第一篇 病理技术操作常规

第一篇病理技术操作常规1．病理标本接收、固定及登记常规
2．病理标本的描写、收费常规
3．组织标本脱水常规
4．石蜡包埋操作常规
5．石蜡切片操作常规
6．冰冻切片操作常规
7．细胞学操作常规
8．苏木素-伊红染色常规
9．冷切片染色常规
10．细胞学染色常规
11．病理报告登记及发送常规
12．特殊染色操作常规
13．免疫组化操作常规
14．心、肺活检组织标本快速石蜡切片操作常规
15．病理资料保存归案及借用、借阅常规作常规
1．病理标本接收、固定及登记常规
1.1．收检标本时必须仔细检查：
a. 送检的标本和送检单上所写的是否符合（常规、冷冻、细胞学检查或其他）；
b. 送检标本容器上是否贴有病人的姓名（或送检单联号）和病案号及部位的标签；同一患者同时取有数种组织，或同一组织由不同部位取出，是否应分盛容器，分别注明。

是否在病理送检单上注明送检标本的份数及部位。

c. 标本是否已固定，固定液的种类和量（固定液的量一般为标本的5~10倍）是否合适。

d. 送检单是否安要求逐项填写清楚，字迹是否清晰易于辨认。

若发现有错误、疑问或不符合要求时，应立即查询清楚或做适当处理。

e. 合格者即签收，如标本已干涸或腐败，则不应接收。

1.2．固定：普通病理检查标本一般用10%的甲醛固定液固定，细胞学检查标本用95%酒精固定。

冷冻切片的标本一般不固定。

1.3．对当日送检整体脏器或大件新鲜标本由当日值班医师进行适当处理，使标本保持良好的形态和充分固定：
a. 食管、胃、肠管：食管沿纵轴，胃沿大湾，肠管沿系膜附着纵行剪开；若该部位有病变时，应从无病变或病变较轻处剪开，按自然状态平辅在木板上固定。

b. 脾：循脾长轴切开数片，每片约为1.5~2cm固定。

c. 肺叶：从支气管灌入适量的10%福马林液，放入标本缸中固定。

d. 子宫：于前壁做“Y”形切开，下达宫颈管口，上端分别达二侧子宫角，放入标本缸中固定。

e. 乳腺：沿乳腺最长径经乳头切开，在分别向两侧每隔1.5~2cm切开数片，放入标本缸中固定。

f. 肾：经血管内注入10%福马林液固定。

沿肾脏凸面的中部作一水平切面，深及肾盂。

剪开肾盂和肾盏，将输尿管找出，并沿管壁剪开，放入标本缸中固定。

g. 其它需要切开固定的标本（大件的脂肪组织等）
1.4．收到标本后按标本性质分类编号：
a. 活体组织检查标本编号年份+流水号（以千位数开始-0001）。

b. 各种体液、穿刺液、刮片及刷片等检查标本编号以“C”为字首+年份+流水号（以千位数开始-0001）。

c. 尸体解剖标本编号以“A”为字首+年份+流水号（以十位数开始-01）。

d. 动物实验标本编号“E”为字首+年份+流水号（以百位数开始-001）。

1.5．登记：各类标本编号后按各类登记册所列项目进行登记，并将标本按顺序放置在规定的地方，以备处理及检查，不得遗失。

2．病理标本的描写、收费常规
2．1．收到标本后，将标本分类、编号在登记本逐项登记。

2．2．将当日取材的标本编号按顺序抄写在取材单上。

2．3．扼要、重点记录取材医师的描述，分别在送检单、取材单和脱水盒上记录每例的实际取材的组织块数。

2．4．送检单上记录的组织块编号应于取材单和脱水盒上的编号相一致，字迹清晰。

尽量不用或少用文字标记。

2．5．皮肤科的标本应在取材单和脱水盒上分别注明“皮”的字样。

2．6．补取或重新取材的病例，除在送检单上注明外，应分别在取材单和脱水盒上注明“补”取的字样。

2．7．取材完成后应在取材单的右下角注明取材医师和记录者。

2．8．收费：每例病例按北京市物价局统一卫生事业收费标准进行收费。

每例按实际取材的组织块数进行累计，冷冻切片按每例每次累计；免疫组化和特殊染色逐项累积。

并将收费的实际金额数记录在取材单每例标本的后面，以便核对。

3．组织标本处理系统操作常规
3.1．打开脱水槽，放入样品框，关闭脱水槽。

3.2．输入起动密码0000（当日下午）。

3.3．调整到所需工作程序，周一至周四使用工作程序I；周五使用工作程序II；若需其它工作程序可临时调整。

3.4．检查起止时间。

3.5．次日上午，查看组织处理系统液晶荧屏提示，启动抽出脱水槽内的石蜡，打开脱水槽，取出组织置入包埋中心蜡缸中，待包埋。

3.6．从烤箱取出已烤好的脱水篮及铁片放入脱水槽中，关闭脱水槽。

3.7．启动自动清洗程序，待清洗结束后，取出脱水框，检查及擦拭脱水槽。

3.8．检查I号蜡缸内的石蜡，若低于标准线，可将II号蜡缸的蜡倒入I号蜡缸内，依此循环，将IV号蜡缸内补足新蜡。

3.9．每周五更换一次清洗试剂（二甲苯与无水酒精同时更换）。

3.10．每周五更换一次固定液（AF液：甲醛10ml，95%酒精90ml）。

3.11．每月更换一次固定液、脱水液及透明液，或根据需求及时更换。

并记录更换的日期。

4．石蜡包埋操作常规
4.1．打开或自动定时起动包埋中心和冷冻台；打开工作灯，调节石蜡流量开关，预热包埋框及镊子。

4.2．选择合适的包埋框，先加入少量的蜡，用热镊子夹取组织块，使病灶或指定面向下埋入蜡中，并用镊子轻轻按压，加上该组织的塑料框格，再加合适的蜡，待蜡稍凝后将其移入冷冻台上使其加速凝固。

4.3．待全部包埋结束后，将蜡块从包埋框中取出，修整蜡块边缘多余的石蜡，按序号排列，并与取材单上逐一核对，数据准确后放入冰盒内于冰箱冷冻层内。

4.4．关闭流量开关及包埋工作灯，清理包埋机上剩余残蜡，将脱水篮及铁片于烤箱内烘烤备用。

4.5．将包埋框按大小规格清理排列放好备用。

4.6．检查包埋机溶蜡槽中的石蜡量，并及时添加。

4.7．在包埋过程中，如遇组织块的数目与所标记的数目不相符合；脱水盒开盖，组织块滑出脱水盒，不易辨认或丢失等。

应及时与取材医师联系核对，并在取材单上签字注明。

5．石蜡切片操作常规
5.1．将切片刀片装于持刀座上，调整（检查）刀刃与蜡块表面呈5度夹角。

5.2．将蜡块装于切片机的持物器内固定，旋转持物器于适当位置。

5.3．移动刀座、使蜡块与刀刃近似接触，旋紧刀座。

5.4．定好欲取切片的厚度标尺（4~6微米）。

5.5．右手速度均匀的转动切片机旋转轮。

左手轻轻转动微动装置，使样品徐徐向前推进，直至组织平面完全修出平整或所需的部分已切出，微小组织应注意勿修切过多。

5.6．右手持镊子夹住切片的上端，左手以毛笔衬于切片下面，轻轻将切片平摊于40℃左右温水内，切片即自行展平，或用镊子将少许折皱摊平；用镊子由切片相连的骑缝处分开，取玻片插入切片下，以镊子将蜡片引向玻片之适当位置。

5.7．裱片于玻片下1/3中间位置，使切片与玻片之间无气泡，裱好后随即在切片写上号码。

5.8．将切片置烤片机内烤干30分钟以上即可染色。

5.9．有特殊要求者应按要求切片。

5.10．切片结束后，将切片机上蜡絮彻底清理。

6．冷冻切片操作常规
6.1．接通电源开关，打开箱内照明灯，设定或调整切片温度（-25℃左右）。

6.2．将切片刀装入持刀架上固定。

6.3．将待切样品以OCT包埋在持物托上置于切片机冷冻台冷冻，打开速冻开关。

6.4．待切片机箱内温度达到设定温度及样品冻硬后，将样品连同持物托一同置于持物架上，固定。

6.5．右手转动旋转轮，左手间断按动样品前进开关，使样品徐徐向前推进，直至组织平面完全修出平整。

6.6．调整好防卷板至刀刃平行，定好欲取切片的厚度标尺（6~10微米），放下防卷板，速度均匀的转动切片机旋转轮，切片。

6.7．打开防卷板，用玻片吸附切片，切片会自然附贴于玻片上。

6.8．以丙酮固定1-3分钟即可进行染色。

6.9．染色完毕后，将持物托上的剩余组织放入10%甲醛液内固定，并在容器上注明病人姓名。

6.10．将持物托用水洗涤干清、擦干备用。

6.11．将切片机中的碎组织彻底清理干净，用棉花蘸无水酒精轻轻擦拭防卷板及刀架。

6.12．关闭箱内照明灯，将切片机温度调至保持温度（-16℃）。

7．细胞学操作常规
7.1．痰：标本必须新鲜，咯痰前应先潄口，要求患者从呼吸道深部咯出，痰中不应含食物碎渣。

挑取标本，应选择痰中坏死组织、带血丝；透明而高度粘稠部分；灰白色细丝状、血痰外的粘液等。

做成厚薄均匀的涂片2~4张。

7.2．浆膜腔抽出液：标本应是新鲜（80分钟以内）送检。

以2000r/min离心5~10分钟，取沉淀物作均匀涂片2~4张。

若标本为脓性无法离心时，可直接做推片。

7.3．尿液：收集新鲜晨尿，1000~2000r/min离心5~10分钟，取沉淀物作涂片2~4张。

7.4．脑脊液：新鲜标本以2000r/min离心10~15分钟，取沉淀物涂片1~2张。

脑脊液中细胞较少，离心后尽量倒出全部上清，再取沉淀物。

7.5．胃液、胃冲洗液：将全部标本以3000r/min离心10~20分钟，取沉淀物做2~4张涂片。

7.6．其它：内镜的细胞刷采取的刷片、子宫颈的刮片、细针穿刺物及其它分泌物的标本，由临床医师做成涂片，固定后送检。

7.7．固定：各类涂片编号后，以95%酒精溶液固定15分钟以上。

并每日更换1~2次。

8．苏木素-伊红染色操作常规
8.1．石蜡切片入二甲苯溶液I脱蜡5~10分钟。

8.2．二甲苯溶液II脱蜡5~10分钟。

8.3．二甲苯溶液III脱蜡5~10分钟。

8.4．纯酒精溶液洗5~10分钟。

8.5．95%酒精溶液5~10分钟。

8.6．80%酒精溶液洗5~10分钟。

8.7．自来水冲洗。

8.8．入苏木精染液5~10分钟，水洗。

8.9．1%盐酸酒精溶液分化数十秒钟。

8.10．流水洗至细胞核呈蓝色。

8.11．伊红染色液染30秒钟~5分钟。

8.12．自来水洗数秒钟。

8.13．80%酒精溶液脱水1分钟。

8.14．95%酒精溶液脱水1~5分钟。

8.15．纯酒精溶液I脱水1~5分钟。

8.16．纯酒精溶液II脱水1~5分钟。

8.17．纯丙酮脱水1~5分钟。

8.18．二甲苯溶液I透明5~10分钟。

8.19．二甲苯溶液II透明5~10分钟。

8.20．中性树胶封固，粘贴标签。

9．冷冻切片染色常规
9.1．丙酮固定5~10分钟（术中冷冻切片固定1~2分钟）。

9.2．自来水冲洗。

9.3．入苏木精染液2~5分钟。

9.4．自来水洗。

9.5．1%盐酸酒精溶液分化数秒钟。

9.6．自来水洗、兰化。

9.7．伊红染色液染30秒钟~2分钟。

9.8．自来水洗数秒钟。

9.9．80%酒精溶液脱水1分钟。

9.10．95%酒精溶液脱水1~5分钟。

9.11．纯酒精溶液I脱水1~5分钟。

9.12．纯酒精溶液II脱水1~5分钟。

9.13．纯丙酮脱水1~5分钟。

9.14．二甲苯溶液I透明5~10分钟。

9.15．二甲苯溶液II透明5~10分钟。

9.16．中性树胶封固，粘贴标签。

10．细胞学染色常规
10.1．95%酒精溶液固定15分钟。

10.2．自来水冲洗。

10.3．入苏木精染液2~5分钟。

10.4．自来水洗。

10.5．1%盐酸酒精溶液分化数秒钟。

10.6．自来水洗、兰化。

10.7．伊红染色液染30秒钟~5分钟。

10.8．自来水洗数秒钟。

10.9．80%酒精溶液脱水1分钟。

10.10．95%酒精溶液脱水1~5分钟。

10.11．纯酒精溶液I脱水1~5分钟。

10.12．纯酒精溶液II脱水1~5分钟。

10.13．纯丙酮脱水1~5分钟。

10.14．二甲苯溶液I透明5~10分钟。

10.15．二甲苯溶液II透明5~10分钟。

10.16．中性树胶封固，粘贴标签。

11．病理报告的登记及发送常规
11．1．病理报告的发出：病理报告一旦发出应及时送登记室（登记处）登记。

登记时发现报告有疑问或字迹不清时，应及时通知报告医师更改。

登记完后，将送检单存根按编号顺序排列放置指定的位置存放，以便装订。

11．2．报告登记后，将报告单按科室及病房登记其编号，于每日下午4：00前由卫生员分送到相应的科室和病房，并由临床医师或护士签收。

11．3．冷冻切片病理报告一经发出，由卫生员或当班技术员立刻送到手术室。

11．4．门诊自取病理报告，由病人或病人亲属签字后方可取走。

住院病人的病理报告，一律不能由病人或病人亲属自行取走，临床医师签字后方可取走。

12．特殊染色操作常规
12．特殊染色操作常规（目录）
12.1.Mallory氏三色染色法（简称MCT法）
12.2.Masson氏改良三色染色法
12.3.Van Gieson氏苦味酸酸性复红染色法（简称VG法）
12.4.Verhoeff氏铁苏木素弹力纤维染色法
12.5.Weigert氏间苯二酚品红染色法
12.6.Foot氏网状纤维染色法
12.7.PAS过碘酸雪夫氏反应法
12.8.AB-PAS阿尔辛蓝过碘酸雪夫氏反应法
12.9.Alcian blue染色法（pH2.5）
12.10.Alcian blue染色法（pH1.0）
12.11. Perls氏反应法（显示含铁血黄素）12.12.Masson-Fontana氏银染色法
12.13.Groctt-Gomori氏六胺银染色法
12.14．Mallary磷钨酸苏木素法（PTH）12.15.梗死心肌的鉴别染色法
12.16.苏丹IV染色法
12.17.油红O染色法
12.18.Mayer粘液染色法
12.19.碱性刚果红法
12.20.Von Kossa显示钙盐法
特殊染色操作常规I
12.1.Mallory氏三色染色法（简称MCT法）[试剂配制]
明矾苏木素染液
0.5-1%盐酸酒精
0.5%酸性复红水溶液：酸性复红0.5g
蒸馏水100ml
Mallory氏苯胺蓝橘黄G溶液：水性苯胺蓝0.5g
橘黄G 2g
磷钨酸1g
蒸馏水100ml
配制：先配制成1%磷钨酸水溶液，然后用两个烧杯，各加入约三分之一的磷钨酸水溶液，再分别加入苯胺蓝和橘黄G，稍加温溶解。

待两液完全溶解后，分别过滤，并将滤液混合在一起。

最后用剩于的磷钨酸溶液冲洗容器亦过滤入混合容器中。

染色前最好再过滤一次即可使用。

[操作步骤]
1.石蜡切片3~5μm，脱蜡至水洗。

2.组织系用含汞盐固定液脱去汞盐沉淀。

3.用明矾苏木素染液染色2~3分钟。

4.水洗1~2分钟。

5.用0.5~1%盐酸酒精液分化片刻。

6.水洗返蓝，镜检胞核着色程度。

7.蒸馏水稍洗。

8.用0.5%酸性复红水溶液染色1~5分钟。

9.不经水洗，直接用苯胺蓝橘黄G染液染色20~40分钟。

10.用80%酒精液速洗一次，再以95%酒精液分化兼脱水。

11.无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

[结果]
胶原纤维、网状纤维、碱性颗粒呈深蓝色，黏液、软骨、淀粉样物质呈淡蓝色，纤维素、肌纤维神经胶质、酸性颗粒呈鲜艳的红色，弹力纤维、红血球、髓鞘呈橘黄色或橘红色，细胞核呈黑蓝色。

12.2.Masson氏改良三色染色法
[试剂配制]
Weigert氏铁苏木精
丽春红酸性复红染液：丽春红0.8g
酸性复红0.4g
蒸馏水99ml
冰醋酸1ml
亮绿染液：亮绿2g
蒸馏水98ml
冰醋酸1ml
0.2%冰醋酸水溶液
1%磷钼酸水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至水洗。

2.蒸馏水稍洗。

3.用Weigert氏铁苏木精或明矾苏木素液染核5~10分钟。

4.充分水洗蓝化后镜检。

如过染时，可用0.5%盐酸酒精稍分化，水洗。

5.蒸馏水洗1~2分钟。

6.用丽春红酸性复红染液染色5~10分钟。

7.以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

8.用1%磷钼酸水溶液分化处理3~5分钟。

9.以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

10.用2%亮绿染液染色3~5分钟。

11.0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

12.95%酒精至无水酒精脱水。

13．二甲苯透明，中性树胶封固。

[结果]
胶原纤维呈绿色或蓝色，弹力纤维呈棕色，肌纤维、纤维素、红血球呈红色，细胞核呈黑蓝色。

12．3.Van Gieson氏苦味酸酸性复红染色法（简称VG法）
[试剂配制]
Weigert氏铁苏木素染液:苏木精1g
纯酒精100ml
29%三氯化铁溶液4ml
盐酸1ml
蒸馏水95ml
配制将苏木精溶于酒精内，放置1—4周使其成熟，为A液。

将29%三氯化铁水溶液及盐酸加入蒸馏水中为B液，临用时A，B两液等量混合。

Van Gieson氏溶液：1%酸性品红水溶液10ml
苦味酸饱和水溶液(1.22%）90ml。

配制:先将两液分别配制好备用，临用时按所需要的比例混合，过滤后即可使用。

新配制的染液着色能力强，放置一定时间后，染色力则逐渐减弱。

[操作步骤]
1.石蜡切片3~5μm，脱蜡至水洗。

2.用Weigert氏铁苏木精或明矾苏木素液染色5~10分钟。

3.充分水洗。

4.用Van Gieson氏溶液染色1~5分钟。

5.倾去染液，直接用95%酒精液急速分化约数秒钟。

6.无水酒精脱水。

7．二甲苯透明，中性树胶封固。

[结果]
胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色，细胞核呈黑蓝色或棕蓝色。

12．4.Verhoeff氏铁苏木素弹力纤维染色法
[试剂配制]
Verhoeff氏铁苏木素染液：5%苏木素纯酒精液20ml
10%三氯化铁水溶液8ml
Verhoeff氏碘溶液8ml
将上述三液分别配制贮存，临用时按比例混合摇荡使用。

此液不可久存。

Verhoeff氏碘溶液：碘2g
碘化钾4g
蒸馏水100ml
2%三氯化铁水溶液
5%硫代硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡蒸馏水洗。

2.用Verhoeff氏染液染色15~30分钟，至颜色呈深黑色。

3.自来水洗。

4.2%三氯化铁溶液分化10~20秒钟（至弹力纤维清晰为止）。

5.充分自来水洗。

6.用5%硫代硫酸钠溶液处理5分钟。

7.充分自来水洗，再用蒸馏水洗。

8.95%酒精急速分化。

9.无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

[结果]
弹力纤维呈黑色或蓝黑色，肌纤维、纤维素、神经胶质呈黄色，胶原纤维呈红色，胞核呈蓝黑色。

12.5.Weigert氏间苯二酚品红染色法
[试剂配制]
Weigert氏间苯二酚品红染液：盐基性品红2g
间苯二酚（雷锁辛）4g
蒸馏水200ml
配制:将上述染料和蒸馏水放入烧杯内加热煮沸，再加入29%三氯化铁水溶液25ml,用玻璃搅棒不停的混合搅拌2-5分钟。

室温冷却，然后过滤，倾去滤液，将滤液和上面的沉淀物一同放回烧杯中，并置于干燥箱内烘干，烘干后取出并加入95%酒精液200ml，在水浴上加热至沉淀物完全溶解，取出滤纸，待液体冷却后过滤，再添补蒸发失去的酒精量至200ml，最后加入4ml浓盐酸，即可应用。

此液密封可保持数月，但其染色力能够逐渐减弱最终失败。

Van Gieson氏染液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至95%酒精。

2.用Weigert氏间苯二酚品红染液1~2小时或更长时间，视染色液的新旧定。

3.切片从染液中取出直接用95%酒精洗去多余染液，并分化至无余色脱下为止。

此时可在镜下观察，如果染色弥漫不清晰，可再用1%盐酸酒精稍加分化。

4.充分水洗5分钟。

5.需复染胞核，可用明矾苏木素水溶液染色2-5分钟。

6.水洗2-3分钟。

7.用Van Gieson氏液作对比染色。

8.95%酒精急速分化。

9.无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

[结果]
弹力纤维呈深蓝色或黑蓝色，胶原纤维呈红色，肌纤维和红血球呈黄色，胞核呈黑蓝色。

12.6.Foot氏网状纤维染色法
[试剂配制]
0.25%高锰酸钾水溶液
1%草酸水溶液
Foot氏银溶液：10%硝酸银水溶液10ml
40%氢氧化钠水溶液10滴
配制:取10%硝酸银水溶液，加入40%氢氧化钠水溶液10滴，立即产生棕褐色的氢氧化银沉淀，经摇荡、静置、待沉淀物全部沉底，倾去上清夜，用二次蒸馏水将沉淀洗涤3-4次，倒掉最后一次蒸馏水，再加入二次蒸馏水至10ml。

然后再逐滴加入浓氨水，边加边摇动，直至沉淀物接近溶解为止。

应避免氨水加至过量，以能滤出一些沉淀微粒为妥。

最后加至蒸馏水50ml，过滤后使用。

此液只能在低温处保存数月。

2%硝酸银水溶液
20%甲醛水溶液
0.2%氯化金水溶液
5%硫代硫酸钠水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片4~6μm，脱腊至水洗。

2.蒸馏水稍洗。

3.用0.25%高锰酸钾水溶液氧化5分钟。

4.蒸馏水洗1~2分钟。

5.1%草酸水溶液漂白5分钟。

6.水洗1~2分钟。

7.蒸馏水稍洗。

8.2%硝酸银水溶液置于阴暗处，在室温下染色12-24小时。

9.蒸馏水速洗。

10.用Foot氏银溶液染20~40分钟。

11.蒸馏水速洗。

12.用20%甲醛水溶液还原5~10分钟（中间更换1-2次）。

13.蒸馏水洗2~3分钟。

14.用0.2%氯化金水溶液调色5分钟。

15.蒸馏水洗2~3分钟。

16.用5%硫代硫酸钠水溶液固定5分钟。

17.充分水洗，根据需要可用HE或VG氏液复染。

18.95%酒精及无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

[结果]
网状纤维呈黑色或黑褐色，其它组织呈复染的颜色。

12.7.PAS过碘酸雪夫氏反应法
[试剂配制]
1%过碘酸水溶液
Schiff氏试剂：1mol/L盐酸20ml
碱性品红1g
亚硫酸氢钠1g
活性炭2g
蒸馏水200ml
配制：先将蒸馏水加热煮沸后，去火加入碱性品红，并不停摇荡5分钟使其溶解；待溶液冷却至50摄氏度时过滤，在加入当量盐酸；冷至25摄氏度再加入亚硫酸氢钠摇荡。

将容器密闭后存放暗处或冰箱内静止12-24小时，此时的溶液以淡黄色或无色为好，为消除溶液的颜色再加入活性炭2g，摇荡1分钟后过滤，溶液将成为无色透明状态；贮存于4摄氏度冰箱内，临用前取出，待溶液升至室温时使用。

亚硫酸氢钠溶液：亚硫酸氢钠2g
蒸馏水180ml
1mol/L盐酸20ml
[操作步骤]
1.石蜡切片3~5μm，脱腊至水洗。

2.蒸馏水洗1~2分钟。

3.用1%过碘酸水溶液氧化5~10分钟。

4.充分水洗。

5.蒸馏水洗涤数次。

6.Schiff氏试剂染5~10分钟（温度低时可延长浸染时间）。

7.倾去Schiff氏试剂，不经水洗直接浸入新配制的亚硫酸氢钠液内洗3次，每次2分钟，然后流水冲洗10分钟。

8.过染时可用明矾苏木素液浅染胞核2~3分钟，用0.5%盐酸酒精液稍分化。

9.流水冲流5~10分钟。

10.脱水、透明，中性树胶封固。

[结果]
糖原及其它PAS反应阳性物质均呈红色，细胞核呈蓝色。

PAS反应阳性物质
12.8.AB-PAS阿尔辛蓝过碘酸雪夫氏反应法[试剂配制]
1%阿尔辛蓝醋酸水溶液：阿尔辛蓝1g
蒸馏水97ml
冰醋酸3ml
临用前过滤使用，pH值为2.5-3.0之间。

1%过碘酸水溶液
Schiff氏试剂
亚硫酸氢钠溶液：亚硫酸氢钠2g
蒸馏水180ml
1mol/L盐酸20ml
[操作步骤]
1.石蜡切片3~5μm，脱腊至水洗。

2.蒸馏水洗1~2分钟。

3.用1%阿尔辛蓝醋酸水溶液染色10-20分钟。

4.蒸馏水洗3~4次。

5.用1%过碘酸水溶液氧化5~10分钟。

6.蒸馏水洗3~4次。

7.用Schiff氏试剂浸染10~20分钟。

8.倾去染液直接用亚硫酸氢钠液洗3次，每次2分钟。

9.流水冲洗5~10分钟。

10.过染时可用明矾苏木素液浅染胞核2~3分钟，用0.5%盐酸酒精液稍分化。

11.充分水洗返蓝。

12.脱水、透明、中性树胶封固。

[结果]
酸性黏液物质呈蓝色，中性黏液物质呈红色，混合黏液物质呈紫红色，细胞核呈浅蓝色。

12.9.Alcian blue染色法（pH2.5）
[试剂配制]
3%醋酸水溶液
1%阿尔新蓝染液：阿尔新蓝1g
3%醋酸水溶液100ml
1%中性红水溶液
[操作步骤]
1．石蜡切片4~6μm，脱腊至蒸馏水洗数次。

2．用3%醋酸水溶液洗涤。

3．1%阿尔新蓝染液染10~30分钟。

4．3%醋酸水溶液洗涤，吸水纸吸干。

5．1%中性红水溶液染细胞核2~3分钟。

6．水洗，常规脱水，透明，中性树胶封固。

[结果]
酸性粘液（唾液酸粘液）呈鲜蓝绿色，细胞核呈红色。

12.10.Alcian blue染色法（pH1.0）
[试剂配制]
0.1mol/L盐酸溶液
1%阿尔新蓝染液：阿尔新蓝1g
0.1mol/L盐酸溶液100ml
1%中性红水溶液
[操作步骤]
1．石蜡切片4~6μm，脱腊至蒸馏水洗数次。

2．用0.1mol/L盐酸溶液。

3．1%阿尔新蓝染液染10~30分钟。

4. 0.1mol/L盐酸溶液，吸水纸吸干。

5．1%中性红水溶液染细胞核2~3分钟。

6．水洗，常规脱水，透明，中性树胶封固。

[结果]
硫酸化性粘液呈鲜蓝绿色，细胞核呈红色。

特殊染色常规II
12.11. Perls氏反应法（显示含铁血黄素）
[试剂配制]
Perls氏溶液：2%亚铁氰化钾水溶液25ml
2%盐酸水溶液25ml
两液分别配制贮存，临用前等量混合过滤使用。

0.5%碱性品红酒精溶液：碱性品红0.5g
50%酒精液100ml
[操作步骤]
1.石蜡切片4~6μm，脱腊至蒸馏水洗数次。

2.用Perls氏溶液染色20~30分钟。

4.0.5%碱性品红酒精溶液复染30~50秒钟。

5.直接以95%酒精液迅速分化及脱水。

6.无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

[结果]
含铁血黄素成蓝色，其它组织均呈红色。

12.12.Masson-Fontana氏银染色法
[试剂配制]
氨银溶液：5%硝酸银水溶液40ml
浓氨水
配制:取5%硝酸银水溶液40ml，然后逐滴加入浓氨水至产生沉淀，逐渐溶解变清，再滴加硝酸银水溶液数滴至溶液呈轻度浑浊为度。

此溶液虽可短期保存，但最好临用前现配制。

0.2%氯化金水溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片4~6μm，脱腊至水洗。

2.蒸馏水充分洗涤3~5分钟。

3.用氨银溶液置于避光浸染12~18小时或更长时间。

4.蒸馏水洗1~2分钟。

5.用0.2%氯化金水溶液处理5~10分钟。

7.用5%硫代硫酸钠水溶液固定5分钟。

8.充分水洗5分钟。

9.需要时可用HE、VG氏液或中性红液等复染。

10.95%酒精及无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

[结果]
黑色素及嗜银细胞颗粒呈黑色，其它组织呈复染的颜色。

12.13.Groctt-Gomori氏六胺银染色法
[试剂配制]
5%铬酸水溶液
1%亚硫酸氢钠液
六胺银液染液：环六亚甲基四胺银原液25ml
蒸馏水25ml
25%硼砂水溶液（四硼酸钠）5ml
将硼砂水溶液加入蒸馏水内，然后再加入六胺银原液,用前配制。

环六亚甲基四胺银原液：5%硝酸银水溶液5ml
3%乌洛脱品100ml
两液混合，立即产生白色沉淀，振荡后即溶解而澄清。

此液放置于冰箱内备用，可保存数月。