柴胡疏肝散对急性胃溃疡模型大鼠行为学及胃组织学的影响

2012年3月

山东中医药大学学报

第36卷第2期

中医学和现代医学均认为情绪变化可以导致胃肠运动和吸收的改变，但现代医学从心理应激角度解释这种过程和病理生理机制［1］，而中医学从肝脾不和、肝气犯胃等予以概括阐述。临床上，以疏肝理气法为主治疗胃肠道疾病具有一定的疗效，但其具体机制尚不清楚［2］。本实验以不可预知性躯体刺激制作大鼠急性胃溃疡模型，通过观察柴胡疏肝散对大鼠行为学及胃组织学的影响，了解情志—胃溃疡，情志—肝—脾胃的关系，探索中医证的本质。

1材料与方法1．1材料清洁级Wistar 雌性大鼠24只，体质量180～220g 左右，购于南方医科大学实验动物中心（合格证号：scxk 粤2006-0015）。柴胡疏肝散（按

《景岳全书》原方比例调配，药材购于南方医院中药房）：柴胡60g 、陈皮60g 、白芍45g 、枳壳45g 、川芎45g 、香附45g 、甘草（炙）15g ，加10倍于药材量的水浸1h ，煎煮两次30min ，过滤，去渣，合并滤液予60℃恒温箱里浓缩蒸发，制成1g /mL ，存冰箱备用。

1．2方法24只大鼠适应性喂养3d 后，称质量，标记，完全随机分为正常组、模型组、柴胡疏肝散组（中药组）3组，每组8只，除正常组外，其余2组参阅文献［3-4］并加以改进，给予大鼠多种不可预知的应激刺激制作急性胃溃疡模型。采用的应激刺激包括：束缚制动4h /d ，4℃冰水中游泳5min ，电击

30次，夹尾巴3min ，束缚1周后，第2天给予不可

预知的刺激3次（其中每次随机刺激均包括冰水游泳、电击及夹尾，每次间隔2h ），造模时间8d ，中药组大鼠按10mL /kg 中药灌胃，每天1次，正常组、模型组以生理盐水灌胃，造模前每组均提前灌胃7d 。1．3行为学观察

1．3．1一般情况通过动物的皮肤毛发、情绪反应、

行为状态、兴奋程度、活跃状况、睡眠、体质量、饮食等进行一般情况的观察。

1．3．2旷场实验分别于实验第0天和第8天进

行，旷场实验箱100cm ×100cm ×50cm ，周壁底面为黑色，底面用白线划分为面积相等的25块，沿墙格称外周格，其余为中央格［5］。操作者握住大鼠尾根部1/3处，小心放入旷场正中格，观察3min 。①水平得分：动物穿越底面方块数为水平活动得分（四爪均进入的方格方可记数，为水平运动得分）；②垂直得分：直立次数为垂直活动得分（两前爪腾空或攀附墙壁，为垂直运动得分）。每只动物造模结束后进行1次测定，每次3min ，比较各组得分差异。

1．3．3糖水消耗实验实验在安静的房间内于第0

天和第8天进行。每笼放置2瓶装有1%蔗糖水的小瓶，24h 后换为每只大鼠1瓶蔗糖水和1瓶纯水，

1h 后取走此2瓶并称质量［6］，以此来训练大鼠适应

含糖饮水，其余操作同前，计算总液体、糖水与纯水消耗量及糖水偏爱百分比［偏爱百分比=（糖水消耗/总液体消耗）×100%］。大鼠糖水消耗量与糖水偏爱百分比较正常组下降，说明动物对幸福事件反应能

柴胡疏肝散对急性胃溃疡模型大鼠

行为学及胃组织学的影响

吕红伟，李

靖，陈

淳，吕志平

（南方医科大学中医药学院，广东广州510515）

［摘要］目的：观察柴胡疏肝散对急性胃溃疡模型大鼠行为学及胃组织学的影响。方法：将大鼠随机分为正常组、模型组、柴胡疏肝散组（中药组），采用不可预知性刺激制作大鼠急性胃溃疡模型，观察柴胡疏肝散对大鼠行为学、胃组织学及溃疡指数的调节作用。结果：造模成功后，与正常组比较，模型组及中药组大鼠糖水消耗、垂直运动和水平运动均显著下降（P <0．05），强迫游泳中静止时间显著增加（P <0．05）；与模型组比较，柴胡疏肝散可以增加大鼠的糖水摄取百分比、垂直和水平运动，减少强迫游泳实验中大鼠静止时间，但无统计学意义（P >0．05），可降低溃疡指数（P <0．05）；模型组大鼠胃残留食物较多，均可见数个糜烂出血点，中药组亦可见残留食物、糜烂出血点，但数量、程度均较模型组轻。结论：柴胡疏肝散能减轻急性应激大鼠抑郁状态，并改善胃组织学，减少溃疡指数，具有一定的抗应激作用。

［关键词］柴胡疏肝散；急性应激；大鼠行为学；胃组织学［中图分类号］R285．5

［文献标识码］A

［文章编号］1007-659X （2012）02-0150-03

［收稿日期］2011-08-05

第36卷第2期

山东中医药大学学报

Vol．36，No．22012年3月JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY OF TCM Mar .2012150

2012年3月第36卷第2期

力下降，快乐体验的能力缺乏。

1．3．4强迫游泳实验参阅文献［7］，在造模前测试

基础值，第1天将大鼠放入高40cm、直径18cm的

有机玻璃圆筒内，内含15cm深的水（水温25℃），

15min后取出，用吹风机烘干；第2天（24h后），将

大鼠再次放入该圆筒内，记录5min内大鼠静止时

间（大鼠仅轻微摆动四肢以保持头部露出水面评判

为静止状态，呈现静止状态的时间为静止时间）。于

实验前后分别进行1次5min测试，记录静止时间。

1．4胃组织学观察及溃疡指数的计算见表1。末

次刺激2h后处死大鼠（术前禁食不禁水24h），剖

腹取胃，结扎幽门、贲门，向胃内注入10%甲醛溶

液8mL，摘出整个胃并置于10%甲醛溶液中固定

10min。沿胃大弯剪开，冰生理盐水冲洗后展开平铺，观察胃大体病理改变，用分规则和游标卡尺测出溃疡最大直径（长度），与直径垂直的最宽距离（宽度），二者乘积即为溃疡面积，深度按大于或小于2mm计算。溃疡体积用溃疡指数［8］表示，分10级。1．5统计学处理实验结果均用平均值±标准差表示，采用SPSS13．0软件统计包处理，进行两样本t 检验，多个样本均数之间比较的one-way ANOVA方差分析，以P<0．05作为具有显著性差异。

2结果

2．1一般情况随机刺激第1次，实验动物兴奋，易激怒，互相厮打，尖叫，活跃，饮水摄食减少，大便量多，颜色较深，呈颗粒状；刺激3次后模型组出现精神萎靡，靠边扎堆状睡觉，打斗及尖叫减弱，反应迟钝，毛发不顺，饮食减少，大便变软且稀少，而中药组上述表现不显著。2．2各组大鼠体质量变化比较见表2。经束缚1周和3次不可预知的刺激后，与正常组比较，模型组、中药组的体质量明显下降（P<0．05），与模型组相比，中药组体质量略重，但无明显性差异（P>0．05）。

2．3各组大鼠旷场实验得分比较见表3。经束缚1周和3次不可预知的刺激后，模型组大鼠旷场实验中的水平运动、垂直运动得分较正常组明显下降，具有显著性差异（P<0．05）；而中药组大鼠水平运动得分及垂直运动得分均高于模型组，但无显著性差异。

吕红伟等：柴胡疏肝散对急性胃溃疡模型大鼠行为学及胃组织学的影响

表1大鼠胃溃疡指数的计算

面积（A/mm2）

深度

≤2mm>2mm

0--

1～412

5～923

10～1434

15～1945

20～2456

25～2967

30～3478

35～3989

40910

表2各组大鼠体质量变化比较（x±s，n=8）m/g

实验前实验后

正常组202.25±10.35213.13±9.64

模型组204.50±11.40189.00±11.39*

中药组202.38±10.72191.88±11.01*

与正常组比较*P<0.05

表3各组大鼠旷场实验得分比较（x±s，n=8）分实验前水平运动实验前垂直运动实验后水平运动实验后垂直运动正常组72.88±12.7215.75±4.2772.13±11.7516.63±3.74

模型组74.13±10.7217.88±3.5641.00±7.67* 6.38±2.20*

中药组72.13±9.9416.00±4.4149.25±7.13*7.75±1.28*与正常组比较*P<0.05

2．4各组大鼠糖水消耗差异性比较见表4。给予刺激后，模型组糖水消耗量较正常组减少，普通水稍增加，总液体消耗减少，但无显著性差异；模型组糖水偏爱百分比显著下降（P<0．05），与模型组相比，中药组糖水消耗量增加，普通水减少，总液体消耗增加，糖水偏爱百分比提高，但无显著性差异（P>0．05）。2．5各组大鼠强迫游泳实验静止时间比较见表5。给予大鼠1周束缚及3次不可预知的应激刺激后，模型组大鼠的静止时间较正常组明显延长（P<0．05），中药组预防性给药8d后，与模型组比，减少大鼠的静止时间，但无显著性差异（P>0．05）。

2．6各组大鼠胃组织学、溃疡面积、溃疡指数比较正常组胃黏膜无明显充血、水肿、糜烂等病变。模型组大鼠胃黏膜残留食物较多，肉眼可见数个糜烂出血点，局部充血，见图1。中药组亦可见黏膜充血，糜烂出血点，但其数量、程度均较模型组轻，见图2。中药组较模型组能明显减少大鼠胃溃疡指数，差异具有统计学意义（P<0．05）。见表6。

3讨论

本研究采用束缚加不可预知性刺激诱导大鼠应

151