凝血酶时间测定

凝血酶时间测定(TT)

一﹑方法学原理

待测血浆加入适量的凝血酶溶液,纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆凝血酶时间(TT).该实验系检查受试者血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白能力的过筛试验.

二﹑试剂品牌﹑代号﹑包装规格﹑试剂配制

1﹑TT试剂(内含凝血酶﹑缓冲液﹑稳定剂﹑防腐剂)

2﹑TT缓冲液(内含缓冲液﹑稳定剂﹑防腐剂)

三﹑仪器品牌及型号

单通道血凝分析仪(M1)

德国TECO GmbH公司

四﹑测定操作步骤

取37℃预温待测血浆0.2ml,加入TT试剂0.2ml,记录凝固时间,即为TT值.

注意:TT试剂不需37℃预温,15-25℃室温直接使用.

五﹑参考范围

8----16s

六﹑临床意义:

TT延长:见于肝素增多或类肝素物质存在,SLE,肝病,肾病,低(无)纤维蛋白原血症,异常纤维蛋白原血病(纤维蛋白原机能不良血症),FDP增多,异常球蛋白血症或免疫球蛋白

增多等疾病.

七﹑病人准备﹑标本要求

静脉采血,置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝液的塑料管或硅化玻璃管中,轻轻颠倒混匀,3000rpm离心15分钟,收集上层液(血浆,黄色).样本在不同条件下保存时间如下:–80℃保存,不宜超过30天.–20℃保存,不宜超过14天.2-8℃保存,不宜超过6小时.22-24℃保存,不宜超过2小时测定.

八﹑注意事项

1﹑采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器,贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管.不宜使用普通玻璃器,避免凝血因子活化.

2﹑采血时止血带不可束缚过紧,并不应超过5分钟,否则导致凝血及纤溶因子活化.

3﹑样本内若有残留细胞,经冻融细胞膜可破坏而影响结果. 4﹑样本暴露于空气中可使PH值升高,因此若不能立即测定应将样本加塞保存.

5﹑–80℃及–20℃保存样本,用时37℃迅速融化,不可反复冻融.

6﹑血浆预温不宜超过5分钟.

7﹑样本采集避免溶血及组织液污染.

8﹑各实验室建立自的参考范围.

9﹑手工操作时,光线要充足,凝血酶时间的终点计算以出现混浊的初期凝固为准.

10﹑测定温度36.5℃-38.5℃,超过或过高温度均使PT延长.

编写:司孟霞科主任签字:张静2007-08-25