菌根真菌及病原菌的抗药性实验

２００３年林业科技管理增刊由表４可见，打孔注射４０％氧化乐果乳油、５０９６甲胺磷乳油５ｍｌ／株杀虫率达８７．ｏ％以上，而且对于同一药剂，同一剂量而言，打孔方向为东南、东北杀虫效果均好于打孔方向为西南、东北，可能与天牛在树干上不同方位分布量有关。

３结语
１）利用５０％杀螟松乳油、５０％西维因乳油、２．５％敌杀死１：１００倍液及５０％辛硫磷乳油＋８０％ＤＤＶＰＩ：ｌ：１００＂～２００倍，喷雾防治成虫效果达９７．２％以上。

２）利用粘虫胶＋２．５％敌杀死１：２０倍液涂环，并放雌虫活体引诱，诱虫效果达８８．９％。

３）利用４０％氧化乐果乳油、２０％灭蛀磷乳油１：１００倍液及４０％氧化乐果乳油＋８０％ＤＤＶＰＩ：ｌ：１００倍液，树干喷雾防治初孵幼虫，杀虫率达９３．１％。

４）利用４０％氧化乐果乳油、５０％甲胺磷乳油５毫升／株干基打孔注射．每株打２个孔，打孔方向为东北、东南，防治木质部幼虫，杀虫率达８７．０％以上。

菌根真菌及病原菌的抗药性实验＋
赵平娟唐明刘琳
（西北农林科技大学林学院杨凌７１２１００）
摘要采用菌根组织分离法从油松根系分离到７种外生菌根真菌（ＳｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍＰｅｒｓ．，ＬｅｐｉｏｔａｐｒｏｃｅｒａＳ．ＥＧｒａｙ．，ＣｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｇｅｎｔｉｌｉｓＦｒ．，Ｃｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｓｐ．，Ｓｕｉｌｌｕｓｂｏｖｉｎｕｓ（Ｌ．Ｆｒ）Ｋｕｎｔｚｅ，ＳｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓＬ：ＦＬ
和ＢｏｌｅｔｕｓｅｄｕｌｉｓＢｕｌｌ．：Ｆｒ）。

研究了菌根真菌与油松２种病原菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．、Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ．）之间的拮抗
性，及菌根真菌与病原菌对７种杀菌剂（多菌灵、根病灵、猝例立克、土菌狂杀、土菌一次净、五氯硝基
苯、敌克松）的抗药性。

结果表明，Ｓｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓ对２种病原菌都有较强的拮抗性，其次依次为Ｂｏｌｅｔｕｓｅｄｕｌｉｓ、
Ｓｕｉｌｌｕｓｂｏｖｉｎｕｓ．和Ｌｅｐｉｏｔａｐｒｏｃｅｒａ；Ｓｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ的生长几乎不受各种杀菌剂的抑制，其余菌种生
长受猝倒立克的抑制较显著，猝倒立克对２种病原菌的生长也有显著的抑制作用，根病灵对Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．
和多菌灵对Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ．有较显著的抑制作用。

依据菌根真菌、病原菌及杀菌剂３者之间的平衡关系，
Ｓｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓ和Ｓｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ混合使用对油松猝倒病的防治有显著作用。

关键词菌根真菌病原菌抗药性
猝倒病是油松苗期的主要病害，严重影响油松幼苗的成活和质量。

以往采用多种化学方法防治曾取得过良好的效果，但由于农药残留污染土壤、病原菌产生抗药性，用药量增大，对苗木造成有害影响等多种原因，郭秀珍、雷增普、赵志鹏等人研究外生菌根真菌对油松猝倒病的作用。

证实菌根真菌不但可以促进植物生长，而且可以防治植物的根部病害。

但是，在目前以药物防治为主的情况下，我们不但要考虑菌根真菌对病原菌的拮抗性，而且要考虑菌根真菌和病原菌对杀菌剂的抗药性。

因此，本次实验选用与油松共生的７种菌根真菌和引起油松猝倒病的２种病原菌对７种常用于防治猝倒病的杀菌剂进行抗药性研究，寻找既能抗病原菌又具有抗药性的外生菌根真菌，为菌根真菌在油松育苗中的应用提供理论依据。

国家“十五”攻关子课题（２００１ＢＡ５０９８１２０３）和橱凌示范区专项基金（９９ＫＧ２２）资助项目
２００３年林业科技管理增刊１材料和方法
１．１材料
菌根菌：多根硬皮马勃ＳｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍＰｅｔ＇ｓ．、高环柄菇ＬｅｐｉｏｔａｐｒｏｃｅｒａＳ．ＦＧｒａｙ．、尖顶丝膜菌ＣｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｇｅｎｔｉｌｉｓＦｔ．、丝膜菌Ｃｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｓｐ．、美味牛肝菌ＢｏｌｅｔｕｓｅｄｕｌｉｓＢｕｌｌ．：Ｆｒ乳牛肝菌Ｓｕｉｌｌｕｓｂｏｖｉｎｕｓ（Ｌ．：Ｆｒ）Ｋｕｎｔｚｅ和黄乳牛肝菌ＳｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓＬ．Ｆｒ．分离于油松菌根。

病原菌：镰刀菌Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．和丝核菌Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ．从感病油松苗分离。

杀菌剂：多菌灵（山东绿丰农药有限公司，５０％多福超微可湿性粉剂），根病灵（南通市叶保化工有限公司，５０％可湿性粉剂），猝倒立克（河北冠龙农药有限公司，４０％可湿性粉剂），土菌狂杀（济南金地农药有限公司．２０％可湿性粉剂），土菌一次净（山东淄博绿晶有限公司，２０％超微可湿性粉剂），五氯硝基苯（济南金地农药有限公司，４０％五氯硝基苯粉剂）和敌克松（上海中正化工有限公司，５５％特效广谱杀菌剂）。

１．２方法
１．２．１茵根真菌和病原菌的拮抗实验采用常规琼胶平板法，从长满菌丝的平面上，用直径１ｃｍ的打孔器打取７种菌根真菌和２种病原菌的菌饼，在平面培养皿的正中接种菌根真菌，２５’Ｃ恒温箱中培养１ｄ后，将把同一种病原菌的３块菌饼呈正三角形接种在菌根真菌的周围，每一种菌根真菌对每一种病原菌做５个重复，并以蘸无菌水的灭菌圆形滤纸片代替病原菌作对照，在２５℃恒温培养，当对照长满培养皿时，测定菌根真菌和病原菌两者生长点之间的距离（ｃｍ），表示两个菌种拮抗性的大小。

．
１．２．２病原茵的抗药性测定采用常规琼胶平板法，从长满菌丝的平面上，用直径ｌｃｍ的打孔器打取２种病原菌的菌饼，呈正三角形把同一种病原菌的３块菌饼转接到ＰＤＡ平面培养基上，中间接直径ｌｃｍ、蘸有杀菌剂的圆形滤纸片，每一种病原菌对每一种杀菌剂做５个重复，并以蘸无菌水的灭菌圆形滤纸片作对照，在恒温箱中２５＂Ｃ条件下培养，当对照长满培养皿时，测定生长点与滤纸片之间的距离（ｃｍ），表示菌种抗药性的大小。

１．２．３茵根真菌的抗药性测定采用常规琼胶平板法，从长满菌丝的平面上，用直径１ｃｍ的打孔器打取７种菌根真菌的菌饼，呈正三角形把同一种菌根真菌的３块菌饼接种到ＰＤＡ平面培养基上，中问接直径１ｃｍ、蘸有杀菌剂的圆形滤纸片，每一种菌根真菌对每一种杀菌剂做５个重复，并以蘸无菌水的灭菌圆形滤纸片作对照，在恒温箱中２５＂Ｃ条件下培养，当对照长满培养皿时，测定生长点与滤纸片之间的距离（ｃｍ），表示菌种抗药性的大小。

２结果与分析
２．１菌根真菌和病原菌之间的拮抗实验由实验结果可知，７种菌根真菌对２种病原菌之间的拮抗性各不相同，不同的菌根真菌对同一种病原菌的拮抗性不同，同一种菌根真菌对不同病原菌的拮抗性也不同，其结果如表１。

由表１可以看出对Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．有显著拮抗作用的菌根真菌依次为Ｂ．ｅｄｕｌｉｓ，Ｓ．１ｕｔｅｕｓ．和
表Ｉ菌根真菌对病原菌的拮抗实验
Ｆｕｓｗｒｉｕｍｓｐ．Ｒｈｂｏｅｔｏｎｍ印．对照０．０００．００
ＳｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉａｕｍＰｅｔｓ０４００６０
ＬｅｐｉｏｔａｐｒｏｃｅｒａＳＥＧｒａｙ．０．６００６０
Ｃ４ａｒｔｉｎａｒｉｕｓｇｅｎｔｉｌｉｓＦＬ０４００５０
Ｃｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｓｉｘ０３００４０
ＳｕｉｌｌｕｓｂｏｖｉｎｕｓｒＬ：Ｆｒ）Ｋｕｎｔｚｅ０８００７０
ＳｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓＬ：Ｆｒ１００１００
ＢｏｌｅｔｕｓｅｄｕｌｉｓＢｕｌｌ：ＦｒＩ１００８０
２００３年林业科技管理增刊Ｓｂｏｖｉｎｕｓ，抗性较强的为Ｌ．ｐｒｏｃｅｒａ，其余３种菌根真菌的抗性一般。

对于Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ．拮抗性显著的菌种依次为Ｓ．１ｕｔｅｕｓ，Ｂｅｄｕｌｉｓ和Ｓ．ｂｏｖｉｎｕｓ，抗性较强的为Ｓ．ｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ和Ｌ．ｐｒｏｃｅｒａ，其余作用一般。

所以，单纯考虑菌根真菌对病原茵的拮抗性，Ｓ．１ｕｔｅｕｓ．应该是较优良的防治油松猝倒病的菌根真菌。

因为它对２种病原菌都有显著的拮抗性，其次依次为Ｂ．ｅｄｕｌｉｓ，Ｓ．ｂｏｖｉｎｕｓ和Ｌ．ｐｒｏｃｅｒａ。

２２病原菌抗药性的测定由实验结果可知，２种病原菌镰刀菌及丝核菌对７种杀菌剂抗性不同，对同一种杀菌剂来说，２种病原菌的抗药性相近，但是，在７种杀菌剂之间存在显著的差异，２种病原菌对７种杀菌剂的抗药性如表２：
由表２可以看出，无论对Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．还是Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ，猝倒立克对它们的生长有显著的抑制作用，其次，对与Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．，来说，根病灵有较明显
表２病原菌抗药性实验
Ｆｕｓａｒｉｕｍ∞．Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ对照００００．００
多菌灵０４５０８０
猝倒立克１．４３０．９３
根病灵Ｏ６５０２０
土菌狂杀０４００．３０
土菌一次净０３５０３０
五氯硝基苯０３００２６
敌克松０２００６５
的抑制作用，而对于Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ．，多菌灵有较显著的作用，其余各种杀菌剂对２种病原菌的抑制作用都不明显。

猝倒立克是防治猝倒病的首选杀菌剂，其次依次为多菌灵和根病灵。

２．３菌根真菌抗药性的测定抗药性测定结果表明，７种菌根真菌对杀菌剂的抗性不同（表３），Ｓ．ｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ的抗药性较强，无论对那种杀菌剂，其菌种生长点与滤纸片之间的距离和对照最接近。

Ｌ．ｐｒｏｃｅｒａ和ｃｇｅｎｔｉｌｉｓ对猝倒立克和多菌灵的抗性很弱，这２种杀菌剂严重抑制菌种的生长，其余杀菌剂中，根病灵对它也有较强的抑制作用。

其余各菌种的生长都受猝倒立克和根病灵的显著抑制，而其它杀菌剂对它们的生长无显著作用。

在７种杀菌剂中，猝倒立克和根病灵对各菌种有较强的抑制作用，多菌灵对少数的菌种有抑制作用，其余杀菌剂对各种菌根真菌的作用不大。

Ｓ．ｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ不受各种杀菌剂的抑制，具有较好的促生效果，应该是较优良的菌种，其余各种菌根真菌的生长多少会受到不同杀菌剂的抑制，只能和不同的杀菌剂配合使用。

３小结和讨论
１）从油松根系组织分离的７种菌根真菌和２种病原菌作拮抗实验，其结果和雷增普等人的研究结果一致，菌根真菌或多或少对病原菌有拮抗作用。

在７种菌根真菌中，＆ｌｕｔｅｕｓ菌种对２种病原菌都有较强的拮抗性，其次依次为Ｂ．ｅｄｕｌ西、Ｓ．ｂｏｖｉｎｕｓ和Ｌ．ｐｒｏｃｅｒａ。

表３菌根真菌抗药性实验
！坐垒生垫竺皇璺竺竺兰：艘堂！：堡兰丝！竺墨！竺竺璺堂对照０００ｏ．ｏｏｏ．ｏｏｏ．ｏｏｏ，ｏｏｏ，ｏｏｏ．ｏｏ猝倒立克０．１０ｌ２０１１４０．８３０．８６ｌ３３０．８＇５
敌可松Ｏ．２００．２０Ｏ３００２００２１０５３０．１２
根病灵０３５０６６０６００．５５０４７Ｏ．８４Ｏ９１
土菌狂兼０ｌＯ０．２００．１２Ｏ、１００，２００１００．１８
土菌一次净０１２仉２１０２０Ｏ．２２玑１００．１０Ｏ．２ｌ
五氯硝基苯０１５０１８０３００１２０４９０４００２０多菌灵０４５Ｉ１８Ｉ１７０４３０．６２０４００２０２）２种病原菌对７种杀菌剂的抗药性差异较大，猝倒立克对２种病原茵的生长有显著的抑制作用，根病灵对Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．有较明显的抑制作用，多菌灵对Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ．有较显著的作用，其余各种杀菌剂对２种病原菌的抑制作用都不明显。

２００３年林业科技管理增刊３）７种菌根真菌对７种杀菌剂的抗药性有较大差异，ｓｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ的生长几乎不受各种杀菌剂的抑制，Ｌ．ｐｒｏｃｅｒａ和ｃｇｅｎｔｉｌ虹对猝倒立克和多菌灵的抗性很弱，这２种杀菌剂严重抑制菌种的生长，其余杀菌剂中，根病灵对它也有较强的抑制作用。

其余各菌种的生长都是受猝倒立克和根病灵的显著抑制，其它的杀菌剂对它们的生长无显著作用。

４）不同菌根真菌对病原菌有不同的拮抗作用，对病原菌拮抗作用强的菌根真菌抗药性不一定强，所以，考虑到菌根真菌对病原菌的拮抗性和对杀菌剂的抗药性２者之间的平衡，最好的方法是选用几种对病原菌和和杀菌剂有不同抗性的菌根真菌混合使用。

如ｓｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ和ｓｌｕｔｅｕｓ是较理想的混合菌种，Ｂｅｄｕｌｉｓ、Ｓ．ｂｏｖｉｎｕｓ和Ｌ．．ｐｒｏｃｅｒａ对病原菌也具有较强的抗性，可以考虑和＆ｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ混合使用。

（参考文献４篇略）
陕南几种药用植物ＶＡ菌根真菌的研究＋
薛楚唐明刘琳
（西北农林科技大学林学院杨凌７１２１００）
摘要通过对陕南商洛地区５种药用植物ＶＡ菌根真菌进行了分离，共鉴定出３科３属６种ｖＡ菌根真菌：
Ｉ．缩球囊霉（ＧｌｏｍｕｓｃｏｎｓｔｒｉｃｔｕｍＴｒａｐｐｅ）２集球囊霉（ＧｌｏｍｕｓｆａｓｃｉｃｕｌａｍＧｅｒｄ．＆Ｔｒａｐｐｅｅｍｅｎｄ．Ｗａｌｋｅｒ＆Ｋｏｓｋｅ）３．白色球囊霉（ＧｌｏｍｕｓａｌｂｉｄｕｍＷａｌｋｅｒ＆Ｒｈｏｄｅｓ）４．多梗球囊霉（ＧｌｏｍｕｓｍｕｌｔｉｃａｕｌｅＧｅｒｄ＆Ｂａｋｓｈｉ）５．
细凹无梗囊霉（ＡｃａｕｌｏｓｐｏｒａｓｃｒｏｂｉｃｕｌａｔａＴｒａｐｐｅ）６．大巨孢囊霉（ＧｉｇａｓｐｏｒａｇｉｇａｎｔｅａｎＧｅｒｄ．＆Ｔｒａｐｐｅ）。

本文
对这６种ＶＡ菌根真菌的主要形态学特征进行了描述，并分析了其侵染率和分布规律。

关键词。

吗菌根真菌药用植物陕南
ＶＡ菌根的’形成可以明显改善宿主植物对土壤中磷、锌、钙等多种矿质元素与微量元素的转化、吸收和输送，以及促进激素和抗生素的生成和水分的吸收等。

特别是在药用植物的有效成分合成，提高宿主植物的抗病性，减少农药及化肥的施用量，从而在提高药用植物的产量和质量起着重要作用。

陕南商洛地区素有“天然药库”之称，年产量在１万吨以上，为陕西省中药材主要产地，中药材达１１００多种，主要的药材有连翘、丹参、黄姜、五味子、柴胡、桔梗等。

药用植物的ｖＡ菌根真菌的研究还处于起步阶段，在陕南地区这方面的研究还是空白，因此本文针对该地区５种主要药材的ＶＡ菌根真菌进行了初步研究，为菌根真菌在药用植物中的应用奠定基础。

ｌ材料与方法
１．１标本采集在陕西省商洛地区老君山的五味子（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｔｕｒｃｚ）Ｂａｉｌｌ）、连翘（Ｆｏｒｓｙｔｈｉａｓｕｓｐｅｎｓｅ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｖａｈｌ）、丹参（ＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａＢｕｎｇｅ）、黄姜（ＤｉｏｓｃｏｒｅａｅｚｉｎｇｉｂｅｍｎｓｉｓＣ．Ｈ．Ｗｒｉｇｈｔ）和柴胡（ＢｕｐｌｅｕｒｕｍｃｈｉｎｅｎｓｅＤＣ）的野生和人工种植的药材根系，随机选取５株，每株按东西南北４个方位，除去５ｃｍ厚的表层土后，挖ｌＯ～２０ｃｍ深的土壤剖面，剪取带有细根的根系，将根系和周围的土壤一同装入土壤盒中，密封带回。

国家“十五”攻关子课题（２００１ＢＡ５０９８１２０３）和杨凌示范区专项基金（９９ＫＧ２２）资助项目
菌根真菌及病原菌的抗药性实验
作者：赵平娟， 唐明， 刘琳
作者单位：西北农林科技大学林学院(杨凌)本文链接：/Conference_4877678.aspx。