第二讲 食用菌液体菌种生产

5、污染更少

采用固体菌种进行食用菌生产，栽培袋 的污染率大都在8－10％。而采用液体菌种 接种后6小时萌发，24小时菌丝布满培养料 面，菌种萌发速度超过杂菌生长速度，没 有杂菌污染。
6、操作更简便

固体菌种生产需重复备料、拌料、装瓶 （袋）、灭菌、接种、养菌，而液体菌种 整个生产过程都是在一个罐体内完成，按 键操作，既成倍降低了生产、管理费用， 又节省人工，轻松制种。
接种后6小时萌发，24小时菌丝布满 培养料面，菌种萌发速度比杂菌快， 因此没有杂菌污染机会
采用液体菌种，栽培袋养菌时间仅 为15天左右
采用液体菌种菌龄短，出菇整齐， 比采用固体菌种的上市早
用液体菌种制做菌种，菌丝洁白粗 壮，同样获得好效益
液体菌种为工厂化标准化全年候生 产食用菌打下了良好的基础


摇床培养的液体菌种数量较少，一般只适 用于固体菌种的接种。也可作为发酵罐种 源，或接种于三角瓶内，每瓶接种菌液10 毫升，继续进行摇瓶培养。因菌丝球正处 于旺盛生长状态，菌丝球分散性好，能缩 短摇瓶培养时间，快者2天即可终止培养。 液体菌种在4℃左右温度下可保存1～2个月， 在15～20℃室温下可保存7～10天，使用时 对接种成功率、产量均无不良影响。
四、 液体菌种生产流程

工艺流程图： 空气压缩→过滤 ↓ 配料→装罐→灭菌→冷却→接种→ 培养→液体种 ↑ 试管斜面种→ 三角瓶颗粒种
液体菌种培养基的主要原料是土豆、 麦麸、玉米粉、黄豆粉等
液体菌种没有“级”的分别，制种 时间平均3天左右
液体菌种的接种采用接种枪，两人 配合每小时可接800袋以上


用液体菌种生产杏鲍菇生物学效益可达 80%-100%，头潮菇产量可提高17%，总 产量提高4.25%，由于产菇集中，利于市场 销售。 此外，液体菌种的应用，使栽培周期缩短， 因而可增加栽培批次，提高菇房的利用率， 其效益是使用固体菌种所无法比拟的。
六、液体菌种使用方法

1. 用于原种或栽培种生产 液体菌种可 以作为母种和原种使用。就目前国内现有 水平来说，用深层发酵方法大规模生产液 体菌种还有困难，大多用摇瓶培养或小型 通气发酵方法生产，以液体菌种代替母种 较为理想。用液体菌种制出的原种，生活 力强，上下菌龄一致，用于接种栽培种， 定植快，污染率低。用摇瓶方法培养液体 菌种，周期短，可连续多次扩大培养(一般 不超过5代)，对生长速度、菌种质量均无 不良影响。
三、液体菌种生产的关键技术

1、溶氧量 液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量， 因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其 中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体 （水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培 养液的接触面积、渗透压有很大的关系。 因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些 问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。
食用菌专题
第二讲 食用菌液体菌种生产
河南科技大学林学院 吴祖峰

传统菌种生产工艺，一般是由试管母种扩 繁成二级种、三级种，生产周期长、污染 率高、成本高、需大量人工、管理困难。 液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖 快的特点，接种到培养料内有流动性好、 萌发点多，发菌迅速等特种点。
一、液体菌种八大优势
七、 应用领域

1.液体菌种的科研、生产、制种和工厂化的大规 模生产单位； 2.用于多种微生物的培养; 3.含食用菌活性成分的保健食品生产； 4.各种奶制品的活性因子生产; 5.生产菌丝体,提取生物活性成分来生产各种食品 添加剂; 6.微生物发酵工程来制取农药、医药、激素等； 7.适用于科研单位、菌业公司、工业企业和从事 食用菌栽培人员的菌类生产。


杏鲍菇需要较丰富的碳源和氮源，特别是 氮源越丰富菌丝生长越好，产量也越高。 配方是：木屑65%、棉籽壳10%、麦麸 23%、石膏1%、石灰1%。

水分：在栽培杏鲍菇菌丝生长阶段，要求 空气相对湿度60%左右，子实体形成和发 育阶段要求相对湿度在85%-90%。子实体 发育和生长阶段，水分管理极为重要。初 期菇房相对湿度要保持在90%左右，而当 子实体发育期间和接近采收时，湿度可控 制在85%左右，这样有利于延长子实体的 保质期。不要把水喷到菇体上，特别在气 温升高时，容易使子实体发黄，严重时还 会感染杂菌，造成腐烂，影响产量和质量。

液体菌种接种的培养液的培养温度一般控





制在24～26℃，培养时间72～96小时。培 养结束后，因菌种不同，培养液出现不同 色泽。 平菇、金针菇的培养液呈浅黄色；香菇、 猴头的培养液呈棕色； 而蜜环菌则会有荧光现象； 木耳的培养液呈青褐色、粘稠、有香甜味。 若出现培养液混浊，并伴有腐败及酸味， 多为细菌性污染所致。 液体菌种需镜检后方可应用于生产。
5、环境

如前所述，环境对菌种生产影响很大，过 滤器本身不可能把杂菌百分之百地滤掉， 减少环境中的杂菌基数是非常重要的，液 体菌种母种接入到经灭菌的培养液中只要 能形成对杂菌的生长优势就可以抑制杂菌 感染，也就是说，液体菌种培养不是建立 在绝对无菌的前提下相反是建立在相对无 菌的前提下。就此意义上说，保持环境清 洁，减少空气中杂菌基数，对于提高菌种 培养成功率意义较大。

1、工艺更简便 固体菌种的生产工艺为一级试管种→二 级原种→三级栽培种，而液体菌种则没有 级的分别，也就是说液体菌种既可以做为 母种接原种，也可以做为原种或栽培种直 接接栽培袋，简化了生产工艺。
2、菌种更纯

生产固体菌种频繁扩接转代，生产中烟 薰火烧，使菌丝活力大大降低，极易造成 污染。而液体菌种生产需经过筛选、提纯， 属纯菌种；在生产过程中设备封闭运行， 属纯培养。这样高纯度的菌种，固体菌种 怎能与之相比呢？
五、液体菌种的摇瓶培养

液体菌种的摇瓶培养，其主要设备是摇床(摇瓶机)， 有往复式和旋转式两种。将液体培养基装入500毫升 三角瓶内，每瓶装量为100毫升，加入15粒左右的小 玻璃珠或小块的玻璃碎片，用棉塞封口后置1.5千克 压力下灭菌30分钟，取出冷至30℃时接种。每瓶接 入1.5～2平方厘米的斜面菌种一块，让其悬浮于液 体培养基表面且使菌丝朝上，在适温下静置培养48 小时。当菌丝长至液体培养基中时，置摇床上进行 振荡培养。往复式摇床振荡频率为80～100次／分， 振幅6～10厘米；旋转式摇床偏心距为4厘米，振荡 频率为150～220转／分。旋转式摇床因旋转速度过 快，菌丝球一般较大，且菌丝球表面绒毛状菌丝少， 一般不能用作菌种。
7、出菇整齐上市早

采用液体菌种的产品可以比采用固体菌 种的早上市2个月以上，早上市与晚上市在 效益上差的可就大了。此外，采用液体菌 种的栽培袋菌龄短，出菇整齐一致，适合 出口要求，在价格上占优势。
8、适宜工厂化标准化全年候生产
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采用固体菌种袋内菌丝菌龄不一致，加 之受自然条件的制约，需多潮出菇多茬管 理，有的没出完菇还要越夏或越冬管理。 而采用液体菌种养菌时间短，出菇集中， 适合工厂化、标准化全年候生产，代表产 业发展方向。



温度：杏鲍菇菌丝生长最适宜的温度25℃左右， 原基形成的最适温度是10-15℃。子实体发育的温 度因不同菌种而异，一般适温为15-21℃。 光线：杏鲍菇菌丝生长阶段不需光线，子实体形 成和发育需要散射光。 通风：杏鲍菇菌丝生长和子实体发育都需要新鲜 的空气，但在菌丝生长阶段，瓶（袋）中积累的 二氧化碳对菌丝生长有促进作用。随着菌丝的生 长，培养料中的菌丝排出的二氧化碳逐渐增多， 使培养料中二氧化碳浓度上升，能明显地刺激菌 丝的生长。雨天时，子实体生长阶段还要求加大 通风量。当气温上升到18℃以上时，在增加喷水 降低温度的同时必须增加通风，避免高温高湿， 造成子实体腐烂。
二、液体菌种设备基本原理

任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、 湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂 菌感染。在深层发酵技术上称之为选择性发酵技 术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是 生物菌群发酵技术。 液体菌种发酵设备包括四大系统，温控 系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气 压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系 统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射 流器、提升管等组成。
2、空气过滤

技术的关键就是保证进入的空气无菌度高， 因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。 一般细菌直径在0.5-5um,酵母菌在1-10um， 病毒一般在20-400mu，所以选择过滤膜时 应综合考虑以上因素。当然如果选的太小， 成本将大幅度提高。另外环境对于空气影 响很大,在空气压缩机房、制种车间必须保 持环境清洁。


2. 用于砖状菌种生产 在棉籽[BFQ]壳等 培养料内，按50%～100%的量加入液体菌种， 拌匀后，装入消毒的纸盒、木箱、塑料箱 内，用塑料薄膜包好，3～7天菌丝充分发 育连接成菌块，作为栽培种使用。可用于 平菇、凤尾菇、金顶蘑生产，不适用于香 菇、黑木耳。




3. 用于菌床播种 床栽：适用于平菇、凤尾菇、香菇栽培，每平方 米用菌液300～1000毫升，常用量为500毫升，以 穴播法最好，条播次之，撒播最差，将穴播与撒 播结合效果最好。栽培平菇、凤尾菇20天菌丝满 床，20～25天可以出菇，香菇压块栽培，在播种 后40天出菇。 袋栽：将液体菌种由袋口注入或用混播法拌料。 液体菌种用量为30%～50%，播种后一般26～35天 出菇。 瓶栽：每千克干料用100毫升液体菌种，栽培平 菇、凤尾菇、草菇、猴头、木耳等，15～25天菌 丝满瓶。

配料时先将土豆去皮切片，与麸皮混合后 用不锈钢锅煮熟并取汁，在将辅料KH2PO4、 MgSO4等溶入，混匀后装入罐中加热，至 121.3℃并维持40分钟左右进行灭菌，灭菌 结束后用冷水冷却至培养温度，而后将并 瓶后的三角瓶种接上进行培养，培养时根 据不同的菌种，设定适宜的温度。

培养期间应注意观察，并做好记录。包括 温度、压力、气流量、排出气体的气味等。 如遇到停电，排气阀自动关闭或人工关闭 来保持罐中处于正压状态。来电后重新启 动，并打开排气阀继续培养。培养过程中， 可随时无菌操作采样分析，几天后待菌球 密度合适（从视镜观察）即可接种。
3、周期更短

采用固体菌种，从制种到出菇一个周期 下来至少需要4－5个月，甚至半年多。而 采用液体菌种从制种到菌丝长满栽培袋只 需15天左右的时间，从制种到出菇大部分 品种只需1个月，整个生产周期一般也就是 两个月。
4、成本更低

以前采用固体菌种的栽培户都知道，无 论使用二级种还是三级栽培种生产栽培袋， 菌种所占的成本都在1角钱以上，而用液体 菌种无论是生产栽培种还是栽培袋，其菌 种成本就2－3分钱，您说哪个更划算？
八、用液体菌种栽培杏鲍菇

用液体菌种培养器生产一批菌种仅需3 天，是使用固体菌种周期的1/10。由于液 体菌种具有流动性，因而接入的菌种可流 散在不同的部位萌发生长。接种后6小时左 右即可看到菌种萌发变白，24小时就可吃 料生长，使杂菌没有浸染机会。在25℃的 条件下，养菌18天-20天即可长满袋，生长 期是使用固体菌种的50%。
3、培养液

培养液是菌丝生长发育的营养源，要求营 养全面均衡。不同的菌种对营养要求偏重 不同。配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、 硫酸镁、维生素、蛋白胨、土豆汁、酵母 浸膏等。配置培养液时，先将土豆片、麸 皮一起煮熟，将汁液滤出，后加入其它辅 料混匀即可。
4、接种

培养器上端有接种口，也是装料口，将母 种并瓶后加入抑菌剂，而后必须在火焰圈 的保护下倒入罐体内，要求动作快、操作 准确。