4_氨基偶氮苯的分光光度法测定
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亲电试 剂 进 攻 ４－氨 基 偶 氮 苯 铵 离 子 上 的 氮 原子发生一系列 反 应 变 化 生 成 重 氮 盐，作 为 亲 电 试剂的重氮盐正离子进攻邻甲氧基苯酚电子云密 度较 高 的 碳 原 子，形 成 中 间 产 物，然 后 失 去 氢 质 子 ，转 化 为 偶 氮 化 合 物 。 具 体 反 应 历 程 如 下 ：
第４期百度文库
李 引 等 ：４－氨 基 偶 氮 苯 的 分 光 光 度 法 测 定
３４３
随 ｐＨ 值的增加，先增加后降低，ｐＨ 在１．５～３范 围内 吸 光 度 最 佳，因 此，实 验 确 定 盐 酸 的 用 量 为 ０．２５ｍＬ（０．１ ｍｏＬ·Ｌ－１），此 时 反 应 液 的 ｐＨ 值 为 ２．５６。
４－ 氨基偶氮苯的分光光度法测定
李 引１，２，叶曦雯１＊ ，牛增元２，张清智２，高永刚２，李晶莹１
（１．青岛科技大学 环境与安全工程学院，山东 青岛 ２６６０４２；２．山东省出入境检验检疫局，山东 青岛 ２６６００２）
摘 要：研究了邻甲氧基苯酚分光光度法测定４－氨基偶氮苯方法的可行性。 通过对显色 过程中重氮化反应的酸度、时间及氨基磺酸铵用量，偶合反应的介质 ｐＨ 值、温度、稳定时 间等影响因素的研究，确定了测 定 的 最 佳 条 件 为：在 室 温 下，４－氨 基 偶 氮 苯 和 亚 硝 酸 钠 在 ｐＨ 值为２．５６时，反应生成重氮盐；在 ｐＨ 值 为 １０．２５ 时，重 氮 盐 与 邻 甲 氧 基 苯 酚 偶 联 显 色 ，重 氮 化 反 应 时 间 为３０ｍｉｎ，显 色 效 果 最 佳 。 在 优 化 条 件 下 ，在１～５０ｍｇ·Ｌ－１范 围 内 ， 偶合产物在最大吸收波长５０５．５ｎｍ 处吸光值的增加与 ４－氨基偶氮苯浓度的增加呈良好 的线性关系，检出限为（３σ）３ｍｇ·Ｌ－１。该方法操作简单易行，可 有 效 地 应 用 于 ４－氨 基 偶 氮苯的快速检测。 关 键 词 ：４－氨 基 偶 氮 苯 ；重 氮 化 偶 合 反 应 ；邻 甲 氧 基 苯 酚 ；显 色 反 应 中 图 分 类 号 ：Ｘ ５０２ 文 献 标 志 码 ：Ａ
为二次蒸馏水。 １．２ 实 验 步 骤
准确移取１ｍＬ 甲醇溶解的样品于２５ｍＬ 具 塞 比 色 管 中 ，加 水 稀 释 至９ｍＬ，加０．１ｍｏＬ·Ｌ－１ 的 ＨＣｌ溶 液 ０．２５ ｍＬ，摇 匀，加 入 ５０ｇ·Ｌ－１ 的 ＮａＮＯ２溶 液 ０．０５ ｍＬ，摇 匀，暗 处 放 置 ３０ ｍｉｎ。 加入２５ｇ·Ｌ－１的 ＮＨ４ＳＯ３ＮＨ２溶 液 ０．５０ ｍＬ ， 超声１０ ｍｉｎ 至 气 泡 除 尽。 加 入 ２％ 的 显 色 剂 邻 甲氧基 苯 酚 溶 液 （质 量 分 数 ２％ 的 乙 醇 水 溶 液 ） １．００ ｍＬ，摇 匀，立 即 加 入 ０．５ ｍｏＬ · Ｌ－１ 的 ＮａＯＨ 溶液１．００ｍＬ，用蒸馏水稀释至刻度线，混 匀。用 １０ ｍｍ 比 色 皿，以 蒸 馏 水 为 参 比，在 ５０５．５ｎｍ 测定其吸光度。 １．３ 重 氮 偶 合 反 应 机 理
４－氨 基 偶 氮 苯 是 一 种 有 害 的 芳 香 胺 ，有 致 畸 、 致 突 变 作 用 ，受 热 分 解 释 放 出 氮 氧 化 物 ，对 皮 肤 有 致敏作用，对 环 境 有 严 重 危 害 。 ［１－２］ 因 此，已 被 我 国的强制性标准《国 家 纺 织 产 品 基 本 安 全 技 术 规 范》、德国的《食品及 日 用 消 费 品 法》、欧 盟 的 Ｅｃｏ－ Ｌａｂｌｅ及纺织品生态标志 Ｏｅｋｏ－Ｔｅｘ Ｓｔａｎｄａｒｄ １００
２ 结果与讨论
２．１ 光 谱 扫 描 移取１．００ｍＬ ４－氨基 偶 氮 苯 标 准 使 用 液，按
１．２步骤操作，得到显色溶液 １ 份，在 紫 外 可 见 分 光光度计上进行扫描，得到吸 收 光 谱 曲 线 见 图 １。 由图 １ 可 见，４－氨 基 偶 氮 苯 与 邻 甲 氧 基 苯 酚 偶 氮 化合物的最大吸收波长在５０５．５ｎｍ 处。 ２．２ 重 氮 化 反 应 的 影 响 因 素 ２．２．１ 重 氮 化 反 应 盐 酸 用 量 的 确 定
ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ
图 ３ 酸 度 对 显 色 反 应 的 影 响 Ｆｉｇ．３ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐＨ ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ
２．２．２ 亚硝酸钠 与 氨 基 磺 酸 铵 的 比 值 对 显 色 反 应的影响
亚硝酸 钠 的 用 量 对 偶 合 反 应 会 产 生 较 大 影 响 。 ［１２－１６］ 因而，在重 氮 化 过 程 中 应 保 持 亚 硝 酸 钠 过量，但 在 进 行 偶 合 反 应 之 前，过 量 的 ＮａＮＯ２ 则 用氨基磺 酸 铵 除 去。 在 固 定 ＮａＮＯ２ 溶 液 的 用 量 为 ０．０５ ｍＬ，ＮＨ４ＳＯ３ ＮＨ２ 用 量 分 别 为 ０．１５， ０．３５，０．５，０．６５ 和 ０．８５ ｍＬ（ＮａＮＯ２ 与 ＮＨ４ＳＯ３ ＮＨ２的物质的量的 比 约 为 １∶１，１∶２，１∶３，１∶ ４，１∶５）的 条 件 下 ，考 察 了 两 者 用 量 比 的 变 化 对 显 色反应的影 响。 结 果 显 示，反 应 产 物 的 吸 光 度 随 氨基磺酸铵用量 的 增 加 变 化 不 大，当 两 者 比 值 等 于或大于１∶３时，即 可 将 亚 硝 酸 钠 快 速 除 尽 （淀 粉－碘化钾 试 剂 在 ０．５～２ｓ 内 不 变 色 ）。 所 以， ＮＨ４ＳＯ３ＮＨ２的 适 宜 用 量 为 ０．５０ ｍＬ。 ２．２．３ 重 氮 化 反 应 时 间 的 确 定
准确 移 取 ４－氨 基 偶 氮 苯 标 准 溶 液 １．００ ｍＬ， 按１．２步骤操作，测定０～１２０ｍｉｎ范围内重 氮化 反应时间对产物吸光度的影响。实验结果表明， 反 应 时 间 在 ３０ ｍｉｎ 内 ，吸 光 度 随 时 间 的 增 加 而 增 加，当反应时间在 ３０～６０ ｍｉｎ 时，吸 光 度 略 有 下 降，但变化幅度 很 小，超 过 ６０ ｍｉｎ 吸 光 度 基 本 趋 于 稳 定。 因 此，实 验 选 择 最 佳 反 应 时 间 为 ３０ ｍｉｎ。 ２．３ 偶 合 反 应 的 影 响 因 素 ２．３．１ 介质 ｐＨ 对显色反应的影响
收 稿 日 期 ：２０１１－１１－１５ 基 金 项 目 ：国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 科 研 项 目 （２００６ＩＫ０８５）． 作者简介：李 引（１９８５—），女，硕士研究生． ＊通信联系人．
３４２
青 岛 科 技 大 学 学 报（自然科学版）
第 ３３ 卷
基苯酚分光 光 度 法 进 行 测 定。 基 于 这 一 原 理，本 研究以邻 甲 氧 基 苯 酚 作 为 亚 硝 酸 与 ４－氨 基 偶 氮 苯重氮化反应产物 的 偶 联 剂，建 立 了 测 定 ４－氨 基 偶氮苯的分光光度法。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ ｂｙ ｇｕａｉａｃｏｌ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏ－ ｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ ４－ａｍｉｎｏａｚｏ－ ｂｅｎｚｅｎｅ ａｎｄ ｓｏｄｉｕｍ ｎｉｔｒｉｔｅ ｗｅｒｅ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｐＨ＝２．５６，ａｎｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎ－ ｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｄｉａｚｏ ｓａｌｔ ａｎｄ ｇｕａｉａｃｏｌ ｗｅｒｅ ｐＨ＝１０．２５ａｎｄ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ３０ｍｉｎ．Ｕｎｄｅｒ ａｂｏｖｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ａｔ ５０５．５ｎｍ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｌｌｙ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １—５０ ｍｇ·Ｌ－１， ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ（３σ）ｗａｓ ３ ｍｇ·Ｌ－１．Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ；ｄｉａｚｏ－ｃｏｕｐｌｉｎｇ ｒｅａｃｔｉｏｎ；ｇｕａｉａｃｏｌ；ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ
Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ４－Ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ
ＬＩ Ｙｉｎ１，２，ＹＥ Ｘｉ－ｗｅｎ１，ＮＩＵ Ｚｅｎｇ－ｙｕａｎ２，ＺＨＡＮＧ Ｑｉｎｇ－ｚｈｉ ２，ＧＡＯ Ｙｏｎｇ－ｇａｎｇ２，ＬＩ Ｊｉｎｇ－ｙｉｎｇ１
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ａｎｄ Ｓａｆｅｔｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｑｉｎｇｄａｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６０４２，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｅｎｔｒｙ－Ｅｘｉｔ Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ Ｂｕｒｅａｕ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６００２，Ｃｈｉｎａ）
第２３０３１２卷年第８４月期 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｑｉｎｇｄａｏ Ｕｎｉ青ｖｅｒ岛ｓｉｔｙ科 ｏｆ技 Ｓｃ大ｉｅｎ学ｃｅ ａ学ｎｄ报 Ｔ（ｅ自ｃｈ然ｎｏｌ科ｏｇ学ｙ（版Ｎ）ａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ） ＶｏＡｌｕ．ｇ３３．２０Ｎ１ｏ２．４ 文 章 编 号 ：１６７２－６９８７（２０１２）０４－０３４１－０４
（《生态纺织品标准 １００》）等列为禁用芳香胺。目 前，检测４－氨 基 偶 氮 苯 的 方 法 主 要 有 气 相 色 谱、 气－质联用、液 相 色 谱 或 液－质 联 用 等 ，但 ［３－１０］ 由 于 仪器成本高和对从业人员的技术水平有较高要求 等 原 因，使 这 类 方 法 在 应 用 上 受 到 一 定 的 限 制。 据文献报道［１１］，苯胺类物质 的 检 测 可 采 用 邻 甲 氧
的影响，见图３。由图３可知，ｐＨ 在 ８～１０．２５范 围内 变 化 时，吸 光 度 随 ｐＨ 值 的 增 加 而 增 加，当 ｐＨ＞１０．２５时，吸光 度 下 降 后 趋 于 稳 定。 实 验 选 定 氢 氧 化 钠 后 的 加 入 量 为 １．０ ｍＬ （ｐＨ 为 １０．２５）。
图 ２ 重 氮 化 酸 度 对 显 色 反 应 的 影 响 Ｆｉｇ．２ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉａｚｏｔｉｚａｔｉｏｎ ａｃｉｄｉｔｙ ｏｎ
１ 实验部分
１．１ 仪 器 与 试 剂 紫外可见分光光度计，ＵＶ２５５０ 型，日 本 岛 津
公司；ｐＨ 计，ＳｅｖｅｎＭｕｌｔｉ 型，瑞 士 梅 特 勒－托 利 多；超声清洗器，ＫＱ－１００Ｅ 型，昆 山 市 超 声 仪 器 有 限公司。
４－氨基偶 氮 苯 （Ｃ１２Ｈ１１Ｎ３，９８％，Ｄｒ．Ｅ）标 准 溶液（１ ５００ ｍｇ·Ｌ－１）：准 确 称 取 ４－氨 基 偶 氮 苯 标准品３７．５ｍｇ 于２５ｍＬ 棕色容量瓶中，用甲醇 溶解并定容，２０ ℃避光保存备用。使用时配成３０ ｍｇ·Ｌ－１，置 于 冰 箱 中 ４ ℃ 保 存；苯 胺 标 准 溶 液 （１ ５００ ｍｇ·Ｌ－１）；对 苯 二 胺 标 准 溶 液 （１ ５００ ｍｇ· Ｌ－１）；邻甲氧基苯酚；ＨＣｌ、ＮａＮＯ２、ＮａＯＨ、甲 醇、 ＮＨ４ＳＯ３ＮＨ２。 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯，分 析 用 水
实验考察了盐酸的用量对显色反应的影响， 见 图２。由 图２可 以 看 出 ，该 反 应 产 物 的 吸 光 度
图 １ ４－氨 基 偶 氮 苯 与 邻 甲 氧 基 苯 酚 显 色 反 应 的 吸 收 光 谱 Ｆｉｇ．１ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ ａｎｄ ｇｕａｉａｃｏｌ
第４期百度文库
李 引 等 ：４－氨 基 偶 氮 苯 的 分 光 光 度 法 测 定
３４３
随 ｐＨ 值的增加，先增加后降低，ｐＨ 在１．５～３范 围内 吸 光 度 最 佳，因 此，实 验 确 定 盐 酸 的 用 量 为 ０．２５ｍＬ（０．１ ｍｏＬ·Ｌ－１），此 时 反 应 液 的 ｐＨ 值 为 ２．５６。
４－ 氨基偶氮苯的分光光度法测定
李 引１，２，叶曦雯１＊ ，牛增元２，张清智２，高永刚２，李晶莹１
（１．青岛科技大学 环境与安全工程学院，山东 青岛 ２６６０４２；２．山东省出入境检验检疫局，山东 青岛 ２６６００２）
摘 要：研究了邻甲氧基苯酚分光光度法测定４－氨基偶氮苯方法的可行性。 通过对显色 过程中重氮化反应的酸度、时间及氨基磺酸铵用量，偶合反应的介质 ｐＨ 值、温度、稳定时 间等影响因素的研究，确定了测 定 的 最 佳 条 件 为：在 室 温 下，４－氨 基 偶 氮 苯 和 亚 硝 酸 钠 在 ｐＨ 值为２．５６时，反应生成重氮盐；在 ｐＨ 值 为 １０．２５ 时，重 氮 盐 与 邻 甲 氧 基 苯 酚 偶 联 显 色 ，重 氮 化 反 应 时 间 为３０ｍｉｎ，显 色 效 果 最 佳 。 在 优 化 条 件 下 ，在１～５０ｍｇ·Ｌ－１范 围 内 ， 偶合产物在最大吸收波长５０５．５ｎｍ 处吸光值的增加与 ４－氨基偶氮苯浓度的增加呈良好 的线性关系，检出限为（３σ）３ｍｇ·Ｌ－１。该方法操作简单易行，可 有 效 地 应 用 于 ４－氨 基 偶 氮苯的快速检测。 关 键 词 ：４－氨 基 偶 氮 苯 ；重 氮 化 偶 合 反 应 ；邻 甲 氧 基 苯 酚 ；显 色 反 应 中 图 分 类 号 ：Ｘ ５０２ 文 献 标 志 码 ：Ａ
为二次蒸馏水。 １．２ 实 验 步 骤
准确移取１ｍＬ 甲醇溶解的样品于２５ｍＬ 具 塞 比 色 管 中 ，加 水 稀 释 至９ｍＬ，加０．１ｍｏＬ·Ｌ－１ 的 ＨＣｌ溶 液 ０．２５ ｍＬ，摇 匀，加 入 ５０ｇ·Ｌ－１ 的 ＮａＮＯ２溶 液 ０．０５ ｍＬ，摇 匀，暗 处 放 置 ３０ ｍｉｎ。 加入２５ｇ·Ｌ－１的 ＮＨ４ＳＯ３ＮＨ２溶 液 ０．５０ ｍＬ ， 超声１０ ｍｉｎ 至 气 泡 除 尽。 加 入 ２％ 的 显 色 剂 邻 甲氧基 苯 酚 溶 液 （质 量 分 数 ２％ 的 乙 醇 水 溶 液 ） １．００ ｍＬ，摇 匀，立 即 加 入 ０．５ ｍｏＬ · Ｌ－１ 的 ＮａＯＨ 溶液１．００ｍＬ，用蒸馏水稀释至刻度线，混 匀。用 １０ ｍｍ 比 色 皿，以 蒸 馏 水 为 参 比，在 ５０５．５ｎｍ 测定其吸光度。 １．３ 重 氮 偶 合 反 应 机 理
４－氨 基 偶 氮 苯 是 一 种 有 害 的 芳 香 胺 ，有 致 畸 、 致 突 变 作 用 ，受 热 分 解 释 放 出 氮 氧 化 物 ，对 皮 肤 有 致敏作用，对 环 境 有 严 重 危 害 。 ［１－２］ 因 此，已 被 我 国的强制性标准《国 家 纺 织 产 品 基 本 安 全 技 术 规 范》、德国的《食品及 日 用 消 费 品 法》、欧 盟 的 Ｅｃｏ－ Ｌａｂｌｅ及纺织品生态标志 Ｏｅｋｏ－Ｔｅｘ Ｓｔａｎｄａｒｄ １００
２ 结果与讨论
２．１ 光 谱 扫 描 移取１．００ｍＬ ４－氨基 偶 氮 苯 标 准 使 用 液，按
１．２步骤操作，得到显色溶液 １ 份，在 紫 外 可 见 分 光光度计上进行扫描，得到吸 收 光 谱 曲 线 见 图 １。 由图 １ 可 见，４－氨 基 偶 氮 苯 与 邻 甲 氧 基 苯 酚 偶 氮 化合物的最大吸收波长在５０５．５ｎｍ 处。 ２．２ 重 氮 化 反 应 的 影 响 因 素 ２．２．１ 重 氮 化 反 应 盐 酸 用 量 的 确 定
ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ
图 ３ 酸 度 对 显 色 反 应 的 影 响 Ｆｉｇ．３ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐＨ ｏｎ ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ
２．２．２ 亚硝酸钠 与 氨 基 磺 酸 铵 的 比 值 对 显 色 反 应的影响
亚硝酸 钠 的 用 量 对 偶 合 反 应 会 产 生 较 大 影 响 。 ［１２－１６］ 因而，在重 氮 化 过 程 中 应 保 持 亚 硝 酸 钠 过量，但 在 进 行 偶 合 反 应 之 前，过 量 的 ＮａＮＯ２ 则 用氨基磺 酸 铵 除 去。 在 固 定 ＮａＮＯ２ 溶 液 的 用 量 为 ０．０５ ｍＬ，ＮＨ４ＳＯ３ ＮＨ２ 用 量 分 别 为 ０．１５， ０．３５，０．５，０．６５ 和 ０．８５ ｍＬ（ＮａＮＯ２ 与 ＮＨ４ＳＯ３ ＮＨ２的物质的量的 比 约 为 １∶１，１∶２，１∶３，１∶ ４，１∶５）的 条 件 下 ，考 察 了 两 者 用 量 比 的 变 化 对 显 色反应的影 响。 结 果 显 示，反 应 产 物 的 吸 光 度 随 氨基磺酸铵用量 的 增 加 变 化 不 大，当 两 者 比 值 等 于或大于１∶３时，即 可 将 亚 硝 酸 钠 快 速 除 尽 （淀 粉－碘化钾 试 剂 在 ０．５～２ｓ 内 不 变 色 ）。 所 以， ＮＨ４ＳＯ３ＮＨ２的 适 宜 用 量 为 ０．５０ ｍＬ。 ２．２．３ 重 氮 化 反 应 时 间 的 确 定
准确 移 取 ４－氨 基 偶 氮 苯 标 准 溶 液 １．００ ｍＬ， 按１．２步骤操作，测定０～１２０ｍｉｎ范围内重 氮化 反应时间对产物吸光度的影响。实验结果表明， 反 应 时 间 在 ３０ ｍｉｎ 内 ，吸 光 度 随 时 间 的 增 加 而 增 加，当反应时间在 ３０～６０ ｍｉｎ 时，吸 光 度 略 有 下 降，但变化幅度 很 小，超 过 ６０ ｍｉｎ 吸 光 度 基 本 趋 于 稳 定。 因 此，实 验 选 择 最 佳 反 应 时 间 为 ３０ ｍｉｎ。 ２．３ 偶 合 反 应 的 影 响 因 素 ２．３．１ 介质 ｐＨ 对显色反应的影响
收 稿 日 期 ：２０１１－１１－１５ 基 金 项 目 ：国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 科 研 项 目 （２００６ＩＫ０８５）． 作者简介：李 引（１９８５—），女，硕士研究生． ＊通信联系人．
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青 岛 科 技 大 学 学 报（自然科学版）
第 ３３ 卷
基苯酚分光 光 度 法 进 行 测 定。 基 于 这 一 原 理，本 研究以邻 甲 氧 基 苯 酚 作 为 亚 硝 酸 与 ４－氨 基 偶 氮 苯重氮化反应产物 的 偶 联 剂，建 立 了 测 定 ４－氨 基 偶氮苯的分光光度法。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ ｂｙ ｇｕａｉａｃｏｌ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏ－ ｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ ４－ａｍｉｎｏａｚｏ－ ｂｅｎｚｅｎｅ ａｎｄ ｓｏｄｉｕｍ ｎｉｔｒｉｔｅ ｗｅｒｅ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｐＨ＝２．５６，ａｎｄ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎ－ ｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｄｉａｚｏ ｓａｌｔ ａｎｄ ｇｕａｉａｃｏｌ ｗｅｒｅ ｐＨ＝１０．２５ａｎｄ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ３０ｍｉｎ．Ｕｎｄｅｒ ａｂｏｖｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ａｔ ５０５．５ｎｍ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｌｌｙ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １—５０ ｍｇ·Ｌ－１， ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ（３σ）ｗａｓ ３ ｍｇ·Ｌ－１．Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ；ｄｉａｚｏ－ｃｏｕｐｌｉｎｇ ｒｅａｃｔｉｏｎ；ｇｕａｉａｃｏｌ；ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ
Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ４－Ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ
ＬＩ Ｙｉｎ１，２，ＹＥ Ｘｉ－ｗｅｎ１，ＮＩＵ Ｚｅｎｇ－ｙｕａｎ２，ＺＨＡＮＧ Ｑｉｎｇ－ｚｈｉ ２，ＧＡＯ Ｙｏｎｇ－ｇａｎｇ２，ＬＩ Ｊｉｎｇ－ｙｉｎｇ１
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ａｎｄ Ｓａｆｅｔｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｑｉｎｇｄａｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６０４２，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｅｎｔｒｙ－Ｅｘｉｔ Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ Ｂｕｒｅａｕ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６００２，Ｃｈｉｎａ）
第２３０３１２卷年第８４月期 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｑｉｎｇｄａｏ Ｕｎｉ青ｖｅｒ岛ｓｉｔｙ科 ｏｆ技 Ｓｃ大ｉｅｎ学ｃｅ ａ学ｎｄ报 Ｔ（ｅ自ｃｈ然ｎｏｌ科ｏｇ学ｙ（版Ｎ）ａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ） ＶｏＡｌｕ．ｇ３３．２０Ｎ１ｏ２．４ 文 章 编 号 ：１６７２－６９８７（２０１２）０４－０３４１－０４
（《生态纺织品标准 １００》）等列为禁用芳香胺。目 前，检测４－氨 基 偶 氮 苯 的 方 法 主 要 有 气 相 色 谱、 气－质联用、液 相 色 谱 或 液－质 联 用 等 ，但 ［３－１０］ 由 于 仪器成本高和对从业人员的技术水平有较高要求 等 原 因，使 这 类 方 法 在 应 用 上 受 到 一 定 的 限 制。 据文献报道［１１］，苯胺类物质 的 检 测 可 采 用 邻 甲 氧
的影响，见图３。由图３可知，ｐＨ 在 ８～１０．２５范 围内 变 化 时，吸 光 度 随 ｐＨ 值 的 增 加 而 增 加，当 ｐＨ＞１０．２５时，吸光 度 下 降 后 趋 于 稳 定。 实 验 选 定 氢 氧 化 钠 后 的 加 入 量 为 １．０ ｍＬ （ｐＨ 为 １０．２５）。
图 ２ 重 氮 化 酸 度 对 显 色 反 应 的 影 响 Ｆｉｇ．２ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉａｚｏｔｉｚａｔｉｏｎ ａｃｉｄｉｔｙ ｏｎ
１ 实验部分
１．１ 仪 器 与 试 剂 紫外可见分光光度计，ＵＶ２５５０ 型，日 本 岛 津
公司；ｐＨ 计，ＳｅｖｅｎＭｕｌｔｉ 型，瑞 士 梅 特 勒－托 利 多；超声清洗器，ＫＱ－１００Ｅ 型，昆 山 市 超 声 仪 器 有 限公司。
４－氨基偶 氮 苯 （Ｃ１２Ｈ１１Ｎ３，９８％，Ｄｒ．Ｅ）标 准 溶液（１ ５００ ｍｇ·Ｌ－１）：准 确 称 取 ４－氨 基 偶 氮 苯 标准品３７．５ｍｇ 于２５ｍＬ 棕色容量瓶中，用甲醇 溶解并定容，２０ ℃避光保存备用。使用时配成３０ ｍｇ·Ｌ－１，置 于 冰 箱 中 ４ ℃ 保 存；苯 胺 标 准 溶 液 （１ ５００ ｍｇ·Ｌ－１）；对 苯 二 胺 标 准 溶 液 （１ ５００ ｍｇ· Ｌ－１）；邻甲氧基苯酚；ＨＣｌ、ＮａＮＯ２、ＮａＯＨ、甲 醇、 ＮＨ４ＳＯ３ＮＨ２。 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯，分 析 用 水
实验考察了盐酸的用量对显色反应的影响， 见 图２。由 图２可 以 看 出 ，该 反 应 产 物 的 吸 光 度
图 １ ４－氨 基 偶 氮 苯 与 邻 甲 氧 基 苯 酚 显 色 反 应 的 吸 收 光 谱 Ｆｉｇ．１ Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ４－ａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ ａｎｄ ｇｕａｉａｃｏｌ