高通量筛选技术教程

结合抗体芯片技术、多路测定技术 (multiplexing) 等新的检测方法,高通量细胞 筛选的应用更为广泛。另外,随着荧光成像读 板仪(fluorescence image plate reader ,FLIPR) 、定量PCR、高通量荧光激活细胞分类器 (HT-FACS) 等检测方法和技术的不断发展和 应用,灵敏度和重现性这两个高通量细胞筛选 的关键问题也逐步得以解决。
二、高通量筛选技术常用方法

高通量细胞筛选技术(high-throughput cell-based screening technology) 是以高通量方式研究基因功 能最有效的方法之一。通常,基因功能的初步筛选 在96 孔或384 孔板上进行,通过基因转染将候选基 因导入细胞,或直接将基因表达产物加入细胞培养 液中。
多功能酶标仪（多功能微孔板检测仪）
微孔板检测设备之一，集成4大功能模 块，可进行放射性/非放射性检测。
流式细胞仪
C6 流式细胞仪系统是一种全功能、双激光、六探测器 的流式细胞仪分析系统， C6流式细胞仪系统的探测器 不但可灵敏的捕获前散射光和旁散射光，还有四个可 调光学滤光片的荧光探测器。CFlow操作软件使搜集 数据和分析变的简单快速。高集成度、高度自动化的 主机，以及优良人机界面、操作简便的CFlow软件系 统
数据分析系统


SAS（Statistical Analysis System，统计分析系统） 是当今国际最著名的数据分析软件系统。 SAS：数据的输入输出和整理、描述性统计、假设 检验、图形的制作、回归分析、多元统计分析、方 差分析、协方差分析和时间序列分析等 。 数据访问，数据管理，数据呈现，数据分析 SPSS EXCEL
是20世纪80年代后期发展起来的一种筛选新技术。它集计 算机控制、自动化操作、高灵敏度检测、数据结果自动采集和 处理于一体，实现了筛选的快速、微量、灵敏和大规律，日筛 选量达到数万甚至数十万样品次，是筛选技术和方法的一大进 步。

筛选测定方法基于要研究的生物学或医学问题,例 如,要研究抗血管生成活性,选用内皮细胞进行细胞 生长、分化、迁移和粘附等分析测定;研究免疫调 节活性,可选择淋巴细胞或造血细胞进行细胞生长 和分化的分析测定;研究神经营养因子活性,可选用 神经细胞进行细胞存活、突起生长测定。除上述与 细胞表型或形态学相关的检测指标外,细胞信号转 导通路、糖代谢、能量产生和代谢产物分析 (metabolic control analysis) 等代谢通路也是基因 功能重要的研究内容。
目前世界各大药物生产商都建立有自己的化合物库和高通量筛选
机构，对有潜力形成药物的化合物进行篦梳式的筛选。
我国药物高通量筛选起步较晚，且不规范，仅有十多年的研究历史。
1996年中国医学科学院引进国内第一台Bionek2000型实验自动化工 作站；
1998年又引进全国第一台Topcount微量闪烁计数器，使放射配基实
验、放射免疫实验等技术微量化、自动化。 上海药物研究所、北京军事医学科学院分别成立了药物筛选专门机构，
开始从事大规模筛选工作。
西安交通大学药学院贺浪冲教授首创的细胞膜色谱（CMC）为化合物 的体外高通量筛选提供了高选择性、高特异性、高效率的筛选手段。CMC
已成功用于钙离子拮抗剂受体配体结合反应的研究，目前正在进行心血管化
高 通 量 平 行 合 成 仪
高通量平行合成仪
液相芯片检测仪
微 孔 过 滤 板
12通道药物筛选仪
国家新药筛选中心
条形码技术
条形码(barcode)是将宽度不等的多个黑条和空白，按 照一定的编码规则排列，用以表达一组信息的图形标识 符。常见的条形码是由反射率相差很大的黑条（简称条） 和白条（简称空）排成的平行线图案。条形码可以标出 物品的生产国、制造厂家、商品名称、生产日期、图书 分类号、邮件起止地点、类别、日期等许多信息，因而 在商品流通、图书管理、邮政管理、银行系统等许多领 域都得到了广泛的应用。
多通道移液器
连续移液器
一次性吸取 大量液体， 然后每次按 动按钮，仅 仅释放小量 等体积的液 体。大量液 体进行等体 积分装
215全自动移液工作站
1.大容量，可自动处理12个96孔反应板或480个试管的样品。 2.特别适合于HPLC或LC/MS的样品处理。 3.使用709软件，有易用的图示管架编辑器。 4.无论开口试管或密封试管都有很高精确度。5.Micro215进样量可低至0.5ul。 6.多通道215自动样品处理系统可同时处理8个样品。
学合成药物的高通量筛选和中药有效部位及有效成分的寻找。今年将建立 CMC自动化筛选体系，促进我国药物高通量筛选技术的全面发展 。
概念

高通量筛选(High throughput screening，HTS)技术 是指以分子水平和细胞水平的实验方法为基础，以 微板形式作为实验工具载体，以自动化操作系统执 行试验过程，以灵敏快速的检测仪器采集实验结果 数据，以计算机对实验数据进行分析处理，同一时 间对数以千万样品检测，并以相应的数据库支持整 体运转的技术体系。
一、高通量筛选常用Biblioteka Baidu器设备
Whatman过滤型做孔板是种多孔形状物体，便于快速和 批量处理样品。板上刻有号码适合于各种微孔板配用仪 器和白动控制装置。
Boekel 微孔板振荡器的特点 独立设定温度，振荡速度和混合时间； 混匀器可以编程设定运行一定时间或者瞬时混合3秒； 内置的盖可以减少污染，样品挥发或者噪音的危险。
高通量筛选技术
High throughput screening
王 陶
2012年2月
高通量筛选最初是伴随组合化学而产生的一种药物筛选方式。
1990年末，组合化学的出现改变了人类获取新化合物的方式，人 们可以通过较少的步骤、在短时间内同时合成大量化合物，在这样的 背景下高通量筛选的技术应运而生。
高通量筛选技术可以在短时间内对大量候选化合物完成筛选，经 过近十年的发展，已经成为比较成熟的技术，不仅仅应用于对组合化 学库的化合物筛选，还更多地应用于对现有化合物库的筛选。