第六章 发酵条件及工艺控制详解

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量以最高罐批经验量为参考。 每小时 前期0~40h 中期40~90h 后期90h以后 加糖量 0.08%-0.15% 0.15% - 0.18% 0.15% -0.18%
补糖量的控制: 动力学方法
依据μ、 qP 、 qC等动力学参数 之间的关系,计算加糖量
以次级代谢产物为例:
控制原则:
μ、
qP
、 qC之间的关系:
以维持临界生长限制基质 浓度、临界菌体浓度和临
μ
X
界比生长速率为指标的基 质流加速率与消耗速率的
qp
S
qC
平衡。
补糖的控制
把计算的加糖量,输入计算机,由计算机控制加 料装置精确控制加入的糖量。
二、氮源的影响和控制 (一)氮源的种类影响
迅速利用的氮源
缓慢利用的氮源
种类:氨水、铵盐和玉 种类:黄豆饼粉、花生
迅速利用的碳源
缓慢利用的碳源
种类:葡萄糖
种类:淀粉、乳糖、蔗
优点:
糖、麦芽糖、玉米油
吸收快,利用快,能迅 优点:
速参加代谢合成菌体和 不易产生分解产物 阻遏
产生能量
效应。
缺点:
有利于延长次级代谢产
有些品种产生分解产物 物的分泌期
阻遏效应。
缺点:溶解度低,发酵 液粘度大。
碳源种类的控制
发酵工业中常采用含迅速利用的碳源和缓慢 利用的碳源的混合碳源。
量达不到最适量。 要控制有机氮源中的磷含量,以防溶磷量超过最
适量。 当菌体生长缓慢时,可适当补加适量响及控制
影响菌体浓度的因素 菌体浓度的增加速度(生长速度)与微生物的种
类和自身的遗传特性有关
菌体浓度的增加速度(生长速度)与营养基质的 种类和浓度有关 ( μ 正比于S )
(三)碳源浓度的控制
在发酵过程中,补加糖类控制碳源浓度 补料的类型:
1、流加 2、少量多次的加入 3、多量少次的加入
补糖的依据:
残糖量 pH值 Qc 菌体浓度 ( X ) 粘度 溶氧 尾气中O2和CO2的含量 发酵液的总体积
补糖量的控制: 经验法:
根据经验,以最高产量的罐批的加糖率为指标,并依据 菌体浓度、一定时间内的糖比消耗速率和残糖等加以修正。 例: 青霉素发酵开始补糖在残糖降至1.5%, pH开始回升时补糖。补糖
青霉素发酵的qP与μ的关系
μ > μC qP可维持在qPmax μ < μC qP随μ减小而减小
qP / qPm
1.0-
μC
μ
1.0
/
μm
要保证生产菌获得最大的比生产速率,就必须维持较大的比生 长速率。
但是,过高的比生长速率造成过高的菌体浓度,造成不利影响:
过高的比生长速率和过高的菌体浓度造成的不利影响:
当存在基质抑制作用时或造成高渗透压时,高浓 度营养基质引起生长速率下降。
菌体浓度的增加速度(生长速度)受环境条件的 影响
最适菌体浓度的确定
优化控制的目标:在最短的时间内产生最大量的 产物。(dP/dtMAX)
dP/dt =qP X qP=f〔 X, μ , qO 2 qS CL〕
以青霉素发酵为例
1、 μ过高,S消耗过快,有限的营养基质只能用于生长, 而不足于产物合成。
2、有毒中间产物的快速积累,会改变菌体的代谢途径, 抑制产物合成。 3、 X过高,增加OUR,且发酵液粘度增大,减小OTR。 CL减小,抑制菌体生长和产物合成。
最适μ为等于或稍大于μC
最适X?
青霉素发酵的qP、OUR、OTR与X的关系
第六章 发酵条件及工艺控制
发酵工艺控制的基础: 了解产生菌生长、发育及代谢情况及动力学模型 了解生物、物理、化学和工程的环境条件对发酵过
程的影响
如何进行控制? 测定各种参数 依据参数变化,并通过动力学关系获得发酵过程的
各项最佳参数
第一节 营养基质和菌体浓度的影响及控制 一、碳源
(一)碳源种类的影响及控制
使氨基氮上升0.004%-0.005%。
动力学方法;
通过qN、μ、 qP ,计算每小时的补氮量。
三、磷酸盐的影响和控制 (一)磷酸盐源的影响
磷酸盐能明显促进产生菌的生长。 (0.32-300mM) 对于次级代谢产物,高浓度的磷酸盐能抑
制产物合成。 (10mM以下)
(二)磷酸盐浓度的控制
一般在基础培养基中采用适宜浓度。 对于初级代谢产物,磷酸盐浓度采用足量。 对于次级代谢产物,磷酸盐浓度采用生长亚适量。 一般磷酸盐采用单消,防止发生沉淀反应使溶磷
确定基础培养基的适当配比,防止培养 基过于丰富或过于稀薄。
通过调节中间补料的速度和量来控制。
第二节 温度的影响及控制
一、温度对发酵的影响:
酶活
影响各种酶促反应的速度
发改酵变温发度酵升高液,的生物长理代性谢质加快:,生
米浆
饼粉、和棉子饼粉
优点:
优点:
易被菌体利用,明显促 利用缓慢,有利于延长次
进菌体生长
级代谢产物的分泌期。
缺点:
防止早衰。
对于有些品种高浓度的 缺点:溶解度低,发酵
铵离子抑制产物合成
液粘度大。
(二)氮源种类的控制
发酵工业中常采用含迅速利用的氮源和缓慢 利用的氮源的混合氮源。
迅速利用的氮源促进菌体生长繁殖,缓慢利用的氮源, 满足产物合成,可延长合成期,延缓自溶期。
OTR
1.0-
OUR=OTR时的菌体 浓度为最适菌体浓度,
qP / qPm dp/dt
OUR
XC X / Xm 1.0
在发酵过程中,控制目标为保持稳定的临界菌体浓度和 临界比生长速率,以维持呼吸临界溶氧浓度为前提的耗氧 速率与供氧速率的平衡,从而使产物合成速率和比速率达 到最大值。
生长速度和菌体浓度的控制方法
迅速利用的碳源满足菌体生长的消耗,缓慢利用的碳 源,满足产物合成,可延长合成期,提高产量,并可 解除葡萄糖效应。
(二)碳源浓度的影响
S过小
μ < μC
qP随μ减小而减小
S过大
μ >> μC
OUR增大
X >> X C
CL < CL C
qP减小
粘度增大
Kla减小
产生分解产物阻遏作用的碳源浓度过大,会抑制产物合成。
(三)氮源浓度的影响控制
氮源浓度对菌体生长和产物合成的量与方向都 有影响。 氮源浓度的控制: 控制基础培养基中的配比。 通过补加氮源。 补氮的依据:残氮量、pH值、菌体量
补氮量的控制:
经验法:
依据使pH升高0.1而通入氨水的量来计算。 依据残氮量和工艺控制残氮量来计算。 例: 土霉素发酵50m3发酵罐使pH升高0.1通氨量为10升。
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