临床微生物学检验的课件

标本送检方法 --血液与骨髓
④ 怀疑菌血症应尽早采血，体温上升阶段采血 可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。 对已用抗菌药物而又不能停药者，可在下次 用药前采血。 ⑤ 每例至少采血两次，间隔0.5-1h，以利于提 高阳性率和区分感染菌与皮肤污染菌。感染 性心内膜炎在24小时内采血三次做血培养。 ⑥ 对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶部 位或髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓lml 作增菌培养。
（一）医院感染标本的采集和 运送的基本原则




发现医院感染应及时采集微生物标本 作病原学检查，二、三级医院微生物 标本送检率不应低于70%。 尽量在抗菌药物使用之前采集标本。 标本采集时应严格执行无菌操作，减 少或避免机体正常菌群及其他杂菌污 染。 标本采集后应立即送至实验室，床旁 接种可提高病原菌检出率。
三、分析前的质量控制
分析前质量控制是我国目前临床实验室 诊断质量保证中较为薄弱的环节，严重影 响临床微生物学实验室对感染样本中致病 菌的分离培养的阳性率和医院感染病原体 监控，也影响临床诊断，合理选用抗菌药 物，降低耐药菌的产生和提高感染的治愈 率，而且对预测或及时发现医院感染的暴 发流行、杜绝感染蔓延、研究医院感染的 发病机制和环节、制定有效的医院感染控 制措施等，均具有十分重要的意义。严格 实施正确的微生物标本送检和检验方法， 是做好医院感染病原体监测的关键。
以棉拭子采集的标本如：咽拭、肛 拭或伤口拭子，立即送检。 盛标本容器须经灭菌处理，但不得 使用消毒剂。 送检标本应注明来源和检验目的， 使实验室能正确选用相应的培养基 和适宜的培养环境，必要时应注明 选用何种抗菌药物。

（二）常见医院感染标本送检 方法

血液与骨髓 尿液 痰液 伤口、烧伤创面与脓液 粪便
标本送检方法 --尿液
③ 尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难， 或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤 穿刺采集无污染的膀肮内尿液。 ④ 送检标本以晨起第一次尿液为佳。 ⑤ 室温下尿标本耽搁稍久，可致尿内细菌浓度 明显增加而影响病原菌与污染菌的区分。不 能立即送检者，可暂存4℃冰箱，一般不存放。
标本送检方法 --血液与骨髓
① 通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以 肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静滴抗菌药物的静 脉处采取血标本。 ② 采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入 血培养基前，应过火消毒针头，最新资料显示更换针 头容易造成新的污染。血培养瓶应在避光室温中保存， 不必置冰箱保贮。 ③ 每次采血量成人5-10ml，婴幼儿l-5ml，培养基与血 液之比以 10：1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体 等杀菌物质。为提高阳性率，我们一般要求成人采血 不少于8 ml，儿童不少于3 ml，婴儿1-2 ml。
标本送检方法 --伤口、烧伤创面与
脓液
① 无菌生理盐水擦洗病灶表面后用棉拭子取病 灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送 检。 ② 对未渍破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后， 以无菌注射器抽取脓液送检：也可于切开排 脓时用无菌棉拭子采样。
标本送检方法 --粪便
① 排便后，挑取有脓血、粘液部分的粪便约 2—3g(液状粪便则取絮状物)，盛于灭菌广口 瓶或蜡纸盒送检。用棉拭挑取粪便插入 Cnry—BLair运送培养基或PH7．0的磷酸盐甘 油中送检，可提高病原菌检出率． ② 对不易获取粪便者或婴幼儿，可用肠拭于(又 称肛拭)采集。将拭子前端用无菌甘油水湿润 然后插入肛门约4—5cm(幼儿约2—3cm)处， 轻轻旋转擦取肠表面粘液后退出置运送培养 基内送检。
标本送检方法 --痰液
① 咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道 深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检。痰量极少 者可用45℃lO％氯化钠液雾化吸入导痰。 ② 对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔 或口腔抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管 镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌， 但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。 ③双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插 管思者，可用吸痰管经人工气道估插至肺支气 管水平吸引痰液。
标本送检方法 --尿液
① 中段尿：女性采样前应先用肥皂水或0.1％高 锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口；男性须翻 转包皮冲洗，用O.1％新洁尔灭消毒尿道 口．灭菌纱布擦干后收集标本。 ② 导尿管导尿采样可减少污染。对留置导尿者， 可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用空针 细针头斜穿管壁抽吸尿液。或消毒后解开接 口，弃去导尿管前段尿被、留无污染的膀胱 内尿液数毫升送检。不可从集尿袋的下端管 口留取标本。
标本送检方法 --痰液
④ 对重症、难治、或伴免疫抑制、或疑似厌氧 菌引起的医院内肺部感染可采用环甲膜穿刺 经气管吸引(TTA)、经胸壁穿刺肺吸引(LA)、 经纤维支气管镜或人工气道作防污染双套管 毛刷(PSB)或防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)采 集无口咽部菌群污染的痰液，进行精确的感 染病原学诊断。 ⑤ 痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。 室温下延搁数小时，定植于口咽部的非致病 菌呈过度生长，而肺炎球菌、葡萄球菌和流 感杆菌检出率则明显下降。
临床微生物学检验的 全程质量控制
一、临床微生物学检验的意义
对一个感染病人来说，细菌培 养无疑是非常必要的，有一个准确 的培养结果能很好地帮助临床医生 用药有的放矢，避免盲目用药给病 人带来沉重的经济负担，同时也可 以减少盲目用药造成的大量耐药菌 株的产生。
二、细菌室开展的业务范围
临床微生物包括细菌、真菌、 病毒等一大类微小生物。但象衣 原体、螺旋体及病毒等不能在无 生命活性的人工培养基中生长繁 殖，只能通过细胞培养才能达到 目的。细菌室应该能开展能在无 生命活性培养基中生长的所有细 菌，还有真菌。


咽拭、口腔拭子 浆膜腔积液、脑脊 液 生殖道标本 组织标本 静脉导管
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标本送检方法 --血液与骨髓
如怀疑病人患有感染性系统性炎症反 应综合征，需要采血进行培养，另外当 新生儿出现原因不明的黄疸时，应想到 败血症的可能并早期采血做培养。如果 一次血培养阴性又高度怀疑败血症时， 应反复做血或感染灶的渗出物的细菌培 养以提高阳性率。