复方丹参片中四种成分的高效液相色谱-电化学检测-紫外检测法分析
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收稿日期： !""0 1$" 1$" 作者简介： 索志荣， 男， 助理研究员， 博士研究生， 2(3 ： （ "!/ ） 4$$/$"/# ， 51)673 ： 89&:;7+&<=> $-, ? @&)? 通讯联系人： 郑建斌， 男， 教授， 博士生导师， 2(3 ： （ "!/ ） 44,"!"AA ， 51)673 ： :;(<=B*> <C9? (D9? @<? 基金项目： 国家自然科学基金 （ %&? !"!A#"," ） 、 陕西省博士后科研基金 （ %&? EF",&", %G!/ ） 资助项目 ?
（ $ $ 西北大学分析科学研究所 陕西省电分析化学重点实验室，陕西 西安 A$""-/ ； ! $ 西北大学生命科学学院，陕西 西安 A$""-/ ） 同时分离和测定复方丹参片 摘要： 建立了电化学检测器与二极管阵 列 检 测 器 联 用 的 液 相 色 谱 （ &’()*+),*,-, ） 中原儿茶酸、 原儿茶醛、 咖啡酸和 丹 参 酮 ! - 等 0 种 成 分 的 分 析 方 法。 采 用 ."/012 34*) $4 柱 （ $#" 55 I 0J - 55 #J " " 5 ） ， 以甲醇和 "J 0 8 磷酸为流动相 （ 流速 $J " 5( 9 56: ） 进 行 梯 度 洗 脱； +), 检 测 电 压 "J A ! ， ,-, 检 测 6$ 7$ ， 波长 !A" :5 ， 柱 温 ," ; 。 实 验 结 果 表 明， 原 儿 茶 酸、 原 儿 茶 醛、 咖 啡 酸 和 丹 参 酮 ! - 质 量 浓 度 分 别 为 "J , . /J " 5< 9 ( ， $J $ . #0J " 5< 9 ( ， $J $ . $$J $ 5< 9 ( 和 #J ! . #!J " 5< 9 ( 时与其峰面积呈良好的线性关系 （ 线性相关系数均高 于 "J /// ） ， 原儿茶酸、 原儿茶醛、 咖啡酸和丹参酮 ! - 的平均回收率 （ ! K -） 分别为 /AJ 4 8（ 相对标准偏差 （ =3, ） 为 !J $# 8 ） ， /4J ! 8（ =3, 为 !J "A 8 ） ， /AJ - 8（ =3, 为 !J $4 8 ） 和 /AJ ! 8（ =3, 为 !J "A 8 ） 。 该 法 同 时 利 用 了 +), 和 ,-, 的优点， 是一种快速、 灵敏、 准确的分析方法， 可以为复方丹参片的质量控制提供科学依据。 关键词： 高效液相色谱 * 电化学检测 * 紫外检测法； 原儿茶酸； 原儿茶醛； 咖啡酸； 丹参酮 ! - ； 复方丹参片 中图分类号： >-#4H H H 文献标识码： - H H H 文章编号： $""" *4A$, （ !""# ） "- *"-!- *"0
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! 第"期
索志荣等： 复方丹参片中四种成分的高效液相色谱 ! 电化学检测 ! 紫外检测法分析
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! ! 复方丹参片是由丹参、 三七、 冰片三味中药组成 的常用中成药， 具 有 活 血 化 淤、 理 气 止 痛 的 功 效， 主 要用于胸口憋闷、 心 绞 痛 等 症 的 治 疗。 丹 参 作 为 君 药， 是复方丹参片中唯一需要提取的药物， 也是影响 产品质量的关键。丹参的活性成分可分为脂溶性成 分和 水 溶 性 成 分； 丹参酮!" 是其脂溶性代表成分 之一， 相对含量较 高， 有 扩 张 冠 脉、 抗心肌缺血的作 用［ # ］； 原儿茶酸、 原儿 茶 醛、 咖啡酸等酚类化合物为 主要的水溶 性 成 分［ $ ］， 不 仅 具 有 显 著 的 抗 氧 化、 抗 自由基、 抑制低密度 脂 蛋 白 的 氧 化 以 及 预 防 心 血 管 疾病的作用， 而且具有抗癌、 抗炎症和抗血小板凝聚
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复方丹参片中四种成分的高效液相色谱 ! 电化学检测 !紫外检测法分析
索志荣 $ ， H 秦海燕 ! ， H 曹 H 炜$ ， H 刘文哲 ! ， H 郑建斌 $
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&］ 。对于复方 丹 参 片 的 质 量 控 制 有 采 用 薄 等功能［ % ，
! ! 甲醇为色谱纯， 水为超纯水， 磷酸为分析纯。原 儿茶酸和咖啡酸 对 照 品 购 自 D<@#7 公 司， 原儿茶醛 和丹参酮 ! " 对 照 品 购 自 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所。复方丹参片： 山西亚宝药业集团股份有限公司 （ 批号： *&*&*# ） ， 云南通大生物药业有限公司 （批 号： *%*%*# ） ， 甘肃陇神戎发制药有限公司 （ 批 号： *%#$*# ） ， 西安 颗 粒 药 业 有 限 公 司 （ 批 号： *&*"*$ ） ， 广州白云 山 制 药 股 份 有 限 公 司 广 州 白 云 山 中 药 厂 （ 批号： *&*&#*#% ） 。 ! ( #" 溶液的配制 ! ! 供试品溶液 的 制 备： 取 复 方 丹 参 片 #* 片， 去除 糖衣， 在 研 钵 中 研 细， 过 #** 目 筛 后， 准 确 称 量 %’* #@ ， 用 )* E（ 体 积 分 数， 下同） 甲 醇 超 声 提 取 % 次， 合 并 滤 液 于 $’ 每次 用 ). * #’ 溶 剂 提 取 $* #<1 ， #’ 容 量 瓶 中， 再 用 )* E 甲 醇 定 容 至 刻 度， 摇 匀， 取 适量用 *. &’ " # 微孔滤膜过滤， 即得供试品溶液。 ! ! 对照品溶液的配制： 准确称取原儿茶酸、 原儿茶 醛、 咖啡酸和丹参酮 ! " 对照品适量， 用甲醇溶 解并 定容， 摇匀， 配得原儿茶酸、 原儿茶醛、 咖啡酸和丹参 酮 ! " 质 量 浓 度 分 别 为 *. $’ ， *. $- ， *. $$ ， *. $" @ & ’ 的对照品溶液， 作 为 储 备 液。 其 他 不 同 浓 度 的 各 对 照品溶液由各自的储备液经甲醇稀释得到。 ! ( $" 色谱条件 ! ! F$057G DH!* #) 柱 （ #’* ## / &. " ## <. 8. ， ’. * （ 美国 "@<%.16 公 司 ） ； 流 动 相： " 液 为 甲 醇， H "#） 液为 *. & E 磷酸； 梯 度 洗 脱 程 序： #* E " &( &$ E " （ ) #<1 ） ， 流 速： #. * #’ & #<1 ； ,", 检 测 &( ,’ E " 波长为 $-* 1# ； +*, 为 安 培 检 测， 工 作 电 压 为 *. ;； 柱温为 %* I ； 进样 量： #* ? * " ’ 。 原 儿 茶 酸、 原儿 茶醛、 咖啡酸和丹参酮!" 的保留时间分别为 ’. )- ， -. *, ， ). )* ， #’. & #<1 。色谱图见图 # 。
（ $ $ 西北大学分析科学研究所 陕西省电分析化学重点实验室，陕西 西安 A$""-/ ； ! $ 西北大学生命科学学院，陕西 西安 A$""-/ ） 同时分离和测定复方丹参片 摘要： 建立了电化学检测器与二极管阵 列 检 测 器 联 用 的 液 相 色 谱 （ &’()*+),*,-, ） 中原儿茶酸、 原儿茶醛、 咖啡酸和 丹 参 酮 ! - 等 0 种 成 分 的 分 析 方 法。 采 用 ."/012 34*) $4 柱 （ $#" 55 I 0J - 55 #J " " 5 ） ， 以甲醇和 "J 0 8 磷酸为流动相 （ 流速 $J " 5( 9 56: ） 进 行 梯 度 洗 脱； +), 检 测 电 压 "J A ! ， ,-, 检 测 6$ 7$ ， 波长 !A" :5 ， 柱 温 ," ; 。 实 验 结 果 表 明， 原 儿 茶 酸、 原 儿 茶 醛、 咖 啡 酸 和 丹 参 酮 ! - 质 量 浓 度 分 别 为 "J , . /J " 5< 9 ( ， $J $ . #0J " 5< 9 ( ， $J $ . $$J $ 5< 9 ( 和 #J ! . #!J " 5< 9 ( 时与其峰面积呈良好的线性关系 （ 线性相关系数均高 于 "J /// ） ， 原儿茶酸、 原儿茶醛、 咖啡酸和丹参酮 ! - 的平均回收率 （ ! K -） 分别为 /AJ 4 8（ 相对标准偏差 （ =3, ） 为 !J $# 8 ） ， /4J ! 8（ =3, 为 !J "A 8 ） ， /AJ - 8（ =3, 为 !J $4 8 ） 和 /AJ ! 8（ =3, 为 !J "A 8 ） 。 该 法 同 时 利 用 了 +), 和 ,-, 的优点， 是一种快速、 灵敏、 准确的分析方法， 可以为复方丹参片的质量控制提供科学依据。 关键词： 高效液相色谱 * 电化学检测 * 紫外检测法； 原儿茶酸； 原儿茶醛； 咖啡酸； 丹参酮 ! - ； 复方丹参片 中图分类号： >-#4H H H 文献标识码： - H H H 文章编号： $""" *4A$, （ !""# ） "- *"-!- *"0
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