药物分析 论文

关于硝苯地平的药物分析

硝苯地平是第一代钙拮抗剂，为抗高血压、防治心绞痛药物，是20世纪80年代中期世界畅销的药物之一。该药的特点是：起效快，峰/谷比值高，导致了神经体液活化，经多年临床使用，该药的疗效得到了肯定。硝苯地平在价格上也占据了强有力的优势。但药效时间短，血压波动大，尚有负性肌力和负性传导作用。增加冠心病患者的死亡率。[1]

一．结构性质

硝苯地平遇光极不稳定，分子内部易发生光化学歧化作用，降解为硝苯吡啶衍生物（杂质A）及亚硝苯吡啶衍生物（杂质B）。本品在生产和贮存过程中均可能引入上述杂质，《中国药典》采用高效液相色谱法检查。

1.二氢吡啶的还原性.

二氢吡啶药物分子中含有二氢吡啶环，具有还原性。利用其还原性，可用氧化还原反应鉴别或氧化还原滴定法进行含量测定。

2.消极的氧化性

苯环上有硝基，硝基具有氧化性，可被还原剂还原为芳伯氨基，可进一步用重氮化-偶合反应鉴别。

3.稳定性

二氢吡啶类药物遇光极不稳定，易发生光化学歧化作用，因此二氢吡啶类药物的分析应避光操作，同时应检查引入的特殊杂质。

4.旋光性

硝苯地平二氢吡啶环的C4位多为手性碳原子[2]，具有旋光性，但临床所用药物大多为消旋体。

5.吸收光谱特性

硝苯地平具有芳环，在紫外区有特征吸收。

二、鉴别方法

1. 与氢氧化钠试液的反应

取本品约25mg，加丙酮1ml溶解，加20%氢氧化钠溶液3～5滴，振摇，溶液显橙红色。

2. 重氮化偶合反应

取本品25mg，加10mg盐酸-水-乙醇混合溶液（1.5:3.5:5），温热，加入锌粒0.5g ，放置２分钟，再加入氨基磺酸铵溶液（50g/L）2ml,摇匀，加入盐酸萘乙二胺溶液（5g/L）2ml,即显红色（持续5分钟以上）。

3. 紫外-分光光度法

本品结构中有共轭体系，有特征性的紫外吸收。

方法为：取本品适量，加三氯甲烷2ml使溶解，加无水乙醇制成每1ml含15μg的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在237nm的波长处有最大吸收，在320～355nm的波长处有较大的宽幅吸收。[3]

4. 红外分光光度法

《中国药典》采用红外分光光度法鉴别本品，要求本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。

5.薄层色谱法

薄层色谱法设备简单、操作简便，具有分功能，可排除原料中有关物质、制剂中辅料的干扰。取本品加入甲醇制成每1ml中含1ml的溶液，作为供试品溶液；另取硝苯地平对照

品适量，加甲醇制成每1ml约含1ml的溶液，作为对照品。吸取上述两种溶液各5μl，分别点遇到同一硅胶F254薄层板上酸乙酯-环己烷（40:60）为展开剂，展开，晾干，置紫外灯（254nm）下检视，供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点一致。[4]

三、有关物质检查方法

取本品，精密称定，加甲醇溶解并分别制成每1ml中含1mg与0.2mg的溶液，作为供试品溶液（1）和（2）；取硝苯地平杂质对照品A与B各10mg，精密称定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（1）。分别精密量取供试品溶液（2）与对照品溶液（1）各1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（2）。照高效液相色谱法测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（3：2）为流动相；检测波长为235nm.取对照品溶液（2）20μl注入液相色谱仪，再精密量取供试品溶液（1）与对照品溶液（2）各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液（1）色谱图中如有与对照品溶液（2）色谱图中杂质A与B相应的峰，其峰面积不得大于对照品溶液（2）色谱图中杂质A和B的面积；如有其他杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照品溶液（2）中硝苯地平的峰面积；杂质总量不得大于0.5%.

按以上方法检查，杂质A和B的限量分别为0.2%，杂质总量不得大于0.5%.检查时，应注意避光操作。

四、含量测定

1. 酸铈滴定液

配制：取硫酸铈42g（或硫酸铈铵70g），加含有硫酸28mL的水500mL，加热溶解后，放冷，加水适量使成1000mL，摇匀。

标定：取在105℃干燥至恒重的基准三氧化二砷约0.15g，精密称定，加氢氧化钠滴定液（1mol/L）10mL，微热使溶解，加水50mL、盐酸25mL、一氧化碘试液5mL与邻二氮菲指示液2滴，用本液滴定近终点时，加热至50℃，继续滴定至溶液由浅红色转变为浅绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL硫酸铈滴定液（0.1mol/L）相当于4.946mg的三氧化二砷。根据本液的消耗量与三氧化二砷的取用量，算出本液的浓度，即可。

2. 二氮菲指示液

取硫酸亚铁0.5g，加水100mL使溶解，加硫酸2滴与邻二氮菲0.5g，摇匀，即得。本液应临用新制。

操作步骤：精密称取本品0.4g，加无水乙醇50mL，微温使溶解，加高氯酸溶液50mL、邻二氮菲指示液3滴，立即用硫酸铈滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，在水浴中加热至50℃左右，继续缓缓滴定至橙红色消失，并将滴定的结果用空白实验校正，记录消耗硫酸铈滴定液的体积数（mL），每1mL硫酸铈滴定液（0.1mol/L）相当于17.32mg的硝苯地平（C17H18N2O6），即得。[5]

参考文献

[1] 万军梅，李红梅.药理学.武汉：湖北科学技术出版社，2013,217-230

[2] 姚彤炜.手性药物分析.北京：人民卫生出版社，2008杭太俊.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（2012年版二部）.北京：中国医药科技出版社，2010,943-944

[4] 邢玉仁，王杰.高效液相色谱法测定硝苯地平含量.1999.17（3）308-309

[5] 药物分析，第7版.北京：人民卫生出版社，2007