环境微生物学：第13章微生物与环境监测(4学时)

4 基➢伊的1红发4 美酵蓝管24培中养，基3572：℃深培紫养10 黑24h色4，0 具金6属9 光＞泽2；30
5
根紫据黑1复8色发，酵不30结带果或，略70统带计金初属发光酵泽阳；性淡管紫及红瓶色， 数中，心查色表较得深出总大肠菌群数
滤膜法
滤膜灭菌：蒸馏水煮15m糙in面×向3次上； 滤比器发灭酵菌法：缩酒短精时棉间球，火菌有焰落可灭不能菌多在或于2540h个内；完成
产气，需氧或钠兼、性脱厌氧氧胆的盐G-钠无、芽溴孢甲杆酚菌紫、 ➢ 方法：多管发溴酵酚法红、等滤膜法
粪大肠菌群
➢ 能在44.5℃发酵乳糖的大肠菌群，亦称耐热 性大肠菌群。
粪大肠菌群与粪便中大肠杆菌数直接相关， 且在外环境中不易繁殖，因此意义更大
多总大管肠菌发群酵检数法表
10ml水初发100酵ml：水量30的0m阳性l待瓶测数 水1样0m分l水别1加00入ml水含量双的料阳性乳瓶数
第十三章 微生物与环 境监测
生物监测的主要优越性和主要缺点
长期性：汇集了生物在整个生活时期中环 境因素改变的情况，反映当地的环境变化
综合性：能反映环境诸因子、多成分对生 物有机体综合作用的结果
直观性：直接把污染物与其毒性联系起来 灵敏性：有时甚至具有比精密仪器更高的
灵敏性，有助于提早发现环境污染 定量化程度不够 需要一定的专业知识和经验
新进展：“大肠菌群产色基质试验”
§13-2 空气质量的微生物学检测
空气中的细菌总数：
➢ 平板暴露沉降法采用直径9cm平皿在1.2m高 处暴露5min，培养计数；
➢ 奥氏公式：5min内落在100cm2营养琼脂平板
上的细菌数和10L空气中所含的细菌数相同
12孔1℃径300.4m5i~n0.65μm，多孔继性续硝抽化气纤5s；维膜
灭菌：
置于平板上，不得留有气泡
过滤水样：37℃培养24h 挑取特征菌落染色镜检
G-无芽孢杆菌的穿刺接种到乳糖蛋白胨半 固体培养基（预先煮沸排气），37℃培养
6～滤8膜h，法产测气定者为总“＋”，培养基内部形成 龟裂大状，肠甚菌至群部分上浮
➢ 对 强肠氯 于道等肠正消道常毒致细剂病菌及 菌其肠他球不菌良群因素副的大抵肠抗杆力菌略 ➢ 检出与鉴定方法比产较气简荚便膜迅杆速菌群
粪便污染EC指培养示基菌：及三号其胆检盐测、胰蛋
白胨、乳糖 总大肠菌群 M-TEC培养基：眎蛋白胨、 ➢ 是一群能在37酵℃母培膏养、24h乳内糖发、酵十乳二糖烷、基产磺酸酸
污Biblioteka Baidu带的划分及其特征
§13-1 水多污体带 质量α-中的污带微生β-中物污带学检寡测污带
腐数/生m有（L细-个1机)菌物污数数染十百万指万至示菌及数十其万检测 数万
数十至 数万
➢ 细菌总含数大量有机 主要是氨 ••••➢有溶B定 结 卫 评 腐机解O不D极物氧义 果 生 价 生5反 间 相清清太清：：标：细映接对洁洁清极洁P物准菌环反性cr低水水洁根厌，和非f水数u合或境映氧体体水据主碳常/水水下生室没物体性中一m要水高体细有样 样 活3活 内是化l异 般7G或，菌℃在 所 饮饮 空B养 营c总培/营 含 用f用 气和机半u型 养少T数A较物厌/养养 菌 水水<5量A少细 性g含氧，高7划211114琼 落 标，<500050量性有8菌 有023401分1h~脂 的 准~~~.001的 机后01/1112天上 总 检0000m-有c污 物，23452量较需然f有 数 验23C机较CCCu染的所极多 氧0/FFFF水物低6氧。方微，性mUUUU）程污得含体条（法l////度染1mmmmm件生程lLLLL很需很度多氧低，性
量的阳糖如蛋无0白细胨菌培增1养殖基现的象2 发，酵为量瓶的“阳（－发”酵0；管如）仅1，发混现芒2 性管数匀状后每、升3霉7水℃状样培中或大养其肠2他菌4h群无数关菌性管属数的菌每升落水，样为中大“肠－菌”群数；
0 平挑板取＜分符3 离合：下4从列阳特性征11管的中菌取落6 液1/，3涂2分2片别、接G3种6染在色、92
结果与卫生标准：
➢大大肠肠菌菌群群产数色（基个质/试L或验个（/2m4hl） 即可；完饮成用）水标准： 活0性个/1邻00硝m基l，苯土-壤β-D<1-00个4－/g甲基伞形酮基-β➢底大物肠菌吡群喃值半：乳水糖样苷中可D检葡出萄1个糖大醛肠酸菌群细菌 菌的种最小大水肠样菌容群积；土壤大>1肠0-杆2 菌 酶方法评β－价半：乳发糖酵苷法酶耗时β长－、葡滤萄膜糖法醛不酸适酶于混浊 产度 细物高 菌的；黄水来色样源的、不邻结 单硝果 一基可 ；苯能 不发不 能荧准 指光确 示的病、化毒不合能物指示水中
极不清洁水体
大于105 CFU /mL
报告方式：
<100报告实有数字； >100采用两位有效数字， 菌落计算方法 余者四舍五入； 有效菌落：无片状无菌法落计的算平时皿，；注若明片稀状释菌倍落数不到培养
皿一半，而另一半分布又在均匀最，大可稀以释半度皿平计板数再上乘，2任 代选若有表择两全平个皿 均稀菌释落度数均在符30合～，30按意的0之两数菌间者其落进菌中数行落2，计总个算求数平出之板比每1来ccmm决22定内中， <2报告平均数，>2则报告平较均少菌的菌落落数总，数乘以皿底面 若均大于300（小于30），积按6稀3.释6c度m最2，高再（低乘）其的稀平释 均菌落数乘以稀释倍数报告 倍数作报告
所有稀释度均不在30～300之间，以最接近的报告
粪便污染指示菌及其检测
粪便污染指示菌的理想条件：
➢ 是人畜粪便中的正常菌，且数量较粪便中 其他菌为多
➢ 受人畜粪便污染的环境中可检出，而未受
污染环境无该菌存在
大肠杆菌
➢
排出至环境后，该菌存活时间产与气肠荚道膜致杆病菌 菌相当或略长 大肠菌群 柠檬酸盐杆菌
品镜红检亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基上，
1 注➢品意3红编亚号硫，8酸37（钠℃1培51管8养法基24）h：7 紫红（2色7 5，管具法4金3）属光120
2
复泽发；7酵深试红验色13：，挑不取带27镜或检略G带8 -无金芽属3孢光1 杆泽菌；5的1淡其红中161
3 余心2色/113较菌深落1，8 接种3于8 含单9料乳糖36蛋白胨60 培养230