动物病原学：寄生虫病实验四

实验四鸡球虫的药物驱虫试验

一、内容

1.鸡球虫的人工感染

2.药物驱虫效果的评价

二、参考资料

1、试验准奋工作

选用20 日龄左右的健康公雏。在试验用雏出壳后就应加强饲养管理，防止雏鸡自然感染球虫。试验场地、饲养笼具要做好消毒和杀灭卵囊工作，工作人员进出亦应严格消毒，防止人为地传播卵囊。供试鸡使用前应绝对禁用含有抗球虫活性药物的饲料，直至试验结束。

2、试验鸡分组

试验开始时，分别称量雏鸡的个体重，其差别应在5-8g以内，尽量挑选体重接近的，以10 只（或多一些）为一组，每组总体重应基本一致。根据试验药物的多少及试验剂量要求分别设若干个给药组，一个感染不给药组（感染对照组）、一个不感染不给药组（空白对照组），每个试验组的雏鸡分别单独饲养在清洁的笼内，垫好粪板，并做好标记。

3、投药方法

将试验药物按规定剂量或试验设计剂量混入饲料或溶于饮水中。混药的饲料应了解配方及硫胺素含量，以防影响药物的作用。为将微量药物均匀地混入饲料，应采取逐渐扩大混合的方法。饲喂混药饲料一般是在人工接种前一天或在人工接种时同时喂给。混药饲料的需要量一般10 只雏鸡8 天试验期约为2-2.5公斤。各种混药饲料及试验药物应分别做好标记。

4、人工接种

柔嫩艾美耳球虫卵囊易于纯分离，且致病力最强，故一般抗球虫药药效试验的人工接种均用柔嫩艾美耳球虫卵囊。也有为了更接近于临床实际而采用混合卵囊的。取保存备用的有感染能力的抱子化卵囊，离心去掉重铬酸钾液，然后加水稀释，进行卵囊计数。试验组每只雏鸡接种量为5万个卵囊，以0.2-0.5 ml为宜，一般在给饲前用吸管经过口腔将卵囊液注入嗦嚷。人工接种的成功与否关系到试验的成败，接种量大了，能使感染不给药组全部发病死亡，感染量小了，发病轻，症状不明显，不能代表实际情况。因而，一般以人工感染后不给药组发病死亡率60-70 %为宜。人工接种前应检查试验雏鸡有否自然感染球虫，若发现已有球虫感染，则该批雏鸡不能作药效试验用。

5、试验观察及处理

试验期前后应做好详细记录，作为药效试验的原始资料。试验期为8 天，以人工接种当天为第0 天，以后每天观察试验雏鸡数次，记录精神、食欲、粪便等状况，根据不同试验组别分别给足相应的饲料和饮水。第3 天开始检查粪便，每天数次，记录各试验组血粪堆数（仅有血丝不算），直至第8 天扑杀剖检为止。对人工接种第3 天后死亡的雏鸡应逐只进行称重、剖检，查明死因，并做好详细记录。若肠粘膜刮取物镜检发现裂殖体（子）、配子体、卵囊应判为球虫病死亡。第 5 天开始收集每组试验鸡的粪便，集中分别检查出每组雏鸡排出的卵囊总数。收集粪便和检查时应特别注意防止各试验组互相混杂。第8 天将各试验组雏鸡分别进行扑杀剖检，一般先扑杀不感染不给药组，然后为给药组，最后是感染不给药组。剖检器具要分开，每组一套。剖检前逐只称重，剖检后重点检查盲肠病变，根据病变标准进行评分。然后将盲肠按试验组进行消化（消化液配方为：浓盐酸0.7ml、胃蛋白酶0.5-1g、蒸馏水100 ml）或制成匀浆，来计数盲肠卵囊数。试验期间一定要加强饲养管理，

保证不感染不给药组（空白对照组）不被球虫自然感染，否则试验即告失败。

6、药效判定方法及依据以“抗球虫指数（A Cl )”来判定药物效力

计算方法为：ACl=（相对增重率得分＋存活率得分）一（病变扣分＋卵囊扣分＋血粪扣分）

(1）相对增重率得分以不感染不给药组在试验期间每鸡的平均增重为100%，算出其它各组每鸡的平均增重百分率，即相对增重率，相对增重率x100即为相对增重率得分。

(2）存活率得分以不感染不给药组的存活率为100% ，算出其它各组试验鸡存活率，存活率x100即为存活率得分。

(3）血粪扣分分别对各组试验鸡生前最严重的一天血粪进行记分，该天每鸡平均血粪堆数在1-3.9堆，则分别记1-3.9分，如平均3. 5堆即记3.5分，依次类推。4堆及其以上的计4 分，一直无血粪的记0 分。血粪记分x5即为该组血粪扣分数。

(4）病变扣分以各试验组平均每只雏鸡的病变记分x5 ，即为该组病变扣分数。

病变记分标准：

A、无卵囊。盲肠正常。记0分

B、有卵囊。盲肠粘膜稍增厚，有少量散在性出血或少量肠芯。记1 分。

C、有卵囊。盲肠壁增厚，有明显的血液或血样肠内容物。记2 分。

D、有卵囊。盲肠粘膜增厚，有大量的血凝块或明显的血样肠芯。记3分。

E、死亡。外观盲肠呈酱色，明显肿大。有卵囊，内容物血样。记4 分。

（5）卵囊扣分把剖检后消化的盲肠匀浆内卵囊数与该组第5-8天粪中卵囊数相加，分别求出每组每鸡的平均卵囊数，按下列标准扣分。

7、药效的判定标准

每鸡平均卵囊数（106）该组卵囊扣分

0-0.1 0

0.1-1.0 1

>1.0-2.0 5

>2.0-5.0 10

>5.0-6.0 15

>6.0-10.0 20

>10.0-11.0 30

>11.0 40

抗球虫指数（ACI）在120以下，不宜用作抗球虫药；在160以下为控制球虫感染不满意，在160-180之间只有中等的控制球虫感染作用，在180 以上时控制球虫感染满意，用作抗球虫药药效好。

三、作业

根据实验结果，整理实验报告。