中药复方苦参洗剂中氧化苦参碱含量分析

中药复方苦参洗剂中氧化苦参碱的含量分析[摘要] 目的：建立复方苦参洗剂中氧化苦参碱的含量分析方法。方法：采用薄层扫描法，薄层板：以硅胶g薄层板，展开剂：氯仿—甲醇—浓氨试液（4：1：0.1），显色方法：以稀碘化铋钾溶液显色。结果：氧化苦参碱在0.585~2.933μg范围内呈现良好的线性关系。平均回率为99.98%，rsd为2.66%。结论：方法准确、可靠，可用于复方苦参洗剂中氧化苦参碱的含量分析。

[关键词] 复方苦参洗剂；氧化苦参碱；薄层扫描法.

复方苦参洗剂由苦参、蛇床子、当归、防己、皂角、红花、丹参等中药材组成，具有清热凉血、祛湿止痒、消炎杀菌的功效。主要用于妇女外阴湿疹、瘙痒、霉菌性阴道炎、外阴炎、滴虫性阴道炎等均有治疗和预防作用。该制剂中成分复杂，为控制本品的内在质量，保证临床用药效果，氧化苦参碱作为本制剂中的主要成分之一，本文采用薄层扫描法测定制剂中氧化苦参碱的含量[1~4]，作为该制剂生产的质量控制标准。

1仪器与材料

1.1仪器

日本岛津cs-9000型双波长薄层色谱扫描仪；定量毛细管（usa，drummond scientificco.）；双槽层析缸；h54ar电子分析天平（瑞士mettle）；939型薄层铺板仪（重庆南岸贝尔德仪器厂）；薄层数码成像系统。

1.2材料

复方苦参洗剂及所用药材均由本医院制剂室提供的999单味中药配方颗粒（深圳市三九现代中药有限公司生产），氧化苦参碱对照品由中国药品生物制品检定所提供；薄层层析硅胶g（烟台市化学工业研究所生产）；所用试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1薄层层析及薄层扫描条件吸附剂：以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶g薄层板。展开剂：氯仿—甲醇—浓氨试液（4：1：0.1），预饱和15~30min后上展开。显色剂：以稀碘化铋钾试液至显色均匀清晰。单波长锯齿扫描，测定波长为505nm；狭缝为1.5mm*1.5mm；sx=3，灵敏度中等。

2.2溶液的制备取已在干燥器中保存24h的氧化苦参碱对照品适量，精密称定，加盐酸--甲醇（1：100）液制成每1ml含0.5mg的溶液作为对照品溶液。

取本品溶液40ml，分别倾取上清液，混合，精密吸取25ml于蒸发皿中，水浴蒸发近干，迅速用盐酸--甲醇（1：100）液，少量多次，溶解并定量转移溶解部分于10ml容量瓶中，用盐酸--甲醇（1：100）液稀释至刻度，作为供试品溶液。

2.3稳定性试验取氧化苦参碱对照品溶液与样品溶液各4ul，交叉点于同一块硅胶g薄层板上，展开，显色后，分别于0、30、60、90、120min进行扫描测定，记录峰面积，薄层显色在2.0小时内对照品与样品较稳定（rsd=1.92%，n=5）。

2.4线性关系分析用定量毛细管吸取上述对照品溶液1、2、3、

4、5μl，点于同一薄层板上，按设定条件展开，显色后置扫描仪上进行测定。以对照品含量为横座标，以斑点峰面积值为纵座标，绘制标准曲线，求得回归方程：y=36898.9x+5376.5，r=0.9996。结果表明0.585~2.933μg之间点样量与峰面积积分值范围内呈现良好的线性关系。

2.5精密度试验分别吸取同一浓度的对照品溶液与样品溶液分别点于同一硅胶g薄层板上，按上述色谱条件展开、显色、扫描测定，结果对照品斑点峰面积值的rsd=2.29%，样品斑点峰面积值的rsd=1.81%。

2.6重现性试验取同一批样品5份（批号20110425），按上述设定条件测定，其平均含量为0.1615mg/ml，rsd=2.5%。说明该方法的重现性良好。

2.7回收率试验采用加样回收试验，5次测定的平均回收率为99.981%rsd=2.66。

2.8样品含量测定分别精密吸取上述供试品溶液2、4ul，对照品溶液2、4μl，交叉点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶g薄层板上，依上述方法测定样品含量，结果见表1。

表1复方苦参洗剂的含量测定结果

3小结与讨论：

1、本制剂在建立本含量分析方法的过程中，经过相关根据文献资料查阅，制剂中的主要成分氧化苦参碱对样品与对照品的扫描图谱一致，均在505nm处有最大吸收，单波长及双波长锯齿扫描图一

致，背景均无干扰，为了节约时间，提高效率，选用单波长锯齿扫描。

2、在复方苦参洗剂所含生物碱的提取过程中，曾先进行碱化，再用有机溶剂萃取，结果发现乳化现象严重，回收率不好。经过多种方法尝试，选用将样品蒸发近干，残留物未变干硬时，迅速用盐酸--甲醇（1：100）液少量多次，边搅拌研磨，边将溶解部分倾取出来的办法。

3、在对制剂中药材成分苦参进行薄层层析的过程，曾按照《中国药典》（2010年版）记载的层析条件展开，分离虽好，但斑点不够集中，不利扫描测定。本文选用碱性展开剂，从试验结果表明，该方法排除了非生物碱成分的干扰，简单快捷，重现性好，专属性强，为液体制剂中生物碱含量的测定方法的建立奠定了一定的基础。

4、从本文检测结果中发现，不同批号样品含量相差较大，这与所用原药材不是同一批号有关，因此，控制原药材质量与确保制剂质量有非常密切关系。

参考文献：

[1]中华人民共和国药典（一部）[s].北京：中国医药科技出版社，2010.139~140.

[2]苗明三等主编.现代实用中药质量控制技术[m].北京：人民卫生出版社，2002.890.

[3]中华人民共和国卫生部药典委员会.部颁标准

ws3-b-2808-97《中华人民共和国卫生部药品标准》（中药成方制剂第十二册），1997.6.

[4]康廷国主编.中成药薄层色谱鉴别[m].北京：人民卫生出版社，1995.