华中农业大学学士学位论文封面

本科毕业论文题目稻曲病菌对戊唑醇的室内抗性筛选

In vitro adaptation to tebuconazole in

Ustilaginoidea virence strains

姓名黄进学号060801024

专业动植物检疫

指导教师罗朝喜职称教授

中国·武汉

二○一○年六月

分类号密级华中农业大学本科毕业论文

稻曲病菌对戊唑醇的室内抗性筛选In vitro adaptation to tebuconazole in Ustilaginoidea

virence strains

学生姓名：黄进

学生学号：060801024

学生专业：动植物检疫

指导教师：罗朝喜教授

华中农业大学植物科学技术学院

二○一○年六月

摘要..........................................................................................................................................II Abstract...................................................................................................................................III 关键字.....................................................................................................................................III 1 前言 (1)

1.1 稻曲病菌 (1)

1.2 戊唑醇 (3)

1.3 病原菌室内抗性筛选 (5)

2 材料与方法 (5)

2.1 试验材料 (5)

2.2 实验内容 (5)

2.3实验结果与分析 (5)

2.4 讨论 (8)

参考文献 (9)

致谢 (9)

附录 (10)

稻曲病的发病面积逐年增加，为害日益加重，已成为水稻主要三大病害之一。戊唑醇通过抑制真菌中麦角甾醇的生物合成对稻曲病有很好的防治效果。本文主要是用戊唑醇对稻曲病菌的两种生理小种进行了室内抑菌活性测定。将两种生理小种在不断提高浓度梯度的戊唑醇PDA培养皿中培养，直到其抗性无法得到增强。然后在PDA培养皿中继续转接5代，测量原始菌株、转接16代的对照菌株、驯化菌株以及再度转接5代的菌株的EC50，看其抗性是否得到保持。

关键词

戊唑醇；水稻稻曲病；抗性

AS the area of rice incidenced by Ustilaginoidea oryzae (Patou.) Bref increased year by year，and the damage is increasing，it has become one of the three major diseases of rice.Tebuconazole effects on inhibiting biosynthesis of ergosterol that has great control effect on Ustilaginoidea oryzae (Patou.) Bref. WE mainly have indoor Antifungal activities on two races of Ustilaginoidea oryzae (Patou.) Bref with tebuconazole.Two races were rasied concentration gradient in PDA plate with tebuconazole in rasing concentration gradient，until their resistance can not be enhanced.Then continue to divert for 5 generations in PDA plate，measure the EC50 of original strain、control strain and domesticated strains treated after16 generations、the strain re-switched for 5 generations to see whether the resistance have been maintained

Key words

tebuconazole；Ustilaginoidea oryzae (Patou.) Bref ；resistance

1 前言

杀菌剂对植物病原菌的抑菌活性测定是研究杀菌剂的基础。通过室内活性测定可以明确杀菌剂的作用效果及抑菌谱。戊唑醇由于杀菌活性高等特点,目前已经在市场上大量使用。但是抗药性问题的出现影响着杀菌剂的发展。室内对病原真菌进行抗性筛选,可以模拟出田间病原菌对杀菌剂的抗药性发展动态,对杀菌剂进行抗药性风险评估,为田间科学合理的用药提供理论指导。

1.1稻曲病菌

稻曲病又称伪黑穗病、绿黑穗病、谷花病、青粉病,是一种由病原真菌引起的后期谷粒病害,通常在晚稻上发生,多发生在水稻收成好的年份,使农民误以为是丰收的象征,俗称“丰产果”,在全国各稻区均有发生。20世纪80年代之前,该病零星发生,属次要病害;90年代以来,由于密粒直立型超级稻和优质水稻品种的大面积推广,单季稻熟制的扩大,施肥水平偏高和不合理,尤其是单季稻孕穗期多雨适温的频率较高,稻曲病的发病面积逐年增加,为害日益加重,已成为水稻主要三大病害之一。稻曲病的发生,会造成水稻大面积空秠率增高,既不利于晚稻高产,又严重影响稻米的质量,且稻曲病病菌还会产生毒素,对人畜有不良影响。该病只发生于穗部,为害部分谷粒。受害谷粒发病初期外观与健康谷粒误明显区别,在水稻齐穗3~5D内可显症,病菌早期侵害子房,花柱及柱头,后期侵入幼嫩颖里的外表皮,蔓延到配孔中,然后大量繁殖并形成子座。发病时,病菌首先在谷粒内部生成小菌核,形成菌丝块并逐渐膨大,内外颖裂开,露出淡黄色块状物,即孢子座,后包于内外颖两侧,比健康谷粒大3~4倍,形成近球形病粒,呈黑绿色,初外包一层薄膜表面光滑,后显粗糙龟裂,散发生墨绿色粉末,即病菌的厚垣孢子,使水稻结实率和干粒重下降,俗称“灰包”。一般每穂有病粒1~5粒,严重的可达20~30粒。有的两侧生黑色扁平菌核,风吹雨打易脱落。（吴格娥,2000；杨洵,2007；章方海,2006）

病原Ustilaginoideavirens(Cooke)Tak.称稻绿核菌,属半知菌亚门真菌。分生孢子座6-12×4-6(μm),表面墨绿色,内层橙黄色,中心白色。分生孢子梗直径2-2.5(μm)。分生孢子单胞厚壁,表面有瘤突,近球形,大小4-5(μm)。菌核从分生孢子座生出,长椭圆形,长2-

20mm,在土表萌发产生子座,橙黄色,头部近球形,大小1-3mm,有长柄,头部外围生子囊壳,子囊壳瓶形,子囊无色,圆筒形,大小180-22μm,子囊孢子无色,单胞,线形,大小120-

180×0.5-1(μm)。厚垣孢子墨绿色,球形,表面有瘤状突起,大小3-5×4-6(μm)。有性态为ClavicepsvirensSakurai称稻麦角,属子囊菌亚门真菌。（王云川,2006）

1.2.1传播途径和发病条件

(1) 大量病原菌存在

病菌主要以菌核在土壤中越冬,也可以厚垣孢子在被害谷物内或健康谷粒颍壳上越冬。翌年7~8月份,当菌核和厚坦孢子遇到适宜条件时,即可萌发产生子囊孢子和分生孢子,随气流和水流传播,落到水稻植株上,在水稻破口时倾入花器和幼颖,由厚垣孢子再生小孢子及子囊孢子进行初侵染。连作地块时间长,有效菌原积累多,发病率高。(2) 品种抗性差

杂交稻重于常规稻,粳稻重于糯稻,大穗型,破口抽穗期长的品种发病重。

(3) 气候原因

气温24-32℃病菌发育良好,26-28℃最适,低于12℃或高于36℃不能生长。抽穗扬花期遇雨及高温,特别是在阴雨天发病重。

(4) 栽培原因抽穗早的品种发病较轻。

(5) 施肥