双水相萃取
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双水相萃取相图的制作
实验目的
• 1.了解双水相萃取的原理 • 2.掌握用浊点法制作双水相萃取相图的方法
实验原理
• 两种亲水性高聚合物或高聚合物与无机盐在水中会形成两个相,这是由 于高聚合物的不相溶性或盐析作用而形成,但是只有达到一定浓度时, 才能形成两相。两水相形成的条件和定量关系可用相图来表示,它是 一根双节线,当成相组分的配比取在曲线的下方时系统为均匀的单项, 混合后,溶液澄清透明,成为均相区;在曲线上方时,能自动分成两 相,称为两相区,若配比取在曲线上,则混合后,溶液恰好从澄清变 为浑浊。相图是研究双水相萃取的基础。
• (3)利用PEG2000-硫酸铵双水相体系萃取分离牛奶中的蛋白质
• 取1ml牛奶装入上述双水相体系,搅拌军训,于500r/min离心5min,
静置分层,分别量取上下相的体积
注意事项
• 清洗干净的滴定管必须试漏,试漏成功的滴定管要洗涤两次 • 在接近滴定终点时候一定要每滴一滴,彻底混匀后再滴下一滴
实验结果
• 上面注意事项里面的两条我们小组没有注 意到所以导致实验失败,希望其他小组吸 取教训,下次也一定会注意到,而且试管 还不全,实验最后也没彻底完成。
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主要仪器
• 漩涡振荡器,微量滴管装置,电子天平
步骤
• (1)PEG2000-硫酸铵双水相体系相图的测定 • 1.取10%PEG2000溶液于三角瓶中 • 2.用40%硫酸铵溶液装入滴定管中滴定至三角瓶中溶液出现浑浊,记
录硫酸铵消耗的体积,加入1ml水使溶液澄清,继续用硫酸铵滴定至 浑浊,重复7-8次记录每次硫酸铵消耗的体积,计算每次出现浑浊时 体系中PEG和硫酸铵的浓度(W/V) • 3.以硫酸铵的浓度(W/V)为横坐标,PEG浓度为纵坐标,绘制出 PEG2000-硫酸铵双水相体系图 • (2)PEG2000-硫酸铵双水相体系的配置 • 根据相图中双水相区的PEG2000浓度和硫酸铵浓度,分别取适量的 10%PEG2000溶液和硫酸铵溶液,混合均匀后以2000r/min离心后分 相,得到双水相体系