实验室诊断详解

于血沉管中加入抗凝剂（草酸钠0.015~0.02g， 枸橼酸钠粉末0.04~0.05g）,自颈静脉直接采血 至刻度“0”处，立即充分混合，于室温垂直立 于试管架上，镜15、30、45、60min各观察一 次，并记录红细胞沉降的数值。
血液检验
血红蛋白测定
红细胞遇酸溶解，游离出血红蛋白， 并被酸化为褐色的酸性血红素，稀释 后与标准色柱比色，即可求得血红蛋 白的含量。
通常用肝素粉剂配成1g/L水溶液。取0.5ml置小瓶内 ，放于37～50℃中烘干后贮于冰箱内保存。能使5ml 血液不凝固，肝素抗凝剂应及时使用，放置过久易 失效。 怀疑传染病时，采血应防止到处流散，检后残余血 液及所用器皿应进行消毒处理。
血液检验
红细胞沉降率测定 魏氏法
魏氏血沉管长30cmBaidu Nhomakorabea内径2.5mm 管上有 0~200 的刻度，每一刻度 的距离为1mm，其溶积为1ml。
先向 10ml 刻度试管中加入 3.8% 枸橼酸 1ml ， 再自静脉采血4ml，颠倒混合数次，然后用魏 氏血沉管吸取抗凝剂至刻度 0处，擦去管外血 液，在室温条件下，垂直放于血沉管架上， 经15、30、45、60min，分别观察并记录细胞 沉降数值。
血液检验
红细胞沉降率测定 “六五”型血沉管法 “六五”型血沉管法内径 0.9cm，全长17~20cm，管上 有100个刻度容积为10ml。
透明度 盛尿液于玻璃容器内，透光观察。
尿常规检查内容
尿色 正常尿为深黄色或淡黄色。病理情况下有红 尿，是泌尿系统出血、肌红蛋白尿或血红蛋 白尿；尿呈黄绿褐色是胆红质尿、尿胆素原 尿的特征。
尿气味 尿发氨臭，是膀胱炎、膀胱麻痹的表现，是 由于细菌作用，使尿液分解产生氨的结果；尿发 腐败臭，是膀胱、尿道有溃疡、坏死或化脓性炎 症，由于蛋白质腐败分解而发生；
第四章
实验室检验技术
第一节 血液检验
1、血液样本的采取 采血的部位和方法，根据检验的项目、所 需血量和动物种类的不同，可分为毛细血 管采血、静脉采血和心脏采血。
静脉采血法 犬、猫可于小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧 皮下静脉采血。局部剪毛消毒，用止血带扎住采血部上端， 毛细血管采血法 除血沉测定和红细胞压积测定需 流出的第一滴血，可用于制作血片，然后用干 使静脉怒张，用消毒、干燥的注射器接上针头，针头斜上面 较多量血液外，其他各项测定均可在耳尖、耳缘 棉球擦去局部的剩余血液，用流出的第二滴血 刺入静脉采血，待抽至所需量后，先放松止血带，再用消毒 及耳静脉处按毛细血管采血。采血前先剪毛，酒 棉球按住伤口，拔出针头。除去针头，将血液缓缓注入清洁 液作红、白细胞计数和血红蛋白测定，若利用 精棉球消毒，待酒精挥发后，用消毒的干燥的针 的试管内。需抗凝血液时，试管内加抗凝剂，并立即混匀， 第三滴血时，仍要将第二滴血擦干，否则流出 头迅速刺入 以免凝固。 2~3mm深，让血液自然流出，且勿挤
的血不能形成滴状，不易吸取。 压以免混入过多组织液。
血液检验
（1）．后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢 内侧皮下头静脉采血 （2）．股动脉采血 （3）. 心脏采血同大、小鼠心脏采血 （4）．耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血
采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以 及动物种类。 凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红 蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等， 可刺破组织取毛细血管的血。
磷酸铵镁结晶（三重磷酸盐） 其特征为无色而两端带 碳酸钙 马尿中含有大量，是马尿的正常成分。其结 有斜面的三棱角体或为六角、多角棱柱或棺盖状结晶， 晶多为园形有放射线闪光，大的结晶呈黄色；有时可 偶有雪花或羽毛状的，易溶于盐酸及醋酸中，但不溶于 见哑铃状、饼干样或“十”字无色小晶，加醋酸即产 硷性液和热水。新采取的尿中，若发现有磷酸铵镁结晶， 生二氧化碳气泡而溶解。草食兽无碳酸钙时，说明尿 表示尿在膀胱或肾盂中，由于细菌作用，尿素被发酵分 液为酸性，是病理表现。见于骨软症或胃肠炎。若病 解产生氨，氨与磷酸镁结合的结果。见于膀胱炎、膀胱 畜尿中重新出现碳酸钙时，是病势好转的象征。 麻痹及肾盂炎。
血液检验
血红蛋白测定
血红蛋白增高 见于各种原因引起
的血液浓缩，如腹泻、呕吐、大汗、
多尿及肠梗阻等。
血红蛋白减少 见于各种贫血，
血液检验
红细胞计数
红细胞计数是将一定量的供检血液经一定倍数 稀释后，计数一定容积的红细胞数，并换算为 每立方毫米血液内含量。
血液检验
红细胞计数
健康动物红细胞数（万/立方毫米）
扁平上皮细胞：细胞大而扁平，核小而圆，细胞边缘稍卷 起，或几个在一起，容易与其他细胞区别。它来自膀胱、 尿道的表层，出现时膀胱、尿道的炎症，但膀胱炎居多。 管型：管型是肾有炎症的标志。当肾患病时，由肾小球滤 出的蛋白质在肾小管内变性凝固或蛋白质与其他成分相结 合形成管型。尿中出现管型时，是肾病的特征。
血红蛋白试纸测定法 器材应备有测定血红蛋白试纸 沙利氏血红蛋白测定法 沙利氏血红蛋白计由比色架 和 4g%~15g% 血红蛋白标准比色板。测定时，取试 、标准比色柱、血红蛋白测定管及血红蛋白吸管组成 纸一条，吸附被检血液一小滴，待血完全浸透后， 。测定管有两个刻度标志，一侧的 2~24刻度表示 立即置于所附标准色板的小孔下，肉眼与色板色泽 100ml 进行比较，选择颜色相同或近似者，即得 血液中含有的血红蛋白克数；另一侧有 100ml 20~160 血液 所含血红蛋白的克数。 刻度，表示 100ml血液中所含血红蛋白的百分数。
双草酸盐抗凝剂 草酸钠 0.8g 草酸铵 1.2g 蒸馏水 加至100ml 溶解后吸取0.5ml，加入供采血试管或小瓶中，置干 燥箱内（温度不超过80℃）烘干备用，可供5ml全血 抗凝。
血液检验
血液的抗凝
乙二胺四乙酸二钠（ EDTA － Na2 ）每 10mg 可使 5ml 全血抗凝；或配成 10% 的溶液，每 2 滴可使 5ml 全血 抗凝。可适用于一般的血液学检查，特别是血小板计 数，但因为影响血小板聚集和白细胞吞噬功能，不适 合于血象及血小板功能检查。
3.8%枸橼酸钠溶液 每0.5ml可使5ml全血抗凝。 常用于血沉、凝血因子和血小板功能检查。因 其毒性小又可作为血液保养液。但不适用于血 液化学检验。由于抗凝剂溶解缓慢，故只能配 成溶液，不能用粉剂。
血液检验
血液的抗凝 肝素 肝素价格最贵，其优点是抗凝作用强，不影响 血细胞的体积，不致溶血等，可用于多种血液生物化 学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细 胞聚集和血小板减少，故不适用于白细胞和血小板计 数，也不适用于血涂片检查，因其在瑞氏染色时会出 现蓝色背景，更不能用于凝血象的检查。
无机沉渣检查 尿中无机盐，主要指各种无机盐结晶及一些无机结晶物。 尿中如出现大量无机盐沉渣，则是病理现象。 尿中无机盐沉渣，随着尿酸碱度不同而不同。碱性尿无机 盐是碳酸钙；酸性尿无机盐沉渣是草酸钙临床检查具有意 义的是：草酸钙，为四角八面体，呈信封状，区光力强， 易溶于盐酸而不溶于醋酸，马尿含有少量，若多量出现时， 是慢性肾炎或代谢病之症。
4.尿液中出现尿蛋白、肾上皮细胞、管型，临床上病畜
好站立，运动时拱腰，后肢迈步强拘，碎步行走，尿少 而色浓，胸、腹皮下常浮肿，主动脉压升高，主动脉口 第二心音增强，直检肾脏肿胀而敏感的，是急性肾炎的 特征。 5.尿中出现尿蛋白、颗粒或透明管型，临床表现逐渐消 瘦，尿多，病畜食欲减少，易疲劳出汗，直检肾脏坚硬 而凸凹不平时，是慢性肾炎的特征。
当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，
若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓 塞而影响整条静脉。 研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐 代谢紊乱、血液pH值以及 K+、Na+、Cl-离子浓度， 必须采取动脉血液。
采血时要注意
采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在 25～28℃，冬季，15～20℃为宜； ② 采血用具有采用部位一般需要进行消毒； ③ 采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥； ④ 若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入 抗凝剂。
红细胞增多 可见于因各种原因引起的血液浓缩，如大出汗、胸 膜炎和腹膜炎的渗出期等。 红细胞减少 多见于各种类型贫血
血液检验
白细胞计数
用冰醋酸将红细胞破坏后，计算 每立方毫米内白细胞总数。
健康动物白细胞数（个/立方毫米）
白细胞增多 可见于多数细菌性感染和炎症，如猪丹毒、猪肺疫、 结核、马鼻疽、马腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病时以 白细胞的显著增多为特征。 白细胞减少 主要见于某些病毒性传染病，某些重度疾病的后期； 长期应用某些药物（如氯霉素等）。
满尿液的，可确诊为尿道炎。
2.尿液中出现尿蛋白，扁平上皮细胞或磷酸铵镁结 晶，临床表现尿意频频，屡呈排尿姿势，排尿时疼 痛不安，仅排出少量尿液或尿液淋漓排出时，直检 膀胱胱空虚而疼痛的，可确诊为膀胱炎。
3.尿液中出现扁平上皮及磷酸镁结晶，临床表现排尿失
禁或淋漓，直检膀胱充满尿液，压之尿液被动流出，停 止压迫，排尿即停止。是膀胱麻痹的特征。
尿液检查结果的分析判定
红尿
红尿即尿呈红色，除泌尿系统出现出血
性炎症外，肌红蛋白和血红蛋白尿病，尿也 呈红色，应注意鉴别。
尿液检验结果必须结合临床症状才能作出正确判定
1.尿中出现蛋白质、尾状上皮细胞，而临床表现尿
意频频，屡呈排尿姿势，排尿时呻吟不安，仅有少
量淋漓排出，插入导尿管而疼痛不安，直检膀胱充
①
取少量血，犬猫耳静脉。 取中量血： ａ．后肢外侧皮下小隐静脉
ｂ．前肢内侧皮下头静脉
ｃ．颈静脉 取大量血
ａ．股动脉、颈动脉
ｂ．心脏
最多狗100ml、猫10ml
血液的抗凝
草酸钠 是常用的抗凝剂，每1.5~2.0mg可抗凝1.0ml 血液，可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响 ，故不能用红细胞压积测定，如测定红细胞压积时， 可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。
血液检验
白细胞分类计数
以百分率表示各种类型白细胞间 的数量关系，称为白细胞分类计 数。
血液检验
临床意义
白细胞增多 嗜中性白细胞增多：见于肺炎及化脓性感染等。 嗜酸性白细胞增多：见于某些蠕虫病、过敏性疾病 及湿疹等。 淋巴细胞增多：见于结核、鼻疽、布氏杆菌病。 单核细胞增多：见于败血性疾病，某些梨形虫病及 李氏杆菌等。
白细胞减少 嗜中性白细胞减少：见于病毒性传染病、药物中毒（ 如长期服用抗生素）、各种疾病的垂危期。 嗜酸性白细胞减少：见于败血症、某些病毒病及牛梨 形虫病等。 淋巴细胞减少：多为嗜中性白细胞增多而造成的相对 性变化。
血液检验
第二节 尿液常规检查
尿 液 检 验
尿常规检查内容
尿液一般物理性状的检查，包括透明度、尿色及气味等。 尿液一般化学性状的检查，包括酸碱度、尿蛋白质、血液、血红 蛋白的检查。
尿液检查结果的分析判定
尿液检出蛋白质时，可认为是泌尿系统的疾病，但到底是 什么部位发病或是什么病，还得经过尿沉渣的检查。
肾脏本身疾病引起的尿蛋白，则尿沉渣可检出肾上皮细胞及管
型。 尿路疾病引起的尿蛋白，则尿沉渣可检出尾状上皮细胞， 扁平上皮细胞或磷酸铵镁结晶，而无肾上皮细胞及管型。 其他疾病引起的尿蛋白，如热性病等则具有原发病症状， 且尿蛋白出现时间短，随原发病的治愈而消失。
尿常规检查内容 尿酸碱度 犬猫动物食肉多，尿呈酸性。 尿蛋白质 正常尿含微量蛋白质，但用一般方法检查 不出来，若尿中证明含有蛋白质时称为蛋白 尿。见于泌尿系统炎症及热性病。 尿中血液 尿中含有血液或血红蛋白，称为血尿。 尿液中含有多量红细胞时，见于肾及尿路出 血； 尿中糖
有机沉渣检查
红细胞：尿中出现红细胞，是泌尿系统出血的特征。红细胞的形态， 在新鲜尿液呈圆形淡红绿色；酸性尿中，则红细胞皱缩，边缘呈锯 齿状；碱性尿中，红细胞膨胀或破坏，呈现阴影。 白细胞：正常尿中仅有白细胞，尿液中最常见的是中性白细胞，而 淋巴细胞及单核细胞均少见。尿中出现白细胞是肾、膀胱的炎症。 在新鲜尿中其形态比红细胞大有核，易识别；酸性尿中其形态比较 完整，加稀醋酸后其核更明显；碱性尿中则膨胀而清晰。 肾上皮细胞：比白细胞约大1/3，呈圆形，有一个较大的核，细胞质 内有小颗粒，易识别。若尿中出现多量肾上皮细胞时，是肾实质性 炎症。 尾状上皮细胞：呈梨形或梭形，比白细胞大2—4倍。有一个圆形或 椭圆形的核，这种细胞，来自肾盂、膀胱、尿道粘膜的深层，尿中 出现时是重剧炎症，尿道炎的居多。