动物胚胎移植技术及体外受精

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受精过程 ①分解放射冠的卵泡细胞 ②水解局部透 明带 ③ 精子细胞核和部分胞质进入卵母细胞
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卵裂及胚泡形成（第一周）
卵裂(cleavage)
受精卵由输卵管向子宫方向运行，并不断进行细胞分裂，受精 卵早期的细胞分裂称卵裂；卵裂产生的子细胞呈球形，称卵裂 球（blastomere）
一、胚胎移植
受精卵移植
把一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫 中冲洗出来，移植到另一头雌性动物的输卵 管或子宫内，使之继续发育成新个体的技术
供体
提供胚胎的动物
受体
接受和孕育胚胎的动物
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胚胎移植的历史
初始阶段
1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔的受精 卵分别移植到比利时兔的输卵管内，分别获得仔 兔2只
大家好
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第五章 动物胚胎工程技术及体外受精
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现代生物技术
家畜育种领域
繁殖生 物技术
分子生 物技术
人工授精技术
胚胎工程技术
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超数排 胚胎性 卵和胚 别鉴定 胎移植
体外 胚胎 克隆 受精 分割 技术
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试管婴儿
体外受精联合胚胎移植技术（IVF）
1978年英国专家steptoe和Edowrds定制了 世界上第一个试管婴儿
正常的母畜
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受体的选择
身体健康，身体状况中上的适繁未孕个 体，无生殖道疾病和难产病史
繁殖状况正常，有正常的发情周期 母性良好：泌乳性能、护仔性能
供、受体的管理
防疫、记录 饲养管理等
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2）同期发情 （synchronization of eatrus）
体外培养：将胚胎置于体温条件下， 在培养液中，使其继续发育
胚胎冷冻：通过一定的处理程序， 将胚胎降温冷冻后，保存于液氮中
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•胚胎冷冻的原理
胚胎冷冻实际是脱水的过程，冷冻 保存的关键是设法减少细胞内冰晶 对胚胎的损伤
冷冻过程中，水分形成冰晶造成细 胞机械损伤，同时，导致未结冰的 细胞内溶液渗透压急剧升高，造成 蛋白质变性，导致死胎
1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵羊、山 羊小家畜方面研究，成功率35%左右
发展阶段
1950-1970 日本首次在牛胚胎移植上成功，之后 日、美采用非手术法移植成功，胚胎移植成功率 达70-80%
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胚胎移植的历史
实用化初始阶段 1970-1980 加美开始成立牛胚胎移 植公司，1973年牛冻胚移植成功（英）
桑椹胚（morula）
受精后第3天，形成 了12~16个卵裂球组 成的实心胚，形似 桑椹，称桑椹胚
胚泡形成
受精后第4~6天桑椹胚细胞继续分裂，细胞间 开始出现小腔隙，并逐渐汇合成一个大腔，桑椹胚转变为 中空的泡状，称胚泡（blastocyst），胚泡由三部分组成：
极端滋养 层
滋养层
胚泡 内细胞群
胚泡腔
联系
胚胎的遗传性不受受体的影响
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2. 胚胎移植的基本原则
胚胎移植前后所处的环境的同一性
供体和受体在分类学上的相同属性 动物生理上的一致性：受体和供体在发情时间上的同
期性 动物解剖位置上的一致性：空间环境的一致性
胚胎的发育期限：必须处于周期黄体期内 胚胎的质量：胚胎必须是正常的，并在处理过程中不受
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个体对超排处理的反应效果难以预测 产生不良的后果：胚胎死亡 卵母细胞蛋白质合成过程发生改变 生殖道机能产生影响
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4）胚胎回收
利用冲胚液从供体的生殖道中冲洗 出来，提供移植或其它胚胎工程用
手术法 非手术法
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胚胎质量评价：
不良因素的影响
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3、胚胎移植
供受体的选择与管理 供体的超数排卵处理和配种 受体的同期发情处理 胚胎回收 胚胎检查 胚胎移植
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1）供受体的选择与管理
供体的选择
遗传价值：生产性能优秀的母畜 健康状况:身体健康，营养水平中等以
上的未孕动物 繁殖性能：达到配种年龄以上繁殖机能
实用化研究阶段 1982- 大规模胚胎移植、核移植、嵌 合体、胚胎分割、性别鉴定、体外受精 在英美日德广泛开展，克隆羊诞生
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1.胚胎移植的生理学基础
成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡，在外 源激素作用下，每个发情期的卵泡发育和排卵 数可达数十个
每个发情周期生殖器官都有一个孕向发育 早期胚胎处于游离状态 胚胎发育不存在免疫问题 胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组织
1978年7月25日世界第一例试管婴儿Louis Brown在英国诞生。IVF的最早阶段妊娠成 功率只有2.94％。
大陆首例试管婴儿郑萌珠于1988年3月10日 上午8点56分在北京医科大学第三医院诞生
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第一节 胚胎工程技术
胚胎移植 胚胎融合 胚胎分割 胚胎的冷冻保存 早期胚胎培养 胚细胞核移植
采用激素或类激素的药物处理，使这一 群母畜在特定时间内集中发情和排卵
即将母畜的黄体期延长或缩短，使母畜 摆脱内、外孕激素对卵巢的控制，在同 一时间内引起全部母畜的卵泡发育，从 而达到同期发情的目的
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延长黄体期：孕激素 控制卵泡的生长发育和发情表现
缩短黄体期：前列腺素 加速黄体退化，使卵巢提前摆脱体内
透明带的形态和完整性
胚胎的发育与胚龄是否一致
胚胎的形态与匀称性，胚内细胞大小的变化
细胞质的结构及颜色，胚内是否出现空泡， 细胞碎片，有无游离细胞
如A级：
为优良胚胎，形态典型，卵裂球轮廓清
晰，紧密充实，大小均一，细胞质致密，色
调和分布均一
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6）胚胎的保存
胚胎的降温：使胚胎停止发育，延 长其体外生存时间
孕激素的控制 促进卵泡发育、排卵：促性腺激素
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3）超数排卵
超排：以各种外源性促性腺激素诱发动物 卵巢的许多卵泡发育并排出具有受精能力 的卵子
孕母马促性腺激素、促卵泡素、前列腺素、 促排卵类药物、孕激素
超数排卵处理的时期应选择在发情周期的 后期，即黄体消退时期
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