右美托咪定对丙泊酚的水相浓度的影响

右美托咪定对丙泊酚的水相浓度的影响

目的：运用高效液相色谱法（HPLC）测定右美托咪定丙泊酚混合注射液的水相浓度，探讨右美托咪定影响丙泊酚注射痛的作用机制。方法：将待测的丙泊酚注射液按右美托咪定的浓度分为三组，每组5例样本。其中A组为单纯丙泊酚注射液组，B组丙泊酚注射液含右美托咪定0.75 μg/mL，C组丙泊酚注射液含右美托咪定1.25 μg/mL。反透析法得到游离在水相的丙泊酚后，用高效液相色谱仪测定各样本丙泊酚水相游离浓度，比较三组注射液水相浓度。结果：A组丙泊酚水相浓度最高，C组最低，三组水相浓度比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：右美托咪定可能通过降低丙泊酚水相浓度影响丙泊酚注射痛的发生。

丙泊酚注射痛是其在使用中引起患者不适的常见问题，在门诊麻醉不良事件投诉中处于首位。在手术常见的33个麻醉问题中，疼痛的发生率排列第3位，在令人关注的33个临床大问题中，其排列第7位[1-2]。研究表明丙泊酚的注射痛是由于水相中药物浓度引起的[3]。临床上丙泊酚经常复合使用一些药物减轻其注射痛：如局部麻醉药利多卡因，麻醉镇痛药阿片类，非甾体抗炎药等[4-7]。临床发现右美托咪定（dexmedetomidine，Dex）混合丙泊酚使用可降低丙泊酚注射痛，这与右美托咪定长的起效时间相悖，国内外未见相关报道。本研究旨在探讨右美托咪定影响丙泊酚注射痛的内在机制，为临床药物选择提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料将待测的丙泊酚注射液按右美托咪定的浓度分为三组，每组5例样本。其中A组为单纯丙泊酚注射液组，B组丙泊酚注射液含右美托咪定0.75μg/mL，C组丙泊酚注射液含右美托咪定1.25μg/mL。三组注射液均用生理盐水稀释至相同体积。

1.2 方法

1.2.1 标准曲线的制作取丙泊酚纯品分别配制成浓度为10、20、40、50、100 μg/mL的溶液，使用美国安捷伦高效液相色谱仪在如下色谱条件下进行测定：进样量为10μL，紫外线检测波长为271.4 nm，流动相为甲醇∶水∶甲酸=84∶15∶1，流速为0.8 mL/min；

固定相Syncronis/C18，4.8×250 mm，5 μm，色谱柱温为29 ℃，pH为3.1[8]。得出色谱图（色谱流出曲线），即样品流经色谱柱和检测器所得到的信号-时间曲线，然后以丙泊酚峰面积（峰与峰底所包围的面积）对丙泊酚浓度进行线性回归，得丙泊酚的标准曲线图及标准曲线公式。

1.2.2 高效液相色谱法测定丙泊酚的水相浓度将截留分子量3000 Da的透析袋剪成5 cm左右的小段，将其放于超纯净水中煮沸10 min，洗净备用，将纯净水与甘油配成浓度为2.25%的溶液作为释放介质备用。将10 mL 2.25%甘油装

入透析袋，两端扎紧，使透析袋完全浸入20 mL丙泊酚溶液中且保持密封，24 ℃下放置18 h，以上15例样本同时进行[9]。因透析截留分子量小和透析袋中甘油漏槽条件未达到，所以不会引起脂肪乳中的丙泊酚药物进一步释放。当达到透析平衡时，通过测量释放介质甘油中的药物浓度就可以反映出注射液中游离丙泊酚的水相浓度。在同样色谱条件下，使用美国安捷伦高效液相色谱仪对5例样本进样测定，得到色谱图。根据每份样本标准曲线公式和色谱图中丙泊酚峰面积计算出各样本丙泊酚水相浓度，运用统计学对每组5例样本的水相浓度进行处理，得出均值。

1.3 统计学处理采用SAS 9.2统计学软件对数据进行统计分析，计量资料以（x±s）表示，比较采取方差分析，方差不齐则采取秩和检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 标准曲线公式以丙泊酚峰面积（Y）对丙泊酚浓度（X）进行线性回归，回归方程为Y=-24.39+7.52X，R2=0.99。结果表明，丙泊酚在

1～100 μg/mL内呈良好的线性关系。

2.2 三组高效液相色谱图用丙泊酚纯品配出三组均值的标准溶液，相同条件下高效液相色谱仪测定，得出色谱图。本色谱条件下，丙泊酚色谱峰（色谱峰指流出曲线上的最突起部分）能够很好地与其他杂质色谱峰（杂质峰指流出曲线上另一低峰）分离。通过比较发现，随着右美托咪定浓度增加，丙泊酚峰面积在减少，代表水相游离丙泊酚浓度在降低，见图1～3。

2.3 样本的丙泊酚水相浓度A组丙泊酚水相浓度为（18.70±0.35）μg/mL，分别高于B组的丙泊酚水相浓度（14.76±0.32）μg/mL和C组的丙泊酚水相浓度（12.04±0.41）μg/mL，比较差异均有统计学

意义（F=430.48，P＜0.05）。

3 讨论

丙泊酚注射液在临床使用常见不良反应为注射部位疼痛，麻醉诱导阶段被许多患者列为整个围手术期最疼痛阶段[10]。研究发现，水相中游离的丙泊酚是引起注射痛的主要因素，这些游离的丙泊酚通过刺激血管神经末梢，激发激肽释放酶-激肽系统产生缓激肽，引起注射痛，其发生率与水相中游离药物浓度有关，游离药物浓度越高越易引起注射痛。在原本不引起注射痛的空白脂肪乳剂中加入丙泊酚即可引起注射痛，然而用超滤或者透析的方法将原本能引起注射痛的丙泊酚脂肪乳中水相的游离丙泊酚去除，会使注射痛程度减轻甚至完全消失，这些实验结果很好地证实了丙泊酚注射痛与水相中的游离丙泊酚有关[11-12]。右美托咪定具有镇静、镇痛、抗焦虑、抑制交感神经活性、稳定血流动力学、减少麻醉药

用量及呼吸抑制轻的特点，广泛用于麻醉静脉诱导与维持、局部麻醉辅助镇静、ICU及门诊患者的镇静镇痛等[13-18]。

本研究中显示C组丙泊酚水相浓度均低于A、B组，三组丙泊酚水相浓度随着右美托咪定浓度增加而降低，这可能与右美托咪定有关，右美托咪定增加了丙泊酚在脂相的溶解度，降低了其水相的浓度。本实验提示右美托咪定可降低游离丙泊酚注射液水相浓度，为临床右美托咪定与丙泊酚混合使用降低丙泊酚注射痛提供了理论解释，也支持了丙泊酚引起的注射痛与其注射液的水相浓度有关[3]。但各组中丙泊酚水相浓度的降低幅度并不与右美托咪定的浓度增幅成比例关系，表明右美托咪定增加丙泊酚的脂溶性并不与丙泊酚溶液中右美托咪定浓度成单纯直线相关，是否存在其他线性关系还需更大样本量研究分析。从实验色谱图可以看出，在此色谱条件下，游离丙泊酚与样本中其他物质组分分离良好，无杂质峰干扰，保留时间理想。A组水相浓度为（18.70±0.35）μg/mL，这与Rau等[19]测定的得普利麻水相丙泊酚浓度（18.60±0.60）μg/mL结果相一致，表明本实验采取的方法及条件简单易行，得出的数据准确可靠。

目前有关右美托咪定对丙泊酚脂肪乳注射痛影响的报道主要是右美托咪定预注可以减轻丙泊酚注射痛，但关于其与丙泊酚混合对丙泊酚注射痛影响的报道甚少，右美托咪定对丙泊酚注射痛的影响具体是怎样通过影响丙泊酚水相浓度而实现的，这全面的机制还未能确定，这些还有待于后续进一步实验研究探讨[20-21]。

参考文献

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[4]陈震，王飞，邓小明.丙泊酚注射痛的预防进展[J].临床军医杂志，2011，39（2）：389-391.

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[8] Adeishvili-Andguladze L V，Makharadze R V，Msh K，et al.