侧柏叶炮制方法研究-王志剑,李瑞海

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第16卷 第11期 2014 年 11 月
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 16 No. 11 Nov .，2014
侧柏叶为柏科植物[Platycladus orientalis （L.）
Franco]的干燥枝梢及叶。

其性寒、味苦涩，入肺、肝、脾经，具有凉血止血、生发乌发之功效，可用于治疗吐血衄血、咯血、便血、崩漏下血、血热脱发、须发早
白等症[1]。

本实验以槲皮素为指标，对侧柏叶中生品、烘制品及不同炮制品中槲皮素含量进行测定和比较，为丰富和完善侧柏叶的质量标准和炮制方法提供参考和依据。

1 仪器与试剂1.1 仪器
大连依利特液相色谱仪；UV230Ⅱ紫外可见检测器，EC2006-色谱数据处理工作站，超声波清洗器（天津奥特赛恩斯仪器有限公司），HH-4数显恒温水浴锅（江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司），SF-130B 高速粉碎仪器机（上海冠联制药装备有限公司），DHG-9070A 型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司），ACS-3A 型电子计数秤（上
海友声衡器有限公司），十万分之一电子天平（德国电子天平）。

1.2 材料与试药
侧柏叶购自安徽亳州，经鉴定为柏科植物的干燥枝梢及叶。

槲皮素对照品购于中国药品生物制品检定所（批号：110309）。

甲醇为色谱纯；磷酸为分析纯；水为纯净水。

2 方法与结果2.1 色谱条件
色谱柱为Agilent Eclipse XPB-C 18（4.6 mm×
250 mm，5 μm）；流动相为甲醇∶0.2%磷酸水（55∶
45）；流速1.0 mL·min -1
；检测波长360 nm；柱温30 ℃；进样量20 μL。

2.2 溶液的制备
2.2.1 供试品溶液的制备
精密称取侧柏叶粉末1 g，置于具塞锥瓶中，加入60%甲醇40 mL，再加入5%盐酸溶液50 mL，超声
侧柏叶炮制方法研究
王志剑1，李瑞海2
（1.沈阳市和平区西塔社区卫生服务中心，辽宁 沈阳 110002；2.辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600）摘 要：目的：研究侧柏叶炮制前后槲皮素含量的变化，建立侧柏叶合理的炮制方法。

方法：通过HPLC 法对
侧柏叶中槲皮素的含量进行测定，色谱柱为Agilent Eclipse XPB-C 18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为甲醇：0.2%
磷酸溶液（55∶45）；流速1.0 mL·min -1
；检测波长360 nm；柱温30 ℃；并对侧柏叶的生品、烘制品及不同炮制品中槲皮素进行测定和比较。

结果：槲皮素在0.03~0.52 μg 成良好的线性关系，回收率为97.5%~100.8%，RSD1.22%，槲皮素在烘制品中的含量较传统炮制品高。

结论：所建立的HPLC 法简便可靠、精密度高。

烘制法具有和传统炮制法相接近的结果，提示其作为侧柏叶的炮制法存在一定的可行性。

关键词：侧柏叶；槲皮素；高效液相色谱法；炮制法；烘制法
中图分类号：R282.71.2 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2014) 11- 0043- 03
收稿日期：2014-04-03
基金项目：国家药典委员会国家药品标准科研项目作者简介：王志剑（1975-），女，辽宁复县人，主管中药师，学士，研究方向：中药制剂研究。

通讯作者：李瑞海（1973-），男，山东肥城人，副教授，硕士研究生导师，研究方向：中药活性成分研究工作。

Study of Cacumen Platycladi Leaf Processing Method
WANG Zhijian 1，LI Ruihai 2
（1. Xita Community Health Service Center in Heping District，Shenyang 110002，Liaoning，China；2 College
of Pharmacy of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian 116600，Liaoning，China）Abstract：Objective ：To study the variation in quercetin content before and after Cacumen Platycladi processing and to establish reasonable processing method. Methods ：By HPLC method，we determined the content of quercetin in Cacumen Platycladi，chromatographic column of Agilent Eclipse XPB-C 18（4.6 mm×250 mm，5μm）；the mobile phase of methanol：0.2% phosphoric acid solution（55∶45）；the flow
rate was 1.0 mL·min -1
；the detection wavelength was 360 nm；column temperature was 30℃；and the effect of quercetin on raw Cacumen Platycladi，baking products and its different traditional processed products were determined and compared. Results ：Quercetin in a good linear relationship between 0.03~0.52 μL，the recovery rate was 97.5%~100.8%，RSD=1.22%. The content of quercetin in baked products was higher than that in traditional processed products. Conclusion ：The established HPLC method is simple and reliable with high precision. The baking method has similar results with traditional processing method. It is feasible as a processing method on Cacumen Platycladi.
Key words：Cacumen Biotae；quercetin；HPLC；processing method；baking processing DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2014.11.015
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提取30 min，放冷，过滤，用甲醇定容至100 mL 容量瓶中，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，作为供试品溶液。

2.2.2 对照品溶液的制备
取槲皮素对照品适量，加甲醇制成每毫升含13 μg 的对照品溶液。

2.3 测定法
按色谱条件，取供试品溶液、对照品溶液的各10 μL，注入液相色谱仪中，结果见图
1~2。

图1 槲皮素对照品HPLC
图
图2 侧柏叶供试品HPLC 图
2.4 方法学考察
2.4.1 线性关系考察
精密称取槲皮素对照品溶液适量，以加甲醇溶解制成1.3 mg/mL，分别取0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL 置100 mL 量瓶中，加入甲醇稀释至刻度，摇匀。

精密吸取上述对照品溶液适量，分别量取10 μL，注入HPLC 色谱仪中，记录结果，按上述色谱条件测定，以标准品溶液的进样浓度（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。

结果表明槲皮素标准曲线：Y=2156X-4.1878，r =0.999 9，槲皮素在0.03~0.52 μg 范围内其浓度和峰面积具有良好的线性关系，结果见表1，图3。

表1 线性范围试验结果
项目123456进样量（mg）0.030.070.130.260.390.52
2.4.2 精密度
精密吸取同一对照品溶液重复进样6次，槲皮素峰面积的RSD 为1.13%。

2.4.3 重复性试验
取侧柏叶样品6份，依法平行进样6次，结果其所含槲皮素含量的RSD 为1.30%。

2.4.4 稳定性试验
取侧柏叶供试品溶液在0、2、4、8、12、24 h 时分别进样，结果其所含槲皮素峰面积的RSD 为1.04%，说明其在24 h 内稳定。

2.4.5 加样回收率试验
精密称取同一已知含量侧柏叶供试品溶液5份，分别加入槲皮素对照品1.30 mg，按2.1条件，“2.2”方法，依法测定，计算回收率为97.5%~100.8%，RSD1.22%。

结果见表2。

表2 回收率试验结果
取样量（g）样品含量（mg）对照品加入量（mg）实测总量（mg）回收率（%）平均回收率（%）RSD （%）
1.0039 1.3017 1.30
2.5980 99.70.9910 1.2850 1.30 2.5887100.31.0051 1.3033 1.30 2.5702 97.599.3
1.22
0.9931 1.2877 1.30 2.5980100.81.0032
1.3008
1.30
2.5887
99.1
2.5 药材的制备
2.5.1 传统方法
生品，取侧柏叶，除去杂质，切段；炒黄品，取生品，用文火炒至黄绿色，取出放凉；炒焦品，取生品，用文火炒至焦绿黄色，取出放凉；炒炭品，取生品，置热锅内，用武火炒至表面黑绿色，内部焦褐色，取出放凉。

2.5.2 烘制法
各取生品50 g，分别置于玻璃皿中，编号为侧柏叶5、6、7、8、9、10，于电热鼓风恒温干燥箱内分别于80、100、120、140、180、220 ℃烘制45 min。

2.5.3 侧柏叶外观性状及槲皮素含量
按上述传统方法和烘制法，制得样品，并描述外观性状，并置于干燥器内，在相同温度、湿度条件下放置48 h 后，按前述方法测定含量。

不同侧柏叶样品的外观性状及含量见表3，图4。

表3 侧柏叶外观性状及槲皮素含量
编号传统方法炮制外观性状槲皮素含量（%）编号烘制温度（℃）外观性状
槲皮素含量
（%）1生品表面暗绿色0.121580表面暗绿色0.1252炒黄品黄绿色0.0926100暗绿色0.1513炒焦品焦绿黄色0.0757120黄绿色0.172
4
炒炭品表面黑绿色，
内部焦褐色0.0628140焦绿黄色0.1689180焦绿黄色0.12110220表面黑绿色，
0.091
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2.6 实验结果
从炮制结果发现，炒黄品与120 ℃烘制品、炒焦
品与140 ℃烘制品、炒炭品与220 ℃烘制品具有相近的外观性状，而且槲皮素含量都相对传统炮制品高。

其中烘制法中120 ℃烘制品比生品提高较多。

3 讨 论
本实验建立了测定侧柏叶中槲皮素含量的HPLC 方法，槲皮素在0.03~0.52 μg 范围内线性关系良好，r =0.999 9，方法准确可靠，精密度高，可作为侧柏叶的质量控制的方法。

试验中尝试了甲醇-乙腈-0.2%磷酸水溶液[2]、甲醇-0.5%磷酸水溶液[3]、甲醇-0.2%磷酸水溶液[4]。

在甲醇-0.2%磷酸水溶液系统中，槲皮素的分离度及对称性均良好，所以选择该系统。

通过不同比例的选择确定55∶45的比例分离效果最好，保留时间适中。

实验结果表明，传统炮制过程中，由于炒黄品、炒焦品、炒炭品炮制原理实质是火力不同，温度高则
槲皮素含量逐渐降低，说明加热过程对化学成分有
破坏作用。

而烘制法温度可控，炮制后外观性状佳，质量均一。

而且在100~140 ℃范围内，出现了槲皮素含量增加情况，说明存在槲皮苷转化槲皮素的可能，这一现象也得到了很多实验的支持[5]，以140 ℃以上的温度进行烘制，槲皮素含量有所下降。

由于槲皮素是侧柏叶的主要成分之一，利用烘制法对侧柏叶进行炮制，利于增强侧柏叶活性作用，具有一定的可行性。

◆
参考文献
[ 1 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[ S ] .北京：中
国医药科技出版社，2010：200.[ 2 ] 吴怀恩，甄汉深，韦志英，等.侧柏叶不同炮制品中槲皮苷与槲
皮素的含量测定[ J ] .时珍国医国药，2009，20 ( 2 )：354-356.[ 3 ] 仲英，孙立立.不同产地侧柏叶中槲皮素的含量测定[ J ] .中
国中医药科技，1999，6 ( 4 )：241-242.[ 4 ] 梁敬仪，罗杰，尹仁杰，等.HPLC 法同时测定脑心清片中槲皮
素和山柰素的含量[ J ] .今日药学，2012，22 ( 8 )：460-463.[ 5 ] 陈学松，张涛.侧柏叶不同炮制品中槲皮苷含量的比较[ J ] . 中国中药杂志，2006，31 ( 10 )：847-848.
妇炎凝胶贴剂是长期临床实践总结的治疗女
性慢性妇科炎症的脐穴贴剂，主要用于湿热瘀阻所
致的腰腹疼痛、带下黄稠、外阴骚痒及慢性盆腔炎、
阴道炎患者。

该处方主要由黄连、黄柏、附子、当归、
妇炎凝胶贴剂的制备及质量标准研究
李彩霞，陈小琴，张璐
（南方医科大学中医药学院，广东 广州 510515）
摘 要：目的：建立妇炎凝胶贴剂质量标准。

方法：用薄层色谱法对处方中的黄连、黄柏、附子、当归、牡丹皮、
栀子、茯苓、白术进行定性鉴别；用高效液相色谱法同时测定黄连和黄柏中盐酸小檗碱的含量。

结果：在薄层色谱中，供试品溶液色谱在与对照药材色谱相应位置上出现相同颜色的斑点，阴性无干扰。

在高效液相中，盐酸小檗碱
在 0.010 43~0.260 75 g·L -1
范围内线性关系良好（r =0.999 9），平均回收率为97.23%，RSD 为1.0235%（n =6）。

结论：定性、定量方法简便、可靠、准确，能有效控制妇炎凝胶贴剂的质量。

关键词：妇炎凝胶贴剂；薄层色谱法；高效液相色谱法；盐酸小檗碱；质量标准
中图分类号：R286 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2014) 11- 0045- 05
收稿日期：2014-04-05
作者简介：李彩霞（1992-），女，广东广州人，本科学生，研究方向：中药化学成分提取分离纯化工艺研究。

通讯作者：张璐（1977-），女，湖北孝感人，高级实验师，学士，研究方向：中药制剂工艺研究与质量标准控制。

Study on Quality Standards for Fuyan Hydrogel Patch
LI Caixia，CHEN Xiaoqing，ZHANG Lu
（College of TCM，Southern Medical University，Guangzhou 510515，Guangdong，China）
Abstract：Objective ：To establish the quality standard of Fuyan hydrogel patch. Method ：Coptidis
Rhizoma，Cortex Phellodendri，Radix Aconiti Lateralis Preparata，Radix Angelicae Sinensis，Cortex Moutan Radicis，Fructus Gardeniae，Poria and Rhizoma Atractylodis Macrocephalae were identified by TLC. Coptidis Rhizoma and Cortex Phellodendri in Berberine were determined by HPLC. Result ：The characteristic for identification was with clear spots and good separation by TLC. The linear correlation of berberine was good in the range of 0.010 43g~0.260 75g·L -1，r =0.999 9. The average recovery was 97.23% and RSD was 1.0235%（n =6）. Conclusion ：The methods are available with a good reproducibility and can be used for the quality control of Fuyan hydrogel patch．
Key words：Fuyan hydrogel patch；TLC；HPLC；berberine；quality specification DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2014.11.016。