茯苓酸的提取及含量测定

茯苓酸的提取及含量测定

目的：建立茯苓乙醇提取物中茯苓酸的含量测定方法，为该提取物的质量控制提供依据。

方法：采用反相高效液相色谱法( R P —H P L C )对茯苓乙醇提取物中茯苓酸进行定性定量分析，利用保留时间定性和外标两点法定量。

一、仪器与试药

1、仪器：A g l i e n t 1 1 0 0 s e r i e s高效液相色谱仪、，A g l i e n t 色谱工

作站，色谱柱；十万分之一天平、；万分之一天平

2、试药：茯苓乙醇提取物由本实验室提供；茯苓酸对照品乙腈为色谱纯，

水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。

二、色谱条件

K r o m a s i l 1 0 0 - 5 C 1 8 色谱柱( 250mm×4.6 mm，5μm) ，流速为1. 0 m L/mi n ；进样量：1 0 μI x L；柱温：3 0℃；流动相：乙腈0.2％醋酸( 8 2 ：

1 8 ) ；检测波长：

2 1 0 n m

三、对照品溶液的制备

1、精密称取减压至恒重的茯苓酸对照品3 mg ，置于1 0 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得0 .3 mg /m L 的茯苓酸对照品溶液。

2、供试品溶液的制备

精密称取茯苓乙醇提取物0 .2 5 g 置于1 0 0 mL 具塞锥形瓶中，加甲醇 2 5 mL ，密塞，称定，浸泡3 0 m i n ，超声3 0 m i n ，放冷，用甲醇补足减失的重量，过滤；得续滤液即为供试品。

四、重复性试验

精密称取茯苓乙醇提取物6份，按样品含量测定项下的方法处理，并进行测定，结果表明茯苓酸的含量平均为 2 ．7 2％，R S D=1.3 8％( n=6 ) ，表明该方法重复性良好。

五、回收率试验

精密称取已知含量茯苓乙醇份0 .125 g 分别精密加入对照液的制备方法处理，测定茯苓率为9 9.7 6％，R S D=1.1 3％

六、样品含量测定

分别取0 7 1 8 2 0，0 7 1 8 2 1 ，0 7 1 8 2 2 3批茯苓乙醇提取物样品，按供试品制备方法制备溶液，按上述色谱条件测定，计算样品溶液中茯苓酸的含量分别

为2 ．6 7％，1 ．6 0％，2 ．7 7％。

七、讨论

茯苓三萜类成分具有抗肿瘤、抗炎、调节免疫功能等多种生物活性。茯苓药材的乙醇提取物主要含三萜类成分，总三萜含量达 4 0％。