陆等[23]研究发现,戈米辛J抑制Fe2+2维生素C和二磷酸腺苷/还原型辅酶所致的脂质过氧化的作用比维生素E的作用分别强13和6.8倍。

2.3其他作用¹对肝脏解毒功能的增强作用。

研究发现[15]口服甲素、乙素、丙素、醇甲及五味子酚,可使肝脏药物代谢酶的活性增强,而五味子酯甲、酯乙均无作用。

并且乙素选择性地诱导肝细胞滑面内质网中P450的活性,表明五味子所含的某些成分能提高肝脏的解毒功能。

并推测其抗肝损伤作用与对细胞色素P450的影响有关,具有保肝作用的化合物都能够诱导P450。

º增强肝糖原异生作用。

研究发现[16],小鼠口服五仁醇能促进肝脏蛋白质和肝糖原合成,同时发现乙素等的促进肝糖原生成的作用不是通过刺激肾上腺皮质激素的分泌而实现的。

3结语
中国是世界上五味子科植物资源最丰富的国家,全世界该科植物总计50种左右,中国即有28种,已发现19种科可供药用[24]。

我国对五味子的研究也较重视。

在合成方面,吴安心等[25]以没食子酸为原料,经十步合成,总收率为12%,成功合成出五味子甲素。

常俊标等[26]以没石子酸为原料进行了五味子醇甲的全合成。

在新药合成方面,据文献报道[16],人工合成五味子丙素时发现了中间体联苯双酯,可作为保肝降酶药。

同时鉴于其保肝降酶作用明显,但抗肝炎病毒的作用弱,停药后反跳率较高,进行结构改造合成了第2代治肝炎新药双环醇。

由上面的总结可以看出,当前对五味子木脂素的提取分离、抗肝炎作用等方面研究已逐渐丰富,其合成方面的研究报道较少。

但考虑到药用前景,今后在五味子合成方面也将会有更大的进展。

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断,并有助于椎间盘疾病的早期诊断和预防,对不同治疗方式的疗效评价也将提供一定的参考依据。

4D W I的应用前景与不足
D W I已经应用于全身各系统疾病的诊断,但是在椎间盘突出症中的应用尤其是在早期监测椎间盘的分子扩散状况来判断椎间盘的营养方面,尚存在不足。

主要是由于椎间盘面积相对较小,磁敏感伪影较重,较低的空间分辨率以及检查费用高限制了它的广泛应用。

随着研究的不断深入和硬件设备不断改进,图像信噪比、空间分辨率提高,图像后处理软件的开发等,D W I将在这一领域发挥重要的作用。

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