菌根真菌及病原菌的抗药性实验

２００３年林业科技管理增刊由表４可见，打孔注射４０％氧化乐果乳油、５０９６甲胺磷乳油５ｍｌ／株杀虫率达８７．ｏ％以上，而且对于同一药剂，同一剂量而言，打孔方向为东南、东北杀虫效果均好于打孔方向为西南、东北，可能与天牛在树干上不同方位分布量有关。

３结语

１）利用５０％杀螟松乳油、５０％西维因乳油、２．５％敌杀死１：１００倍液及５０％辛硫磷乳油＋８０％ＤＤＶＰＩ：ｌ：１００＂～２００倍，喷雾防治成虫效果达９７．２％以上。２）利用粘虫胶＋２．５％敌杀死１：２０倍液涂环，并放雌虫活体引诱，诱虫效果达８８．９％。３）利用４０％氧化乐果乳油、２０％灭蛀磷乳油１：１００倍液及４０％氧化乐果乳油＋８０％ＤＤＶＰＩ：ｌ：１００倍液，树干喷雾防治初孵幼虫，杀虫率达９３．１％。４）利用４０％氧化乐果乳油、５０％甲胺磷乳油５毫升／株干基打孔注射．每株打２个孔，打孔方向为东北、东南，防治木质部幼虫，杀虫率达８７．０％以上。

菌根真菌及病原菌的抗药性实验＋

赵平娟唐明刘琳

（西北农林科技大学林学院杨凌７１２１００）

摘要采用菌根组织分离法从油松根系分离到７种外生菌根真菌（ＳｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍＰｅｒｓ．，ＬｅｐｉｏｔａｐｒｏｃｅｒａＳ．ＥＧｒａｙ．，ＣｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｇｅｎｔｉｌｉｓＦｒ．，Ｃｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｓｐ．，Ｓｕｉｌｌｕｓｂｏｖｉｎｕｓ（Ｌ．Ｆｒ）Ｋｕｎｔｚｅ，ＳｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓＬ：ＦＬ

和ＢｏｌｅｔｕｓｅｄｕｌｉｓＢｕｌｌ．：Ｆｒ）。研究了菌根真菌与油松２种病原菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．、Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ．）之间的拮抗

性，及菌根真菌与病原菌对７种杀菌剂（多菌灵、根病灵、猝例立克、土菌狂杀、土菌一次净、五氯硝基

苯、敌克松）的抗药性。结果表明，Ｓｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓ对２种病原菌都有较强的拮抗性，其次依次为Ｂｏｌｅｔｕｓｅｄｕｌｉｓ、

Ｓｕｉｌｌｕｓｂｏｖｉｎｕｓ．和Ｌｅｐｉｏｔａｐｒｏｃｅｒａ；Ｓｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ的生长几乎不受各种杀菌剂的抑制，其余菌种生

长受猝倒立克的抑制较显著，猝倒立克对２种病原菌的生长也有显著的抑制作用，根病灵对Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．

和多菌灵对Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ．有较显著的抑制作用。依据菌根真菌、病原菌及杀菌剂３者之间的平衡关系，

Ｓｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓ和Ｓｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍ混合使用对油松猝倒病的防治有显著作用。

关键词菌根真菌病原菌抗药性

猝倒病是油松苗期的主要病害，严重影响油松幼苗的成活和质量。以往采用多种化学方法防治曾取得过良好的效果，但由于农药残留污染土壤、病原菌产生抗药性，用药量增大，对苗木造成有害影响等多种原因，郭秀珍、雷增普、赵志鹏等人研究外生菌根真菌对油松猝倒病的作用。证实菌根真菌不但可以促进植物生长，而且可以防治植物的根部病害。但是，在目前以药物防治为主的情况下，我们不但要考虑菌根真菌对病原菌的拮抗性，而且要考虑菌根真菌和病原菌对杀菌剂的抗药性。因此，本次实验选用与油松共生的７种菌根真菌和引起油松猝倒病的２种病原菌对７种常用于防治猝倒病的杀菌剂进行抗药性研究，寻找既能抗病原菌又具有抗药性的外生菌根真菌，为菌根真菌在油松育苗中的应用提供理论依据。

国家“十五”攻关子课题（２００１ＢＡ５０９８１２０３）和橱凌示范区专项基金（９９ＫＧ２２）资助项目

２００３年林业科技管理增刊１材料和方法

１．１材料

菌根菌：多根硬皮马勃ＳｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉｚｕｍＰｅｔ＇ｓ．、高环柄菇ＬｅｐｉｏｔａｐｒｏｃｅｒａＳ．ＦＧｒａｙ．、尖顶丝膜菌ＣｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｇｅｎｔｉｌｉｓＦｔ．、丝膜菌Ｃｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｓｐ．、美味牛肝菌ＢｏｌｅｔｕｓｅｄｕｌｉｓＢｕｌｌ．：Ｆｒ乳牛肝菌Ｓｕｉｌｌｕｓｂｏｖｉｎｕｓ（Ｌ．：Ｆｒ）Ｋｕｎｔｚｅ和黄乳牛肝菌ＳｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓＬ．Ｆｒ．分离于油松菌根。

病原菌：镰刀菌Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．和丝核菌Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｐ．从感病油松苗分离。

杀菌剂：多菌灵（山东绿丰农药有限公司，５０％多福超微可湿性粉剂），根病灵（南通市叶保化工有限公司，５０％可湿性粉剂），猝倒立克（河北冠龙农药有限公司，４０％可湿性粉剂），土菌狂杀（济南金地农药有限公司．２０％可湿性粉剂），土菌一次净（山东淄博绿晶有限公司，２０％超微可湿性粉剂），五氯硝基苯（济南金地农药有限公司，４０％五氯硝基苯粉剂）和敌克松（上海中正化工有限公司，５５％特效广谱杀菌剂）。

１．２方法

１．２．１茵根真菌和病原菌的拮抗实验采用常规琼胶平板法，从长满菌丝的平面上，用直径１ｃｍ的打孔器打取７种菌根真菌和２种病原菌的菌饼，在平面培养皿的正中接种菌根真菌，２５’Ｃ恒温箱中培养１ｄ后，将把同一种病原菌的３块菌饼呈正三角形接种在菌根真菌的周围，每一种菌根真菌对每一种病原菌做５个重复，并以蘸无菌水的灭菌圆形滤纸片代替病原菌作对照，在２５℃恒温培养，当对照长满培养皿时，测定菌根真菌和病原菌两者生长点之间的距离（ｃｍ），表示两个菌种拮抗性的大小。．

１．２．２病原茵的抗药性测定采用常规琼胶平板法，从长满菌丝的平面上，用直径ｌｃｍ的打孔器打取２种病原菌的菌饼，呈正三角形把同一种病原菌的３块菌饼转接到ＰＤＡ平面培养基上，中间接直径ｌｃｍ、蘸有杀菌剂的圆形滤纸片，每一种病原菌对每一种杀菌剂做５个重复，并以蘸无菌水的灭菌圆形滤纸片作对照，在恒温箱中２５＂Ｃ条件下培养，当对照长满培养皿时，测定生长点与滤纸片之间的距离（ｃｍ），表示菌种抗药性的大小。

１．２．３茵根真菌的抗药性测定采用常规琼胶平板法，从长满菌丝的平面上，用直径１ｃｍ的打孔器打取７种菌根真菌的菌饼，呈正三角形把同一种菌根真菌的３块菌饼接种到ＰＤＡ平面培养基上，中问接直径１ｃｍ、蘸有杀菌剂的圆形滤纸片，每一种菌根真菌对每一种杀菌剂做５个重复，并以蘸无菌水的灭菌圆形滤纸片作对照，在恒温箱中２５＂Ｃ条件下培养，当对照长满培养皿时，测定生长点与滤纸片之间的距离（ｃｍ），表示菌种抗药性的大小。

２结果与分析

２．１菌根真菌和病原菌之间的拮抗实验由实验结果可知，７种菌根真菌对２种病原菌之间的拮抗性各不相同，不同的菌根真菌对同一种病原菌的拮抗性不同，同一种菌根真菌对不同病原菌的拮抗性也不同，其结果如表１。

由表１可以看出对Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．有显著拮抗作用的菌根真菌依次为Ｂ．ｅｄｕｌｉｓ，Ｓ．１ｕｔｅｕｓ．和

表Ｉ菌根真菌对病原菌的拮抗实验

Ｆｕｓｗｒｉｕｍｓｐ．Ｒｈｂｏｅｔｏｎｍ印．对照０．０００．００

ＳｃｌｅｒｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｒｈｉａｕｍＰｅｔｓ０４００６０

ＬｅｐｉｏｔａｐｒｏｃｅｒａＳＥＧｒａｙ．０．６００６０

Ｃ４ａｒｔｉｎａｒｉｕｓｇｅｎｔｉｌｉｓＦＬ０４００５０

Ｃｏｒｔｉｎａｒｉｕｓｓｉｘ０３００４０

ＳｕｉｌｌｕｓｂｏｖｉｎｕｓｒＬ：Ｆｒ）Ｋｕｎｔｚｅ０８００７０

ＳｕｉｌｌｕｓｌｕｔｅｕｓＬ：Ｆｒ１００１００

ＢｏｌｅｔｕｓｅｄｕｌｉｓＢｕｌｌ：ＦｒＩ１００８０