机能学实验设计书

限定条件设计实验项目书

项目名称：胰岛素所致低血糖休克及药物和激素对

血糖的影响

项目组班级： 2011级临床17班第三组

项目完成人：李星李秀凤李沛李涛

完成时间： 2014年3月14日

【实验目的】学习检测血糖的方法，同时观察胰岛素及药物和激素对血糖的影响，从而加深理解药物和激素影响血糖的机制。

【实验原理】胰岛素的是胰岛β细胞所分泌的一种激素，其主要生理功能是调节血糖代谢，既能增加血糖的去路，又能减少血糖的来源，因此是血糖浓度降低；同时对脂肪和蛋白质的代谢也有调节作用。小鼠注射胰岛素，数分钟内血糖浓度即显著降低，若剂量交大，可导致低血糖休克，发生精神不安，抽搦，而注射葡萄糖溶液或肾上腺素溶液后，小鼠很快能恢复正常。此外，胰高血糖素促进糖原分解和异生，具有升高血糖的作用；糖皮质激素抑制糖的利用，促进糖原异生，具有升高血糖的作用；甲状腺素促进糖的吸收和糖异生，也可升高血糖；生理剂量的生长激素能促进胰岛素的分泌，具有降低血糖作业，而过量的生长激素则抑制糖的作业，具有升高血糖的作用。

【实验动物】小鼠

【药品与器材】生理盐水，胰岛素针剂，20%葡萄糖溶液，1：10000肾上腺素溶液，胰高血糖素针剂，糖皮质激素针剂，甲状腺素针剂，生长激素针剂，血糖检测仪，小鼠手术器械，纱布，注射针头，注射器，鼠笼。

【实验步骤】

1. 选取30只体重在18-22g之间的健康小鼠作为实验对象；实验前小鼠禁食6h，不禁水，以避免食物引起血糖波动导致实验结果不准确。

2.分组：随机选取5只小鼠做胰岛素所致低血糖休克实验，另取5只做药物和激素对血糖影响的实验。

3.标记→称重→给药→观察结果记录数据。所给药物、注射部位、药物浓度见表1，剂量均为0.1ml／10g。给药完成后按时间间隔检测血糖值。

【观察项目及数据记录】

表1 胰岛素和药物及激素对小鼠血糖影响数据记录表

组别注射部位药物浓度血糖浓度随时间（min)变化

0（给药前） 5 10 20 40

1 腹壁皮下 NS

2 腹壁皮下低浓度胰高血糖素 1u/kg

3 腹壁皮下 G

4 腹壁皮下高浓度胰高血糖素（4u/kg）肾上腺素（1:10000）记录恢复时间

5 腹壁皮下记录休克时间 NS

6 腹壁皮下胰高血糖素 0.1mg/ml

7 腹壁皮下糖皮质激素 5mg/ml

8 腹壁皮下甲状腺素 40mg/ml

9 腹壁皮下生长素（生） 0.05u/ml

10 腹壁皮下生长素（高） 0.1u/ml

注：1由于小鼠尾静脉注射困难，所以采取腹壁皮下诸神，注射后揉搓加快吸收。

2尾部采血时用热水浸泡尾巴加快血液循环，有利于釆血。

【数据处理】

1 绘制曲线图，观察注射不同药物和激素的小鼠血糖随时间的变化。

2 用Excel软件计算各组血糖最值的均数和标准差（SD），并进行t检验，观察与对照组差别的显著性。

【注意事项】

1. 注意胰岛素的用量，严密观察低血糖反应，痉挛出现时间及表现形式，痉挛多表现为前后肢僵直性抽搐，同时伴躯体旋转运动。

2. 一旦出现低血糖现象应立刻注射G和肾上腺素解救，以防小鼠死亡。

3. 小鼠尾部采血尽量少取，但要注意血滴必须完全覆盖测试区，血糖检测仪在90s 内若未作任何操作便会自动关机。若自动关机时，已将血滴在试纸上，则弃用该试纸，用新的试纸重新测试。

4. 避免在直射的阳光下测试，移动电话等强磁场环境也会导致血糖仪不能正常工作，应予以避免。

5. 血糖检测仪的血糖测定范围在 0.6~33.3mmol/L（10~600mg/dl）。过高或过低报错。分别记为<0.6 或>33.3mmol/L 即可。

6. 尽量节约试纸。

7. 小鼠尾尖取血时，应先用 45℃~50℃温水浸泡小鼠尾部。

8. 在注射完药物后即开始计时。

【可行性分析】

1.本组实验小鼠共10只，数量少适合一个实验（4-5人）操作。

2.实验样本容量为一个班级（六组）或一个年级合计数量，样本容量足够，可进行t检验，得出结果。

3.实验过程简单，思路清晰，且用时短（两小时左右）适合本科生操作。

【思考题】

1. 注射胰岛素为什么会引起低血糖性休克？

2. 为什么注射胰岛素后小鼠会发生精神不安、搐搦？而静脉注射葡萄糖溶液或肾上腺素溶液后，小鼠为什么又能很快恢复正常？

3. 进行胰岛素所致低血糖休克实验应注意什么？