血细胞分析仪PPT课件
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稀释液 溶血素 标本 类
淋巴细胞 单个核细胞
电阻抗法
单个白细胞
中性粒细胞
按体积大小分
20
仪器将体积为35～450fL的血细胞， 分为 256 个通道（ channel ）。每个通道： 1.64fl 。根据细胞大小，分别置于不同 的通道中，显示血细胞体积分布直方图 (Histogram)。
21
白细胞检测原理
根据电阻抗的原理，不同体积白细胞(35-450)fL 产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞：
35—90f1
160fl以上
90～160f1
22
经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生 了变化！！！以细胞的有形成分作为细胞的 大小 第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞 （体积最小）。 第二群（90～160fl）单个核细胞区，（中 间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱 性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。 第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细 胞（体积最大）。
血细胞分析仪
1
教学目标
1、掌握血细胞分析仪的库尔特原理 2、掌握白细胞、红细胞、血小板直方图 的临床意义。 3、了解血细胞分析仪的质量控制
2
教学重点、难点
教学重点： 1、血细胞分析仪电阻抗原理 2、细胞直方图的分析 教学难点： 细胞直方图的分析
3
授课内容
概述 血细胞分析仪检测原理 血细胞分析仪类型 血细胞分析仪检测项目 血细胞直方图
11Βιβλιοθήκη Baidu
现代分析仪进展
1．自动化程度越来越高； 2．提供参数越来越多； 3．精密度越来越高； 4．速度越来越快； 5．越来越注重环保； 6．质控功能得到加强； 7．智能化程度越来越高。
12
一
血液分析仪检测原理
血液分析仪检测原理大致分为两类： ①电阻抗法（库尔特原理） ②光散射法 （其中电阻抗法是血液分析仪的设计基础）
原理 细胞体积技术（测量 细胞大小） 电导性技术（测量细 胞内部结构） 光散射技术（测量细 胞形态、细胞核和细胞 颗粒）。
25
体积
电导
光散射
26
VCS可显示3种细胞散点图 DF1（体积值和散射光值） DF2（体积值和电导值） DF3（体积值和电导值）
27
（2）电阻抗与射频法（能透入细胞内，测 量核的大小及颗粒的多少）。
3 电阻抗法仪器的主要组成
16
红细胞直方图
红细胞计数和血细胞比容测定与白细 胞计数相似。
%
100
200
300
400 (fl)
17
WBC直方图
18
血小板直方图
随红细胞在一个系统中进行检测。
%
10
20
30(fl)
直方图在2～28fl（不同仪器不一）。
19
（二）白细胞系检测原理
1. 电阻抗法
14
2 库尔特原理图
细胞计数池中，小孔内外 两个电极和稀释液构成一 个电流回路，在负压作用 下，细胞通过小孔，电极 能感应到一个瞬间的电阻 变化，并将其转换成脉冲， 脉冲的数量代表细胞数量， 脉冲大小反映细胞体积大 小。
脉冲检测器
15
电阻抗法仪器的主要组成包括： 1. 信号发生器（脉冲检测器） 2. 放大器（微伏放大为伏级的脉冲信号） 3. 阈值调节（计数不同细胞有不同阈值） 4. 甄别器（除去假脉冲信号） 5. 整形器（波形调整为标准一致的平顶波） 6. 计数系统（不同脉冲区分出不同细胞并计数）
库尔特先生1913-1998
6
COULTER ：全自动细胞分析仪
7
COULTER ：细胞分析仪
8
第一台细胞计数仪 瓶瓶罐罐+管道+电极+示波器
9
库尔特（美国通用电气公司员工）在上海工作时所拍照
10
血细胞分析发展史
1. 1953年美国Coulter公司研制成功第一台电 阻抗是血细胞分析仪； 2. 六十年代已普遍应用到临床，当时可检测 RBC、Hb、WBC 、 MCV 、 MCH 、 MCHC等 项目； 3．七十年代，增加了PLT； 4．七十年代末至八十年代开发了DC及RDW及 MPV等新项目； 5．九十年代以来，RET、NRBC、淋巴细胞亚 群分析等指标。
血液分析仪主要能完成两大功能： ①细胞计数功能 ②细胞分类功能
13
（一） 电阻抗法原理（库尔特原理）
1 库尔特原理 库尔特原理是利用电阻抗法测量 细胞的数量和体积。其内容为：血细 胞是电的不良导体，当一个细胞通过 计数小孔时，会导致小孔两端电阻的 变化，将其转化成脉冲，感应器通过 检测脉冲的数量及大小，从而计算出 通过小孔的细胞数量及体积。
4
概 述 1. 显微镜计数： 原理简单、方便实用 比较费时费力、影响因素较多。 2. 血液分析仪 检测项目多 速度快 精度高 信息含量大 易标准化、规范化
5
血液分析仪发明者库尔特先生 35岁的美国人库尔 特发明了粒子计数 技术； 50年代初期，血细 胞计数仪开始应用 于临床。 科技为人类健康服 务，热心社会公益 事业。
30
31
（三）红细胞测试原理
1．红细胞计数（RBC）和红细胞比积（Hct） 1）RBC原理（脉冲数的多少） 2）Hct/PCV原理（脉冲的高度与叠加） 3）白细胞数的干扰 RBC 4）红细胞体积分布直方图
23
光散射法组合应用电学、光学、细胞化学 多项技术检测血液细胞，可得出较准确的 细胞计数和分类计数的结果。 这些测试原理的改进主要体现在对白细胞 分类部分的改进，即电阻抗法的白细胞三分 群发展为多项技术对白细胞五分类。
（二）光散射法血液分析仪检测原 理
24
1、白细胞检测 （ 1 ） 容 量 、 电 导 、 光 散 射 （ volume ， conductivity， scatter, VCS）法
RF:射频电流
细胞内部结构信息
DC:直流电 细胞大小的信息
28
（3）激光与细胞化学法 过氧化物酶检测通道 嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。
29
（ 4 ） 多 角 度 偏 振 光 散 射 （ multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS）法 0°：前角光散射（ 1°～ 3°），可粗略 测定细胞大小。 10°：狭角光散射（ 7°～ 11°），可测 定细胞内部结构相对特征。 90°：垂直光散射（ 70°～ 110°），测 定细胞核分叶情况。 90°：消偏振光散射（ 70°～ 110°）， 区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。
淋巴细胞 单个核细胞
电阻抗法
单个白细胞
中性粒细胞
按体积大小分
20
仪器将体积为35～450fL的血细胞， 分为 256 个通道（ channel ）。每个通道： 1.64fl 。根据细胞大小，分别置于不同 的通道中，显示血细胞体积分布直方图 (Histogram)。
21
白细胞检测原理
根据电阻抗的原理，不同体积白细胞(35-450)fL 产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞：
35—90f1
160fl以上
90～160f1
22
经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生 了变化！！！以细胞的有形成分作为细胞的 大小 第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞 （体积最小）。 第二群（90～160fl）单个核细胞区，（中 间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱 性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。 第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细 胞（体积最大）。
血细胞分析仪
1
教学目标
1、掌握血细胞分析仪的库尔特原理 2、掌握白细胞、红细胞、血小板直方图 的临床意义。 3、了解血细胞分析仪的质量控制
2
教学重点、难点
教学重点： 1、血细胞分析仪电阻抗原理 2、细胞直方图的分析 教学难点： 细胞直方图的分析
3
授课内容
概述 血细胞分析仪检测原理 血细胞分析仪类型 血细胞分析仪检测项目 血细胞直方图
11Βιβλιοθήκη Baidu
现代分析仪进展
1．自动化程度越来越高； 2．提供参数越来越多； 3．精密度越来越高； 4．速度越来越快； 5．越来越注重环保； 6．质控功能得到加强； 7．智能化程度越来越高。
12
一
血液分析仪检测原理
血液分析仪检测原理大致分为两类： ①电阻抗法（库尔特原理） ②光散射法 （其中电阻抗法是血液分析仪的设计基础）
原理 细胞体积技术（测量 细胞大小） 电导性技术（测量细 胞内部结构） 光散射技术（测量细 胞形态、细胞核和细胞 颗粒）。
25
体积
电导
光散射
26
VCS可显示3种细胞散点图 DF1（体积值和散射光值） DF2（体积值和电导值） DF3（体积值和电导值）
27
（2）电阻抗与射频法（能透入细胞内，测 量核的大小及颗粒的多少）。
3 电阻抗法仪器的主要组成
16
红细胞直方图
红细胞计数和血细胞比容测定与白细 胞计数相似。
%
100
200
300
400 (fl)
17
WBC直方图
18
血小板直方图
随红细胞在一个系统中进行检测。
%
10
20
30(fl)
直方图在2～28fl（不同仪器不一）。
19
（二）白细胞系检测原理
1. 电阻抗法
14
2 库尔特原理图
细胞计数池中，小孔内外 两个电极和稀释液构成一 个电流回路，在负压作用 下，细胞通过小孔，电极 能感应到一个瞬间的电阻 变化，并将其转换成脉冲， 脉冲的数量代表细胞数量， 脉冲大小反映细胞体积大 小。
脉冲检测器
15
电阻抗法仪器的主要组成包括： 1. 信号发生器（脉冲检测器） 2. 放大器（微伏放大为伏级的脉冲信号） 3. 阈值调节（计数不同细胞有不同阈值） 4. 甄别器（除去假脉冲信号） 5. 整形器（波形调整为标准一致的平顶波） 6. 计数系统（不同脉冲区分出不同细胞并计数）
库尔特先生1913-1998
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COULTER ：全自动细胞分析仪
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COULTER ：细胞分析仪
8
第一台细胞计数仪 瓶瓶罐罐+管道+电极+示波器
9
库尔特（美国通用电气公司员工）在上海工作时所拍照
10
血细胞分析发展史
1. 1953年美国Coulter公司研制成功第一台电 阻抗是血细胞分析仪； 2. 六十年代已普遍应用到临床，当时可检测 RBC、Hb、WBC 、 MCV 、 MCH 、 MCHC等 项目； 3．七十年代，增加了PLT； 4．七十年代末至八十年代开发了DC及RDW及 MPV等新项目； 5．九十年代以来，RET、NRBC、淋巴细胞亚 群分析等指标。
血液分析仪主要能完成两大功能： ①细胞计数功能 ②细胞分类功能
13
（一） 电阻抗法原理（库尔特原理）
1 库尔特原理 库尔特原理是利用电阻抗法测量 细胞的数量和体积。其内容为：血细 胞是电的不良导体，当一个细胞通过 计数小孔时，会导致小孔两端电阻的 变化，将其转化成脉冲，感应器通过 检测脉冲的数量及大小，从而计算出 通过小孔的细胞数量及体积。
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概 述 1. 显微镜计数： 原理简单、方便实用 比较费时费力、影响因素较多。 2. 血液分析仪 检测项目多 速度快 精度高 信息含量大 易标准化、规范化
5
血液分析仪发明者库尔特先生 35岁的美国人库尔 特发明了粒子计数 技术； 50年代初期，血细 胞计数仪开始应用 于临床。 科技为人类健康服 务，热心社会公益 事业。
30
31
（三）红细胞测试原理
1．红细胞计数（RBC）和红细胞比积（Hct） 1）RBC原理（脉冲数的多少） 2）Hct/PCV原理（脉冲的高度与叠加） 3）白细胞数的干扰 RBC 4）红细胞体积分布直方图
23
光散射法组合应用电学、光学、细胞化学 多项技术检测血液细胞，可得出较准确的 细胞计数和分类计数的结果。 这些测试原理的改进主要体现在对白细胞 分类部分的改进，即电阻抗法的白细胞三分 群发展为多项技术对白细胞五分类。
（二）光散射法血液分析仪检测原 理
24
1、白细胞检测 （ 1 ） 容 量 、 电 导 、 光 散 射 （ volume ， conductivity， scatter, VCS）法
RF:射频电流
细胞内部结构信息
DC:直流电 细胞大小的信息
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（3）激光与细胞化学法 过氧化物酶检测通道 嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。
29
（ 4 ） 多 角 度 偏 振 光 散 射 （ multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS）法 0°：前角光散射（ 1°～ 3°），可粗略 测定细胞大小。 10°：狭角光散射（ 7°～ 11°），可测 定细胞内部结构相对特征。 90°：垂直光散射（ 70°～ 110°），测 定细胞核分叶情况。 90°：消偏振光散射（ 70°～ 110°）， 区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。