沙枣叶化学成分的HPLC分析

沙 枣 （Ｆｌａｅａｇｎｕｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｈａ Ｌ）是 胡 颓 子 科胡颓子属的落叶小乔木或灌木，高 ４－１５ ｍ，喜 光，叶 和 幼 枝 披 银 白 色 表 皮 毛，背 面 较 密，叶 矩 圆 状披 针 形 至 狭 披 针 形，先 端 尖 或 钝，基 部 宽 楔 形［１］，两面均有白 色 鳞 片，下 面 较 密 成 银 白 色，侧 脉不显著。叶柄长８－１０ｃｍ，枝有棘 刺。 沙 枣 叶 片 中 含 有 各 种 营 养 成 分，具 有 较 高 的 经 济 价 值。 据测 定，叶 片 含 蛋 白 质 ４．０％、脂 肪 ２．４％、糖 １５．７％，脂肪和 糖 的 含 量 高 于 苜 蓿 。 ［２］ 而 在 其 干 叶 中 含 蛋 白 质 １５．７％ ，粗 脂 肪 ６．５％ ，无 氮 浸 出 物 １７．４％ ，另 外 还 含 有 黄 酮 成 分 。 因 此 ，沙 枣 叶 子 晒 干粉 碎 后 常 作 为 粗 饲 料 喂 猪，也 可 圈 养 羊、驼、兔 子等。由于小沙 枣 叶 即 使 枯 黄 也 不 易 脱 落，牲 畜 只能采食到树下 部 部 分 枝 叶，而 大 部 分 叶 子 牲 畜 无法采食。大沙 枣 叶 枯 黄 即 脱 落 于 地，因 落 叶 时 间 过 于 集 中 ，牲 畜 一 时 利 用 不 完 造 成 浪 费 。 此 外 ， 枯黄后自然脱落 的 沙 枣 叶，营 养 价 值 较 青 绿 的 大 为降低 。 ［４］
乙腈（色谱纯）、甲 醇 （色 谱 纯）均 购 于 天 津 化 学 试 剂 厂 ，水 为 超 纯 净 水 ，其 它 试 剂 均 为 分 析 纯 。
２ 方法与结果
２．１ 样 品 溶 液 的 制 备 精确称取粉碎好的 沙 枣 叶 样 品 ４０ｇ，将 其 放
人干 燥 洁 净 的 烧 杯 中，加 人 ５０％ 乙 醇 溶 液 １００ ｍｌ，于常温 （２５℃）下 浸 泡 ３０ ｍｉｎ；用 超 声 波 提 取 ３０ｍｉｎ；取 出 超 声 液 离 心 ，４ ０００ｒ，１０ｍｉｎ；将 离 心 后的上清液过滤，加 石 油 醚 于 滤 液 中 （石 油 醚：滤 液１∶２，Ｖ／Ｖ）萃 取 １ｈ，弃 掉 上 层，取 萃 取 液 下 层 于旋转蒸发 仪 ６０℃ 蒸 干 后 用 甲 醇 溶 解 后 定 容 至 ５０ ｍｌ 容 量 瓶 中，过 ０．２２ ｕｍ 的 滤 膜 后 进 行 ＨＰＬＣ 分析。流程图见图１。
论依据。
１ 材料、仪器与试剂
１．１ 试 验 材 料 沙枣叶子采自榆林市。
１．２ 仪 器 日本岛 津 ＬＣ－１０ＡＴｖｐ 高 效 液 相 色 谱 仪，
ＳＰＤ－１０Ａｖｐ 检 测 器，Ｃｌａｓｓ－ ＶＰ 工 作 站，紫 外 分光光度计（ＰＥＲＫＩＮＥＬＭＥＲ），色 谱 柱 Ｄｉａｍｏｎ－ ｓｉｌ Ｃ１８ （２５０×４．６ ｍｍ，５μｍ）、ＳＥＮＣＯＲ 系 列 旋 转蒸 发 仪，ＳＨＢ－ Ⅲ 循 环 水 多 用 真 空 泵，ＫＨ－ ２００ＫＤＥ 型高功 率 数 控 超 声 波 清 洗 器，ＴＢ－１１４ 型电子分析天平，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ超 纯 水 仪，ＺＮ－０２ 小 型高速粉碎机。 １．３ 试 剂
近年来有关沙枣的研究主要集中在营养成分 和 提 取 以 及 产 品 的 开 发 利 用 方 面，刘 晔 玮 等 பைடு நூலகம் （２００６）对 沙 枣 叶 中 黄 酮 含 量 测 定 方 法 进 行 了 研 究，刘清等人（２００６）用 原 子 吸 收 光 谱 法 测 定 了 沙 枣叶中 矿 物 元 素，得 出：沙 枣 叶 中 铁、锌、锰、铜 含 量在不同生长时 期 差 异 明 显，其 他 几 种 元 素 含 量 均丰富，并 且 微 波 消 化 的 效 果 优 于 湿 法 消 化 。 ［５］ 而有关沙枣叶 ＨＰＬＣ 指纹图 谱 研 究 却 未 见 报 道。 本实验对沙 枣 的 叶 子 的 ＨＰＬＣ 分 析 条 件 参 数 进 行了选择优化，以 期 为 沙 枣 的 指 纹 图 谱 研 究 提 供 参考；进 一 步 为 沙 枣 的 种 质 资 源 评 价 提 供 理
王晓荣等：沙枣叶化学成分的 ＨＰＬＣ 分析
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图 １ 样 品 制 作 流 程
２．２ 色 谱 条 件 的 建 立 经分别对 流 动 相 体 系、流 动 相 体 系 比 例、流
速、检 测 波 长、柱 温 等 进 行 选 择 和 优 化，确 定 色 谱 条件 为：流 动 相 为 乙 腈 ∶ 水 （５∶９５ｖ／ｖ）；流 速： ０．３ｍｌ／ｍｉｎ；检 测 波 长 ２４０ｎｍ；柱 温：３５℃；进 样 量 为 １０ｕｌ。 ２．３ 空 白 试 验
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陕 西 农 业 科 学
２０１３（１）
沙枣叶化学成分的 ＨＰＬＣ 分析
王 晓 荣１ ，魏 朔 南２ ，李 薇 薇３ （１．榆林学院，陕西 榆林 ７１９０００；２．西北大学，陕西 西安 ７１００００；３．第四军医大学，陕西 西安 ７１００００）
摘 要：通过对沙 枣 叶 子 ＨＰＬＣ 色 谱 条 件 的 选 择 和 优 化，确 定 了 沙 枣 叶 ＨＰＬＣ 分 析 条 件：流 动 相 比 例 为 乙腈∶水（７∶９３ｖ／ｖ）；流速：０．３ｍｌ／ｍｉｎ；检测波长２４０ｎｍ；柱 温：３５℃；进 样 量 为 １０ｕｌ；分 析 时 间 为 ８０ ｍｉｎ。 对主要色谱峰的保留时间和峰面积等色谱参数 进 行 分 析，结 果 表 明 各 相 关 指 标 符 合 ＨＰＬＣ 指 纹 图 谱 的 评 价 标准。为沙枣叶子的指纹图谱研究 提 供 了 参 考，进 一 步 为 沙 枣 的 种 质 资 源 合 理 开 发 利 用 提 供 理 论 依 据。 该 法 操 作 简 单 ，重 复 性 好 ，可 行 性 高 。 关 键 词 ：沙 枣 叶 片 ；ＨＰＬＣ；指 纹 图 谱
收 稿 日 期 ：２０１２－０３－１６ 项 目 来 源 ：榆 林 市 科 技 局 科 研 计 划 项 目 “榆 林 市 优 良 绿 化 植 物 的 引 进 、繁 殖 技 术 研 究 与 示 范 ”（项 目 编 号 ：Ｎｙｇｇ２００８１４）。 作者简介：王晓荣（１９６８－ ），女，陕西佳县人，教授，硕士，主要从事观赏植物及花卉学的教学及科研工作。