第十一章DNA复制RNA转录蛋白质翻译
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引发体向前移动,解开新的局部双螺旋,形成新的复 制叉,滞后链重新合成RNA引物,继续进行链的延长。
解
3.复制的终止
去除引物,填补缺口;连接冈崎片段; 在原核生物中,由DNA聚合酶Ⅰ来水解去除RNA 引物,并由该酶催化延长引物缺口处的DNA, 直到剩下最后一个磷酸酯键的缺口。在DNA连 接酶的催化下,形成最后一个磷酸酯键,将冈 崎片段连接起来,形成完整的DNA长链。
另一小片段有5‘→3’外切酶的活性。
pol Ⅲ由十种亚基组成,其中α 亚 基具有5‘→3’聚合DNA的酶活性, 因而具有复制DNA的功能;而ε 亚基 具 有 3‘→5’ 外 切 酶 的 活 性 , 因 而 与DNA复制的校正功能有关。
DNA- polⅠ和DNA- polⅡ 为修复酶, DNA- pol Ⅲ真正起复制作用的酶, 为复制酶。
DNA复制时,局部双螺旋解开形成两条单链,这种叉状结构称为 复制叉。
引发体组装:蛋白因子以及引物酶一起组装形成引发体。
引发:在引物酶的催化下,以DNA为模板,合成一段短的RNA片
段,从而获得3'端自由羟基(3'-OH)。
拓扑异构酶(又称DNA旋转酶) 拓扑异构酶Ⅰ可使DNA双链中的一条链切断,松开双 螺旋后再将DNA链连接起来,从而避免出现链的缠绕。 拓扑异构酶Ⅱ可切断DNA双链,使DNA的超螺旋松解 后,再将其连接起来。
解螺旋酶 又称解链酶或rep蛋白,是用于解开DNA双链的酶蛋白, 每解开一对碱基,需消耗两分子ATP。
单链DNA结合蛋白(SSB) 这是一些能够与单链DNA结合的蛋白质因子。其作 用为:① 使解开双螺旋后的DNA单链能够稳定存 在,即稳定单链DNA,便于以其为模板复制子代 DNA;② 保护单链DNA,避免核酸酶的降解。
3、DNA连酶
催化一条DNA链的3′末端与相邻的另一条DNA链的 5′末端之间的磷酸二酯键的合成。与同一互补链结 合并相邻。 (双链DNA切口)
条件:① 需一段DNA片段具有3‘-OH,而另一段DNA 片段具有5’-Pi基;② 未封闭的缺口位于双链DNA 中,即其中有一条链是完整的;③ 需要消耗能量。
N1N2
N3
3′ OH
+5′
DNA聚合酶
OH
5′ p p
PPP
Mg2+
γβα
DNA聚合反应的特点:
(1) 以4种dNTP为底物;
(2) DNA模板; Mg2+
(3)带3’-OH末端的引物;
(4)延长方向5’ 3’;
(5)产物DNA的性质与模板相同。
N1N2N3
5′ p
p
p
3′ OH
+P
2.DNA聚合酶
复制(DDDP)
转录(DDRP)
DNA
RNA
反转录(RDDP)
RNA
复制(RDRP)
翻译 蛋白质
一 . DNA的复制
(一)、半保留复制
DNA 在 复 制 时 , 以 亲 代 DNA 的 每 一 股 作 模 板,合成完全相同的两个双链子代DNA, 每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链, 这种现象称为DNA的半保留复制。
滞后 前导
拓扑异构酶 单链结合蛋白 解链酶 引物酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 引物
冈崎片段
前导链 3′ 5′
滞后链 3′
5′
DNA复制过程模式图
5, 3,
复制叉移动方向 解旋酶
DNA聚合酶
DNA旋转酶 ATP
ADP+Pi DNA结合蛋白 引物RNA 引物酶
NA + D NMN
HOP
ATP AMP+PPi
5′
3′
5′
3′
3′
5′ DNA 3l′igase
5′
(四)DNA的半不连续复制
•半不连续复制:双链DNA分子的两条链是反向平 行的。而DNA聚合酶的方向都是5’ 3’。当DNA复制 时,一条链是连续合成的,称前导链,而另一条在 5’ 3’方向合成小片段DNA(冈崎片段),然后通过 酶将这些片段连接起来,这不连续合成的DNA 链为 滞后链。
在原核生物(大肠杆菌)中,目前发现 的DNA聚合酶有五种,研究较多的有三种, 分别命名为DNA聚合酶Ⅰ(pol Ⅰ), DNA聚合酶Ⅱ(pol Ⅱ),DNA聚合酶Ⅲ (pol Ⅲ),这三种酶都属于具有多种 酶活性的多功能酶。参与DNA复制的主要 是pol Ⅲ和pol Ⅰ。
pol Ⅰ为单一肽链的大分子蛋白质,可被 特异的蛋白酶水解为两个片段,其中的 大 片 段 称 为 Klenow 片 段 , 具 有 5‘→3’ 聚合酶活性和3‘→5’外切酶的活性。
•冈崎用电子显微镜看到了DNA复制过程中出现一 些不连续片段,这些不连续片段只存在与DNA复制 叉上其中的一股。后来就把这些不连续的片段称为 冈崎片段。
滞后 前导
(五)DNA复制的过程(原核生物)
1、复制的起始
起始、延长、终止
由蛋白因子识别复制起始点
解旋解链,形成复制叉:
由拓扑异构酶和解链酶作用,使DNA的超螺旋及双螺旋结构解开, 碱基间氢键断裂 ,形成两条单链 DNA。单链DNA结合蛋白 (SSB)结合在两条单链DNA上,形成复制叉。
引物酶(合成RNA) 引物酶本质上是一种依赖DNA的RNA聚合酶,该酶 以DNA为模板,聚合一段RNA短链引物,以提供自 由的3'-OH,使子代DNA链能够开始聚合。
2.复制的延长
由DNA聚合酶催化,以3‘→5’方向的亲代DNA链为模 板,从5‘→3’方向聚合子代DNA链。在原核生物中, 参与DNA复制延长的是DNA聚合酶Ⅲ。
(二)、 DNA复制的起始点和方式
复制子是DNA能独立进行复制的单位。需 在特定的位点起始,可能还有终点。
在原核生物中,复制起始点通常为一个, 复制方向大多是双向的,也有单向的, 而在真核生物中则为多个复制起始点。
起点
起点
起点
原核生物DNA的双向复制
(三)、DNA聚合反应有关的酶
1.DNA聚合反应
第十一章DNA复制RNA转录蛋 白质翻译
第一节 DNA的复制与修复
DNA 是 由 四 种 脱 氧 核 糖 核 酸 所 组 成 的 长链大分子,是遗传信息的携带者。
生 物 体 的 遗 传 信 息 就 贮 存 在 DNA 的 四 种脱氧核糖核酸的排列顺序中。
DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代; 通过转录和翻译,将遗传信息传递给蛋白 质分子,从而决定生物的表现型。DNA的复 制、转录和翻译过程就构成了遗传学的中 心法则。
解
3.复制的终止
去除引物,填补缺口;连接冈崎片段; 在原核生物中,由DNA聚合酶Ⅰ来水解去除RNA 引物,并由该酶催化延长引物缺口处的DNA, 直到剩下最后一个磷酸酯键的缺口。在DNA连 接酶的催化下,形成最后一个磷酸酯键,将冈 崎片段连接起来,形成完整的DNA长链。
另一小片段有5‘→3’外切酶的活性。
pol Ⅲ由十种亚基组成,其中α 亚 基具有5‘→3’聚合DNA的酶活性, 因而具有复制DNA的功能;而ε 亚基 具 有 3‘→5’ 外 切 酶 的 活 性 , 因 而 与DNA复制的校正功能有关。
DNA- polⅠ和DNA- polⅡ 为修复酶, DNA- pol Ⅲ真正起复制作用的酶, 为复制酶。
DNA复制时,局部双螺旋解开形成两条单链,这种叉状结构称为 复制叉。
引发体组装:蛋白因子以及引物酶一起组装形成引发体。
引发:在引物酶的催化下,以DNA为模板,合成一段短的RNA片
段,从而获得3'端自由羟基(3'-OH)。
拓扑异构酶(又称DNA旋转酶) 拓扑异构酶Ⅰ可使DNA双链中的一条链切断,松开双 螺旋后再将DNA链连接起来,从而避免出现链的缠绕。 拓扑异构酶Ⅱ可切断DNA双链,使DNA的超螺旋松解 后,再将其连接起来。
解螺旋酶 又称解链酶或rep蛋白,是用于解开DNA双链的酶蛋白, 每解开一对碱基,需消耗两分子ATP。
单链DNA结合蛋白(SSB) 这是一些能够与单链DNA结合的蛋白质因子。其作 用为:① 使解开双螺旋后的DNA单链能够稳定存 在,即稳定单链DNA,便于以其为模板复制子代 DNA;② 保护单链DNA,避免核酸酶的降解。
3、DNA连酶
催化一条DNA链的3′末端与相邻的另一条DNA链的 5′末端之间的磷酸二酯键的合成。与同一互补链结 合并相邻。 (双链DNA切口)
条件:① 需一段DNA片段具有3‘-OH,而另一段DNA 片段具有5’-Pi基;② 未封闭的缺口位于双链DNA 中,即其中有一条链是完整的;③ 需要消耗能量。
N1N2
N3
3′ OH
+5′
DNA聚合酶
OH
5′ p p
PPP
Mg2+
γβα
DNA聚合反应的特点:
(1) 以4种dNTP为底物;
(2) DNA模板; Mg2+
(3)带3’-OH末端的引物;
(4)延长方向5’ 3’;
(5)产物DNA的性质与模板相同。
N1N2N3
5′ p
p
p
3′ OH
+P
2.DNA聚合酶
复制(DDDP)
转录(DDRP)
DNA
RNA
反转录(RDDP)
RNA
复制(RDRP)
翻译 蛋白质
一 . DNA的复制
(一)、半保留复制
DNA 在 复 制 时 , 以 亲 代 DNA 的 每 一 股 作 模 板,合成完全相同的两个双链子代DNA, 每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链, 这种现象称为DNA的半保留复制。
滞后 前导
拓扑异构酶 单链结合蛋白 解链酶 引物酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 引物
冈崎片段
前导链 3′ 5′
滞后链 3′
5′
DNA复制过程模式图
5, 3,
复制叉移动方向 解旋酶
DNA聚合酶
DNA旋转酶 ATP
ADP+Pi DNA结合蛋白 引物RNA 引物酶
NA + D NMN
HOP
ATP AMP+PPi
5′
3′
5′
3′
3′
5′ DNA 3l′igase
5′
(四)DNA的半不连续复制
•半不连续复制:双链DNA分子的两条链是反向平 行的。而DNA聚合酶的方向都是5’ 3’。当DNA复制 时,一条链是连续合成的,称前导链,而另一条在 5’ 3’方向合成小片段DNA(冈崎片段),然后通过 酶将这些片段连接起来,这不连续合成的DNA 链为 滞后链。
在原核生物(大肠杆菌)中,目前发现 的DNA聚合酶有五种,研究较多的有三种, 分别命名为DNA聚合酶Ⅰ(pol Ⅰ), DNA聚合酶Ⅱ(pol Ⅱ),DNA聚合酶Ⅲ (pol Ⅲ),这三种酶都属于具有多种 酶活性的多功能酶。参与DNA复制的主要 是pol Ⅲ和pol Ⅰ。
pol Ⅰ为单一肽链的大分子蛋白质,可被 特异的蛋白酶水解为两个片段,其中的 大 片 段 称 为 Klenow 片 段 , 具 有 5‘→3’ 聚合酶活性和3‘→5’外切酶的活性。
•冈崎用电子显微镜看到了DNA复制过程中出现一 些不连续片段,这些不连续片段只存在与DNA复制 叉上其中的一股。后来就把这些不连续的片段称为 冈崎片段。
滞后 前导
(五)DNA复制的过程(原核生物)
1、复制的起始
起始、延长、终止
由蛋白因子识别复制起始点
解旋解链,形成复制叉:
由拓扑异构酶和解链酶作用,使DNA的超螺旋及双螺旋结构解开, 碱基间氢键断裂 ,形成两条单链 DNA。单链DNA结合蛋白 (SSB)结合在两条单链DNA上,形成复制叉。
引物酶(合成RNA) 引物酶本质上是一种依赖DNA的RNA聚合酶,该酶 以DNA为模板,聚合一段RNA短链引物,以提供自 由的3'-OH,使子代DNA链能够开始聚合。
2.复制的延长
由DNA聚合酶催化,以3‘→5’方向的亲代DNA链为模 板,从5‘→3’方向聚合子代DNA链。在原核生物中, 参与DNA复制延长的是DNA聚合酶Ⅲ。
(二)、 DNA复制的起始点和方式
复制子是DNA能独立进行复制的单位。需 在特定的位点起始,可能还有终点。
在原核生物中,复制起始点通常为一个, 复制方向大多是双向的,也有单向的, 而在真核生物中则为多个复制起始点。
起点
起点
起点
原核生物DNA的双向复制
(三)、DNA聚合反应有关的酶
1.DNA聚合反应
第十一章DNA复制RNA转录蛋 白质翻译
第一节 DNA的复制与修复
DNA 是 由 四 种 脱 氧 核 糖 核 酸 所 组 成 的 长链大分子,是遗传信息的携带者。
生 物 体 的 遗 传 信 息 就 贮 存 在 DNA 的 四 种脱氧核糖核酸的排列顺序中。
DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代; 通过转录和翻译,将遗传信息传递给蛋白 质分子,从而决定生物的表现型。DNA的复 制、转录和翻译过程就构成了遗传学的中 心法则。