转座子概述
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Ac-Ds转座元件
❖ 1951年McClintock-麦克林托克提出转座（Transposition） 和跳跃基因(jumping gene)的新概念；
❖ 1967年Shapiro才在E.coli中发现了转座因子（transposable element）。
Barbara McClintock(1902-1992) Nobel Prize for Physiology or Medicine 1983
果蝇P 成分有四个外显子，前三个拼接到一起在 体细胞表达，四个拼接到一起在生殖细胞中表达。
❖ P因子——“杂种不育”(hybrid dysgenesis)。 ❖ P型(父本贡献的，paternal contributing)
——带有全长和缺失型的P因子 ❖ M型(母本贡献的，maternal contributing)
果蝇中的转座子
P转座子(P element)是果蝇中诱发杂种不育(hybrid dysgenesis)的转座子。
P转座子有两种类型： 全长P因子：长2907bp，两端有33bp的反向重复序列(IR)， 有4 个外显子(4个ORF)，编码转座酶；
缺失型P因子：不能编码转座酶，依赖于全长P因子才能转 座移动。缺失型P因子都是活性P因子的中段缺失型衍生物。 长度从0.5kb到1.4 kb不等。
3、保守型转座(Conservitive transposon)：描述了另一种非复制型转 座，在这种情况下，通过一系列事件，转座元件从供体位点上切除，然 后插到靶位点上。在这一过程中，碱基是保守的。运用这一机制的转座 子较大，不仅可以转移转座子本身而且还以将供体菌的DNA 转移到另 一个细菌。
保守性转座只是序列的直接移动，没有核苷酸键的损失， 原位点没有链断裂。这与λ噬菌体的整合、删除有相似性。
转座作用的遗传学效应
转座子引发了许多遗传变异，如基因重排及质粒-染 色体DNA整合等，DNA转座的遗传学效应主要有以下几 个方面：
① 转座引起插入突变； ② 转座产生新的基因； ③ 转座产生的染色体畸变； ④ 转座引起的生物进化。
转座引起插入突变
各种IS、Tn转座子都可以引起插入突变。如果 插入位于某操纵子的前半部分，就可能造成极性突 变，导致该操纵子后半部分结构基因表达失活。
在体细胞中，只有前两个 内含子被顺利切除，第三个内 含子未除去，RNA剪接不完整， 产生前3个外显子的功能型mRNA， 被翻译成66×103bp的转座酶， 是没有生物学活性的。这就是P 因子在体细胞中转座的抑制元 件。
在殖细胞中，三个内含子 都被成功切除，RNA剪接完整， 产生的成熟mRNA包括全部4个外 显子，并被翻译成87×103bp的 转座酶，导致P因子转座和配子 败育。
9
9
有热点
18
9
未知
2、复合转座子（composite transposon）
➢复合转座子是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因） 的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。
The arms may be in either the same or (more commonly) inverted orientation.
玉米中研究得比较清楚的两个控制因子
Ac-Ds系统(activator-dissociation system) ：即激活-解 离系统，通过非复制型机制进行转座
Spm-dSpm 系 统 (suppressor-promoter-mutator): 即 抑 制-促进-增变系统
Ac-Ds系统:
Ac:
IS1 IS2 IS4 IS5 IS10R IS50R IS903
IS序列的结构特征比较
长度(bp)
768 1327 1428 1195 1329 1531 1057
两段倒置重 靶位点正向 复区(bp) 重复区(bp)
靶位点
23
9
随机
41
5
有热点
18
11或12
AAAN20TT
16
4
有热点
22
9
NGCTNAGCN
二、转座子的分类
1、插入序列(insertional sequence IS)
特征： ❖两端都有短的4-15bp的正向重复序列(direct repeats, DR) （靶序列）； ❖末端有略长的15-25bp的反向重复序列(inverted repeats, IR)； ❖1kb左右的编码区，它仅编码和转座有关的转座酶。
——不含全长P因子或只含缺失的P因子 ❖ P（♂）×M（♀） 后代不育 ❖ M（♂）×P（♀） 后代可育
杂种不育：
当P品系雄果蝇和
M品系雌果蝇交配
时，可能由于雄果
蝇 DNA 的 进 入 而
突然生成了转座酶，
结果使很多的P因
子发生转座，造成
插入突变。这样杂
交生下的子代出现
染色体畸变和生育
力下降。
杂种不育是不对称的，它是由P品系的雄果蝇和M品系的雌果蝇杂 交产生的，但M品系的雄果蝇和P 品系的雌果蝇不会产生杂种不育。
两个正向重复的交互重组会把二者之间的序列删 除掉，每个重组产物只含一个拷贝的正向重复。
反向重复之间的区 域被倒置；它们自 身还可进一步倒位。 一个倒转模序的复 合转座子在基因组 内是一种稳定的元 件，尽管中心区的 方向可能因重组而 倒转。
两个倒转重复的交互重组将会把二者之 间的序列反向排列(但稳定存在)。
自主的Ac 元件大部分长度都被一个含五个外显子的基因占据。其产物是转座酶。 元件末端为一个11bp的反向重复序列；在靶序列在插入位点形成8bp重复。
Spm-dSpm系统:
Spm: ❖ 自主性因子,具有转座、整合和解离活性； ❖ 两端各有一个13bp的倒置重复序列，在其靶DNA位点复制形成
3bp的正向重复。
转座产生的染色体畸变
当复制性转座发生在宿主DNA原有位点附近时，往往导 致转座子两个拷贝之间的同源重组，引起DNA缺失或倒位。 若同源重组发生在两个正向重复转座区之间，就导致宿主染 色体DNA缺失；若重组发生在两个反向重复转座区之间，则 引起染色体DNA倒位。
正向重复之间的互 惠 (Reciprocal) 重 组 会将它们之间的序 列切除，中间区域 会以环状DNA 的形 式被切除(从细胞中 消失)；染色体仍保 留正向重复的一个 拷贝。
the arms that are direct repeats
the arms are inverted repeats
复合转座子的中心区携带有标记(如抗药性)，两侧有IS 序列。每个IS 具有短的末端重复。
部分复合转座子的结构和功能
转座子 Tn5 Tn9 Tn10
Tn903
所携带的 基因
KanR
转座子TnA的结构示意图
转座过程
转座酶（transposase）催化IS的转座，它由IS编码。 首先转座酶交错切开宿主靶位点，然后IS插入，与宿主的 单链末端相连接，余ຫໍສະໝຸດ Baidu的缺口由DNA聚合酶和连接酶加以填 补，最终插入的IS两端形成了DR(Direct repeat)或靶重复。
DNA转座的一般模式
2、非复制型转座(Nonreplicative transposon)：转座因子做物理性 运动，直接从一个位点转移到另一个位点。这种转座过程中涉及到转 座子从供体DNA的释放，机制需要一个转座酶。非复制型转座导致转 座子插入到靶位点以及从供体位点丢失。
非复制转座中转座子仅从供体位点向受体位点做物理性移动，从而 在供体位点造成链的断裂，若断裂不被修复，后果将是致命的。
转座子概述
主讲内容
一、转座子的概念 二、转座子的分类 三、转座发生的机制 四、真核生物的转座因子
一、概念
转座子（transposon,简称Tn）, 又称易位子，是指存在 于 染 色 体 DNA 上 可 以 自 主 复 制 和 移 位 的 一 段 DNA 序 列 。
转座子可以在不同复制子之间转移，以非正常重组方式 从一个位点插入到另外一个位点，对新位点基因的结构与表 达产生多种遗传效应。
转座产生新的基因
如果转座子上带有抗药性基因，它一方面造成靶DNA 序列上的插入突变，同时也使这个位点产生抗药性。
转座引起的生物进化
由于转座作用，使原来在染色体上相距甚远的基因组 合到一起，构建成一个操纵子或表达单元，可能产生新的 生物学功能的基因和新的蛋白质分子。
四、真核生物的转座因子
1. 玉米中的控制因子 2. 果蝇中的转座子
dSpm(defective Spm): ❖ 非自主性因子，所有dSpm都是功能性Spm的缺失突变体； ❖ Spm-dSpm系统在功能上与Ac-Ds系统相似，也可以引入基因的
插入突变，影响结构基因表达，还能导致染色体断裂。
Spm/En有两个基因，tnpA 有11 个外显子，经转录拼接产生2500bp 的 mRNA，tnpB 的6000bpmRNA中包含ORF1和ORF2。
❖ 大部分自主因子AC中含5个外显子的单个基因，其产物是转座 酶，
❖ 末端11bp的IR和8bp的DR，DR是由靶位点重复而成。
Ds:
❖ 各种Ds因子的长度和序列都不相同，但和Ac相关。其末端同样 有11bp的IR。
❖ Ds比Ac短，其缺失的长度不同，一个极端的例子是Ds9因子仅 缺失194bp，另一个例子是Ds6因子长仅有2.5kb，相当于Ac两端 各1kb。
CamR
总长度(bp) 5700
末端IS序列 的长度(bp)
1500
末端IS序 列的方向
反向
2638
768
正向
TetR
9300
1400
反向
KanR
3100
1050
反向
3、复杂转座子：TnA家族
——携带转座和耐药等基因的独立体家族。
TnA家族带有3个基因，其中一个编码β-内酰胺酶(AmpR),另两个则是转座作用 所必需的。所有TnA类转座子两翼都带有38bp的倒置重复序列。
玉米中的控制因子
玉米基因组中含有几个控制元件家族。每个家族 的成员可分为两类：
（1）自主控制元件 Autonomous controlling element
特点：具剪切和转座的功能
(2) 非自主控制元件 Nonautonomous controlling element
特点：单独存在时是稳定的；可被自主控制元 件激活
Thank for your attention!
三、转座作用的机制
1、复制型转座(Replicative transposon)：在相互作用时，转座子被复 制，转座实体是原转座子的一个拷贝。转座子中作为移动的部分被拷贝。 一个拷贝保留在原位点，而另一个则插入到新的位点。
复制型转座产生转座子的一个拷贝，由该拷贝插入到受体位点， 供体位点序列不变，因此供体和受体位点都有一个拷贝的转座子。
❖ 1951年McClintock-麦克林托克提出转座（Transposition） 和跳跃基因(jumping gene)的新概念；
❖ 1967年Shapiro才在E.coli中发现了转座因子（transposable element）。
Barbara McClintock(1902-1992) Nobel Prize for Physiology or Medicine 1983
果蝇P 成分有四个外显子，前三个拼接到一起在 体细胞表达，四个拼接到一起在生殖细胞中表达。
❖ P因子——“杂种不育”(hybrid dysgenesis)。 ❖ P型(父本贡献的，paternal contributing)
——带有全长和缺失型的P因子 ❖ M型(母本贡献的，maternal contributing)
果蝇中的转座子
P转座子(P element)是果蝇中诱发杂种不育(hybrid dysgenesis)的转座子。
P转座子有两种类型： 全长P因子：长2907bp，两端有33bp的反向重复序列(IR)， 有4 个外显子(4个ORF)，编码转座酶；
缺失型P因子：不能编码转座酶，依赖于全长P因子才能转 座移动。缺失型P因子都是活性P因子的中段缺失型衍生物。 长度从0.5kb到1.4 kb不等。
3、保守型转座(Conservitive transposon)：描述了另一种非复制型转 座，在这种情况下，通过一系列事件，转座元件从供体位点上切除，然 后插到靶位点上。在这一过程中，碱基是保守的。运用这一机制的转座 子较大，不仅可以转移转座子本身而且还以将供体菌的DNA 转移到另 一个细菌。
保守性转座只是序列的直接移动，没有核苷酸键的损失， 原位点没有链断裂。这与λ噬菌体的整合、删除有相似性。
转座作用的遗传学效应
转座子引发了许多遗传变异，如基因重排及质粒-染 色体DNA整合等，DNA转座的遗传学效应主要有以下几 个方面：
① 转座引起插入突变； ② 转座产生新的基因； ③ 转座产生的染色体畸变； ④ 转座引起的生物进化。
转座引起插入突变
各种IS、Tn转座子都可以引起插入突变。如果 插入位于某操纵子的前半部分，就可能造成极性突 变，导致该操纵子后半部分结构基因表达失活。
在体细胞中，只有前两个 内含子被顺利切除，第三个内 含子未除去，RNA剪接不完整， 产生前3个外显子的功能型mRNA， 被翻译成66×103bp的转座酶， 是没有生物学活性的。这就是P 因子在体细胞中转座的抑制元 件。
在殖细胞中，三个内含子 都被成功切除，RNA剪接完整， 产生的成熟mRNA包括全部4个外 显子，并被翻译成87×103bp的 转座酶，导致P因子转座和配子 败育。
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有热点
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未知
2、复合转座子（composite transposon）
➢复合转座子是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因） 的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。
The arms may be in either the same or (more commonly) inverted orientation.
玉米中研究得比较清楚的两个控制因子
Ac-Ds系统(activator-dissociation system) ：即激活-解 离系统，通过非复制型机制进行转座
Spm-dSpm 系 统 (suppressor-promoter-mutator): 即 抑 制-促进-增变系统
Ac-Ds系统:
Ac:
IS1 IS2 IS4 IS5 IS10R IS50R IS903
IS序列的结构特征比较
长度(bp)
768 1327 1428 1195 1329 1531 1057
两段倒置重 靶位点正向 复区(bp) 重复区(bp)
靶位点
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11或12
AAAN20TT
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NGCTNAGCN
二、转座子的分类
1、插入序列(insertional sequence IS)
特征： ❖两端都有短的4-15bp的正向重复序列(direct repeats, DR) （靶序列）； ❖末端有略长的15-25bp的反向重复序列(inverted repeats, IR)； ❖1kb左右的编码区，它仅编码和转座有关的转座酶。
——不含全长P因子或只含缺失的P因子 ❖ P（♂）×M（♀） 后代不育 ❖ M（♂）×P（♀） 后代可育
杂种不育：
当P品系雄果蝇和
M品系雌果蝇交配
时，可能由于雄果
蝇 DNA 的 进 入 而
突然生成了转座酶，
结果使很多的P因
子发生转座，造成
插入突变。这样杂
交生下的子代出现
染色体畸变和生育
力下降。
杂种不育是不对称的，它是由P品系的雄果蝇和M品系的雌果蝇杂 交产生的，但M品系的雄果蝇和P 品系的雌果蝇不会产生杂种不育。
两个正向重复的交互重组会把二者之间的序列删 除掉，每个重组产物只含一个拷贝的正向重复。
反向重复之间的区 域被倒置；它们自 身还可进一步倒位。 一个倒转模序的复 合转座子在基因组 内是一种稳定的元 件，尽管中心区的 方向可能因重组而 倒转。
两个倒转重复的交互重组将会把二者之 间的序列反向排列(但稳定存在)。
自主的Ac 元件大部分长度都被一个含五个外显子的基因占据。其产物是转座酶。 元件末端为一个11bp的反向重复序列；在靶序列在插入位点形成8bp重复。
Spm-dSpm系统:
Spm: ❖ 自主性因子,具有转座、整合和解离活性； ❖ 两端各有一个13bp的倒置重复序列，在其靶DNA位点复制形成
3bp的正向重复。
转座产生的染色体畸变
当复制性转座发生在宿主DNA原有位点附近时，往往导 致转座子两个拷贝之间的同源重组，引起DNA缺失或倒位。 若同源重组发生在两个正向重复转座区之间，就导致宿主染 色体DNA缺失；若重组发生在两个反向重复转座区之间，则 引起染色体DNA倒位。
正向重复之间的互 惠 (Reciprocal) 重 组 会将它们之间的序 列切除，中间区域 会以环状DNA 的形 式被切除(从细胞中 消失)；染色体仍保 留正向重复的一个 拷贝。
the arms that are direct repeats
the arms are inverted repeats
复合转座子的中心区携带有标记(如抗药性)，两侧有IS 序列。每个IS 具有短的末端重复。
部分复合转座子的结构和功能
转座子 Tn5 Tn9 Tn10
Tn903
所携带的 基因
KanR
转座子TnA的结构示意图
转座过程
转座酶（transposase）催化IS的转座，它由IS编码。 首先转座酶交错切开宿主靶位点，然后IS插入，与宿主的 单链末端相连接，余ຫໍສະໝຸດ Baidu的缺口由DNA聚合酶和连接酶加以填 补，最终插入的IS两端形成了DR(Direct repeat)或靶重复。
DNA转座的一般模式
2、非复制型转座(Nonreplicative transposon)：转座因子做物理性 运动，直接从一个位点转移到另一个位点。这种转座过程中涉及到转 座子从供体DNA的释放，机制需要一个转座酶。非复制型转座导致转 座子插入到靶位点以及从供体位点丢失。
非复制转座中转座子仅从供体位点向受体位点做物理性移动，从而 在供体位点造成链的断裂，若断裂不被修复，后果将是致命的。
转座子概述
主讲内容
一、转座子的概念 二、转座子的分类 三、转座发生的机制 四、真核生物的转座因子
一、概念
转座子（transposon,简称Tn）, 又称易位子，是指存在 于 染 色 体 DNA 上 可 以 自 主 复 制 和 移 位 的 一 段 DNA 序 列 。
转座子可以在不同复制子之间转移，以非正常重组方式 从一个位点插入到另外一个位点，对新位点基因的结构与表 达产生多种遗传效应。
转座产生新的基因
如果转座子上带有抗药性基因，它一方面造成靶DNA 序列上的插入突变，同时也使这个位点产生抗药性。
转座引起的生物进化
由于转座作用，使原来在染色体上相距甚远的基因组 合到一起，构建成一个操纵子或表达单元，可能产生新的 生物学功能的基因和新的蛋白质分子。
四、真核生物的转座因子
1. 玉米中的控制因子 2. 果蝇中的转座子
dSpm(defective Spm): ❖ 非自主性因子，所有dSpm都是功能性Spm的缺失突变体； ❖ Spm-dSpm系统在功能上与Ac-Ds系统相似，也可以引入基因的
插入突变，影响结构基因表达，还能导致染色体断裂。
Spm/En有两个基因，tnpA 有11 个外显子，经转录拼接产生2500bp 的 mRNA，tnpB 的6000bpmRNA中包含ORF1和ORF2。
❖ 大部分自主因子AC中含5个外显子的单个基因，其产物是转座 酶，
❖ 末端11bp的IR和8bp的DR，DR是由靶位点重复而成。
Ds:
❖ 各种Ds因子的长度和序列都不相同，但和Ac相关。其末端同样 有11bp的IR。
❖ Ds比Ac短，其缺失的长度不同，一个极端的例子是Ds9因子仅 缺失194bp，另一个例子是Ds6因子长仅有2.5kb，相当于Ac两端 各1kb。
CamR
总长度(bp) 5700
末端IS序列 的长度(bp)
1500
末端IS序 列的方向
反向
2638
768
正向
TetR
9300
1400
反向
KanR
3100
1050
反向
3、复杂转座子：TnA家族
——携带转座和耐药等基因的独立体家族。
TnA家族带有3个基因，其中一个编码β-内酰胺酶(AmpR),另两个则是转座作用 所必需的。所有TnA类转座子两翼都带有38bp的倒置重复序列。
玉米中的控制因子
玉米基因组中含有几个控制元件家族。每个家族 的成员可分为两类：
（1）自主控制元件 Autonomous controlling element
特点：具剪切和转座的功能
(2) 非自主控制元件 Nonautonomous controlling element
特点：单独存在时是稳定的；可被自主控制元 件激活
Thank for your attention!
三、转座作用的机制
1、复制型转座(Replicative transposon)：在相互作用时，转座子被复 制，转座实体是原转座子的一个拷贝。转座子中作为移动的部分被拷贝。 一个拷贝保留在原位点，而另一个则插入到新的位点。
复制型转座产生转座子的一个拷贝，由该拷贝插入到受体位点， 供体位点序列不变，因此供体和受体位点都有一个拷贝的转座子。