抗核抗体PPT课件
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10
ANA阳性核型示意图
11
1、CTD:SLE、RA、SSc、PM/DM、SS、MCTD、 DIL等 2、SLE、SSc、SS的一级亲属中近一半者 3、肺疾病：原发性肺纤维化、原发性肺动脉高
压、石棉肺等 4、肝脏病：慢性活动性肝炎（CAH）、原发性
胆汁性肝硬化（PBC）酒精性肝病、自身免 疫性肝炎（AIH）等
抗核抗体谱及其临床意义
中国医科大学附属第一医院 风湿免疫科 侯平
1
常见的结缔组织病（CTD） 系统性红斑狼疮SLE 类风湿关节炎RA 系统性硬化症SSc 多发性肌炎/皮肌炎 PM/DM 干燥综合征 Sjögren sydrome, SS 混合性结缔组织病mixed CTD, MCTD 重叠综合征overlapping syndrome,OLS 药物性狼疮drug-induced lupus,DIL
5
三 对流免疫电泳法（counter immunoelectrophorsesis, CIE）
ID的改良方法，是其它检测方法的补充试验 四、免疫印迹法（immuno blot test, IBT）
从分子水平测定各种抗体，但不能作滴度测 定 五、酶联免疫吸附法（ELISA） 是一种定量检测法，敏感性高，特异性较强
15
抗DNA抗体及其临床意义 抗脱氧核糖核酸抗体 简称抗DNA抗体。
分为两种。 (一)抗双链DNA(double-stranded DNA)抗体
即 抗ds-DNA抗体。用马疫锥虫间接免疫荧光 方法（TE-IIF），在SLE阳性率40%。 临床意义： 1、是SLE的标志抗体 2、抗体效价的高低与疾病活动程度呈正相关。 3、用于观测SLE病情变化及药物治疗效果。 4、此抗体阳性易致狼疮性肾炎（LN）
9
核膜型（membranous Pattern,M型)核周边着荧 光,中央部淡染。M型与抗双链DNA抗体有关
核仁型（nudedar pattern,N型）仅核仁着色 荧光且与核仁数目一致。N型在SSc多见
着丝点型（centromert pattern） 核内均匀 分布的大小一致的荧光颗粒，无核膜结构。 着丝点型与抗着丝点抗体有关，见于CREST 综合征。
6
抗核抗体（antinuclear antibody,ANA） 抗核抗体（ANA）是指抗细胞核抗原成份的自
身抗体的总称。这是针对细胞核内DNA、RNA、 蛋白质、脂类、酶类或这些物质的分子复合物的 抗体。这些物质并非仅存在细胞核内，也可存在 于胞浆和其它细胞器中，因此，ANA的理解已 不再局限于抗核成份。
ANA是指抗核酸（nucleic acid）和核蛋白 （nucleoprotein）抗体的总称。
7
ANA测定原理和方法 目前常以核质丰富的人喉癌上皮细胞即Hep-
2细胞为底物，用间接免疫荧光法（IIF法）检测 ANA。
8
IIF法ANA阳性常见荧光染色核型
均质型（homegeneous pattern,H型） 核质着色均匀一致—与抗DNA抗体及抗组蛋白 抗体有关斑点型（speckled pattern, S型） 核质呈大小不等的颗粒状或斑点状荧光。 S型与抗ENA抗体有关。
4
自身抗体的检测方法 一、间接免疫荧光法(indirect immunifluores -cence, IIF）
用于检测ANA、ANCA、抗核仁抗体等 敏感性较高，特异性较低 二、 免疫双扩散法（immno diffusion,ID） 用于检测抗ENA抗体等，最为常用。 能直接确定某种抗体，敏感性较强，特异性 较高。
17
抗组蛋白抗体（AHA）
组蛋白是一组与DNA结合的富含赖氨酸和精氨 酸的碱性蛋白。组蛋白由五个亚基组成，即H1、 H2A、H2B、H3和H4。 抗组蛋白抗体（antihistone antibody,AHA） 的荧光免疫核型常呈均质型（H型）。
16
（二）抗单链DNA（single-stranded DNA） 抗体(抗ss-DNA）
1、对疾病的诊断缺乏特异性：在SLE时，其阳 性率为70%，但在其他CTD中（RA、DIL、 SSc、PM/DM、SS、MCTD等）呈阳性，且非 CTD（如CAH、病毒和细菌感染时）也为阳性。
2、临床实用价值不大，故不用于常规检测。
14
抗核抗体谱（ANAs） 一、抗DNA抗体 抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗 体)
抗单链DNA抗体(抗ss-DNA抗体) 二、抗组蛋白抗体（antihistone ntibody,AHA） 三、抗非组蛋白抗体 抗ENA抗体
抗着丝点抗体（ACA） 四、抗核仁抗体 抗RNA聚合酶-Ⅰ抗体
抗核仁原纤维蛋白抗体 抗PM-Scl抗原复合物抗体
12
5、血液病：白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、自身免 疫性血小板减少性紫癜（ITP）、自身免疫性溶 血性贫血(AIHA）等 6、慢性感染：结核菌、麻风杆菌、沙门氏菌、 克雷白杆菌感染；日本血吸虫、锥虫、曼森氏线 虫等 7、其他：Ⅰ型糖尿病、Graves病、多发性硬化， 终未期肾病等（Practical Rheumatology 1995）
13
ANA是自身抗体中的一组抗体。从发现狼疮细 胞（lupus erythematosus cell, LEC）迄今， 已有半个世纪。人们对ANA的认识逐步深入。 目前已发现具有不同临床意义的20余种ANA， 形成了抗核抗体谱（antinuclear antibodies, ANAs）。 根据细胞内各种成份的理化特性和分布部位，将 ANA分为四类。
2
自身免疫性疾病特点 1、患者血中可测到高效价的自身抗体 2、自身抗体造成自身组织器官的病理损伤和功
能障碍 3、病情转归与自身免疫反应强度密切相关 4、多数自身免疫性疾病病情经过呈反复发作与
慢性迁延 5、动物实验可复制出病理模型（如狼疮鼠
lupus mice） 6、疾病的发生有一定的遗传倾向
3
自身抗体 自身抗体是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外 抗 原的免疫球蛋白。 抗细胞内抗原的抗体： 抗核抗体（ANA） 抗细胞浆成份抗体,如抗中性粒细胞浆抗体(ANCA） 抗细胞表面抗原的抗体,如抗RBC膜抗体(Coombs试验） 抗细胞外抗原的抗体—如类风湿因子（RF）
ANA阳性核型示意图
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1、CTD:SLE、RA、SSc、PM/DM、SS、MCTD、 DIL等 2、SLE、SSc、SS的一级亲属中近一半者 3、肺疾病：原发性肺纤维化、原发性肺动脉高
压、石棉肺等 4、肝脏病：慢性活动性肝炎（CAH）、原发性
胆汁性肝硬化（PBC）酒精性肝病、自身免 疫性肝炎（AIH）等
抗核抗体谱及其临床意义
中国医科大学附属第一医院 风湿免疫科 侯平
1
常见的结缔组织病（CTD） 系统性红斑狼疮SLE 类风湿关节炎RA 系统性硬化症SSc 多发性肌炎/皮肌炎 PM/DM 干燥综合征 Sjögren sydrome, SS 混合性结缔组织病mixed CTD, MCTD 重叠综合征overlapping syndrome,OLS 药物性狼疮drug-induced lupus,DIL
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三 对流免疫电泳法（counter immunoelectrophorsesis, CIE）
ID的改良方法，是其它检测方法的补充试验 四、免疫印迹法（immuno blot test, IBT）
从分子水平测定各种抗体，但不能作滴度测 定 五、酶联免疫吸附法（ELISA） 是一种定量检测法，敏感性高，特异性较强
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抗DNA抗体及其临床意义 抗脱氧核糖核酸抗体 简称抗DNA抗体。
分为两种。 (一)抗双链DNA(double-stranded DNA)抗体
即 抗ds-DNA抗体。用马疫锥虫间接免疫荧光 方法（TE-IIF），在SLE阳性率40%。 临床意义： 1、是SLE的标志抗体 2、抗体效价的高低与疾病活动程度呈正相关。 3、用于观测SLE病情变化及药物治疗效果。 4、此抗体阳性易致狼疮性肾炎（LN）
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核膜型（membranous Pattern,M型)核周边着荧 光,中央部淡染。M型与抗双链DNA抗体有关
核仁型（nudedar pattern,N型）仅核仁着色 荧光且与核仁数目一致。N型在SSc多见
着丝点型（centromert pattern） 核内均匀 分布的大小一致的荧光颗粒，无核膜结构。 着丝点型与抗着丝点抗体有关，见于CREST 综合征。
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抗核抗体（antinuclear antibody,ANA） 抗核抗体（ANA）是指抗细胞核抗原成份的自
身抗体的总称。这是针对细胞核内DNA、RNA、 蛋白质、脂类、酶类或这些物质的分子复合物的 抗体。这些物质并非仅存在细胞核内，也可存在 于胞浆和其它细胞器中，因此，ANA的理解已 不再局限于抗核成份。
ANA是指抗核酸（nucleic acid）和核蛋白 （nucleoprotein）抗体的总称。
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ANA测定原理和方法 目前常以核质丰富的人喉癌上皮细胞即Hep-
2细胞为底物，用间接免疫荧光法（IIF法）检测 ANA。
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IIF法ANA阳性常见荧光染色核型
均质型（homegeneous pattern,H型） 核质着色均匀一致—与抗DNA抗体及抗组蛋白 抗体有关斑点型（speckled pattern, S型） 核质呈大小不等的颗粒状或斑点状荧光。 S型与抗ENA抗体有关。
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自身抗体的检测方法 一、间接免疫荧光法(indirect immunifluores -cence, IIF）
用于检测ANA、ANCA、抗核仁抗体等 敏感性较高，特异性较低 二、 免疫双扩散法（immno diffusion,ID） 用于检测抗ENA抗体等，最为常用。 能直接确定某种抗体，敏感性较强，特异性 较高。
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抗组蛋白抗体（AHA）
组蛋白是一组与DNA结合的富含赖氨酸和精氨 酸的碱性蛋白。组蛋白由五个亚基组成，即H1、 H2A、H2B、H3和H4。 抗组蛋白抗体（antihistone antibody,AHA） 的荧光免疫核型常呈均质型（H型）。
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（二）抗单链DNA（single-stranded DNA） 抗体(抗ss-DNA）
1、对疾病的诊断缺乏特异性：在SLE时，其阳 性率为70%，但在其他CTD中（RA、DIL、 SSc、PM/DM、SS、MCTD等）呈阳性，且非 CTD（如CAH、病毒和细菌感染时）也为阳性。
2、临床实用价值不大，故不用于常规检测。
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抗核抗体谱（ANAs） 一、抗DNA抗体 抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗 体)
抗单链DNA抗体(抗ss-DNA抗体) 二、抗组蛋白抗体（antihistone ntibody,AHA） 三、抗非组蛋白抗体 抗ENA抗体
抗着丝点抗体（ACA） 四、抗核仁抗体 抗RNA聚合酶-Ⅰ抗体
抗核仁原纤维蛋白抗体 抗PM-Scl抗原复合物抗体
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5、血液病：白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、自身免 疫性血小板减少性紫癜（ITP）、自身免疫性溶 血性贫血(AIHA）等 6、慢性感染：结核菌、麻风杆菌、沙门氏菌、 克雷白杆菌感染；日本血吸虫、锥虫、曼森氏线 虫等 7、其他：Ⅰ型糖尿病、Graves病、多发性硬化， 终未期肾病等（Practical Rheumatology 1995）
13
ANA是自身抗体中的一组抗体。从发现狼疮细 胞（lupus erythematosus cell, LEC）迄今， 已有半个世纪。人们对ANA的认识逐步深入。 目前已发现具有不同临床意义的20余种ANA， 形成了抗核抗体谱（antinuclear antibodies, ANAs）。 根据细胞内各种成份的理化特性和分布部位，将 ANA分为四类。
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自身免疫性疾病特点 1、患者血中可测到高效价的自身抗体 2、自身抗体造成自身组织器官的病理损伤和功
能障碍 3、病情转归与自身免疫反应强度密切相关 4、多数自身免疫性疾病病情经过呈反复发作与
慢性迁延 5、动物实验可复制出病理模型（如狼疮鼠
lupus mice） 6、疾病的发生有一定的遗传倾向
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自身抗体 自身抗体是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外 抗 原的免疫球蛋白。 抗细胞内抗原的抗体： 抗核抗体（ANA） 抗细胞浆成份抗体,如抗中性粒细胞浆抗体(ANCA） 抗细胞表面抗原的抗体,如抗RBC膜抗体(Coombs试验） 抗细胞外抗原的抗体—如类风湿因子（RF）