《重组结核杆菌融合蛋白(EC)临床应用专家共识》(2020)要点

《重组结核杆菌融合蛋白（EC）临床应用专家共识》（2020）要点

结核分枝杆菌（MTB）感染和菌阴肺结核的准确诊断是结核病防控的两个难点和重要问题。重组结核杆菌融合蛋白（EC）是通过基因工程方法表达MTB特异的ESAT-6和CFP-10两种蛋白的融合蛋白，这两种蛋白在卡介苗菌株中缺失，可诱导特异的迟发型变态反应(DTH)以鉴别MTB感染状态。在传染病国家科技重大专项支持下自主研发的EC，已作为新型MTB 感染皮肤试验的检测试剂通过了国家药品监督管理局药品审批而准予上市在当前我国结核病疫情防控形势下，EC对MTB感染和菌阴肺结核的诊断具有重要的应用价值。

一、全球结核病疫情形势

结核病是由MTB感染引起的慢性传染病，严重威胁人类健康，位列全球十大死因之一，是单一传染病中的头号杀手。中国是结核病高负担国家之一。研究结核感染诊断新技术、新方法对加速结核病疫情下降、实现终止结核病目标具有十分重要的意义。

二、结核感染与发病

LTBI的定义是一种对MTB抗原刺激具有持续免疫反应的状态，但没有活动性结核病的临床表现证据，有时也叫结核感染。LTBI没有病原学诊断依据，只能通过检测机体的免疫反应来诊断。《中国结核病预防控制工作技术规范（2020年版）将结核感染检测和预防纳入结核病预防治疗的重要内容。

结核病诊断的另一个瓶颈是菌阴肺结核的诊断，而儿童结核病多表现为菌

阴肺结核。我国发布的《WS288-2017肺结核诊断》中，将TST、IGRA 和血清抗体检测都纳入了肺结核辅助诊断的方法,其目的是通过提供结核感染证据提高菌阴肺结核的诊断水平。EC是主要针对解决LTBI诊断和菌阴肺结核的辅助诊断等问题而研发的新产品。

三、现行结核感染的免疫学检测方法

（一）TST

TST是基于型DTH的一种皮肤试验%常用的反应原是纯蛋白衍生物(PPD)。我国1979--2000年进行的4次全国结核病流行病学调查都采用TST作为儿童结核感染筛查的手段。由于PPD有200多种抗原成分，与卡介苗和非结核分枝杆菌（NTM）有大量相同或相似的抗原成分,导致TST 很容易发生交叉反应。因此，TST出现假阳性的可能性较大,特别是在非结核分枝杆菌（NTM）的高流行地区。

(二)IGRA

机体感染MTB以后，血液中存在着特异的效应K淋巴细胞。当机体再次接触MTB特异性抗原时，效应K淋巴细胞将特异性地产生和分泌γ干扰素(IFN-γ)通过定量检测释放的IFN-γ的水平或计数,来判定患者是否存在LTBI。由于其特异度较高，在临床菌阴肺结核和肺外结核的个体确认方面具有较高的应用价值。

(三)抗原抗体检测

该方法也已纳入我国《WS288-2017肺结核诊断》,作为菌阴肺结核的辅助诊断

技术。

四、EC临床试验研究

（一）EC的生物学特征

（二）EC制剂成分

（三）EC临床试验研究设计

（四）不同方法检测的阳性结果判断标准

五、EC临床试验研究结果

（一）健康人群流行病学筛查的阳性检出率

（二）结核感染的敏感度试验

（三）结核感染阴性结果的一致性检验

（四）卡介苗接种后诊断结核感染的特异度试验

（五）非结核性其他疾病患者的阴性符合率

六、EC的临床应用建议

（一）使用对象

EC皮肤试验结果不受卡介苗接种的影响，适用于结核感染和辅助结核病的临床诊断。按照说明书推荐，适用于≥6月龄婴儿、儿童及<65周岁成人。

（二）使用方法

1. EC单独使用：

2. EC与PPD联用：

（三）结果判读和临床意义

1. 单独使用EC检测结果的临床意义：见表2。

表2 单独使用EC检测结果的临床意义（检测结果//临床意义）

- // 未感染MTB

+ // 感染MTB

2. 同体双臂使用EC及PPD检测结果的临床意义：见表3。

表3 同体双臂使用EC及PPD检测结果的临床意义（PPD检测//EC检测//临床意义）

- // - // 未接种卡介苗或卡介苗接种后阴转；且未感染MTB

+ // - // 卡介苗接种后,维持阳性；未感染MTB

+/- // + // 感染MTB

（四）使用范围

1. LTBI筛查和流行病学调查：（1）结核病患者密切接触者（家庭、学校、医疗机构、社区、聚集性疫情等）的LTBI筛查。(2)在结核病高风险人群、重点人群[HIV感染人群、肿瘤坏死因子（TNF）拮抗剂使用人群、器官移植人群、血液透析人群、尘肺人群、糖尿病患者、风湿病患者、羁押人员、流浪者、外来务工人员、社区中老年人群、其他免疫力低下人群等]中的LTBI筛查。（3）全人群中LTBI的流行病学调查。

2. 肺结核和肺外结核的辅助诊断： EC检测的特异度高，对肺结核和肺外结核的辅助诊断具有较好的参考价值。因操作快速简便，适宜于各级医疗卫生机构开展肺结核诊断和鉴别诊断使用，提高肺结核诊断的准确性。

3. EC在预防性干预技术路径中的应用价值：通过联用EC与PPD，可以根据皮肤试验结果区分人群的MTB感染状态，解决了当PPD阳性时无法区分阳性是由于接种了卡介苗还是感染了MTB的弊端；这在结核病的预防人群分类中有较好的作用。这些人群包括卡介苗接种后仍然维持阳性

者、阴转者和LTBI者。对结核病高发的卡介苗接种地区进行LTBI的筛查,需要简单易行的方法将结核病预防目标人群精准区分，为构建完整的结核病免疫预防治疗体系提供科学依据、创造可行性。

不同人群的结核感染状态不同，可通过 EC+PPD的联合检测结果加以区分：（1）EC结果呈阳性、PPD阳/阴性者，将可通过化学药品预防和/（或）使用已获批用于治疗LTBI的疫苗进行预防，防止结核感染者进一步发展成结核病；（2）对于EC结果呈阴性且PPD阴性者，使用成人卡介苗进行预防；（3）对于EC结果呈阴性且PPD阳性者，使用加强免疫用疫苗防止再感染MTB图(1)。

七、展望

EC作为新型MTB感染皮肤试验的检测试剂，在人群中使用具有良好的安全性，诊断结核感染的敏感度和特异度均较高%检测技术成本较低)操作简单，可用于LTBI和菌阴肺结核的诊断。EC具备了其他结核感染检测方法的优点，同时作为一种皮肤检测试剂，不仅降低了LTBI筛查和流行病学调查的成本，而且易于在基层推广，这对结核病的控制有重大意义，在预防性干预技术路径中具有广阔的应用前景。EC上市是中国结核病防控体系的一个重大突破。但EC作为新产品和新技术在人群中的安全性和应用价值有待进一步观察和评估。