蛋白质水解规律及应用

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蛋白质水解规律及应用

刘艳玲

一. 蛋白质水解产物的确定

蛋白质在酸性、碱性、酶等条件下发生水解,蛋白质的水解中间过程,可以生成多肽,但水解的最终产物都是氨基酸。蛋白质水解生成氨基酸大约有20余种,天然蛋白质水解的最终产物都是-α氨基酸。

例1. 某天然蛋白质充分水解后,能分离出有机物R ,R 可与等物质的量的KOH 或盐酸完全反应。3.75gR 可与50ml 、1mol/L 的NaOH 完全中和,则R 的结构简式为

A. COOH CH NH -2

|2

B. COOH CH CH NH --2

|3

D. COOH CH CH CH HOOC NH ----2

|22 解析:天然蛋白质水解产物R 为氨基酸-α,R 与KOH 或HCl 反应时为等物质的量

完全反应,说明R 分子中有一个氨基和一个羧基。此有机物相对分子的质量7505

.075.3==M ,通过式量分析:

)(14)(45)(167522CH COOH NH =----

运用残基分析法,说明含有一个残基--2CH ,则R 的结构简式为COOH CH N H --22,故选A 。

二. 蛋白质水解中的断键位置

蛋白质的水解遵循“哪里来,哪里去”原则,即水从哪里生成,就从哪里加水进去,所以蛋白质水解中的断键位置,就是羧基中的碳原子和氨基中的氮原子相连的肽键。

例2. 下图表示蛋白质结构的一部分,图中A 、B 、C 、D 表示了分子中不同的键,当蛋白质发生水解反应时,断裂的键是

解析:天然蛋白质是氨基酸通过-α肽键生成的高分子化合物,成键时羧基上脱去羟

基,氨基上脱去氢原子,形成酰胺基结构---NH C O ||。因此蛋白质水解时应是酰胺基结构上的C-N 键断裂。故选:C 。

例3. 有一种式量为M 的多肽,经水解后只得到甘氨酸,如果该多肽是链状分子,则一个这种多肽分子含有肽键数为( ) A. 5775-M B. 75M C. 7518-M D. 75

18+M 解析:守恒法。设多肽分子中含有n 个肽键,已知每2个氨基酸脱1分子水形成二肽,含有一个肽键,类推,含n 个肽键,需要(n+1)个甘氨酸脱n 个水,根据质量守恒:

57

75:,1875)1(-=

+=⨯+M n n M n 解得,故选A 。 三. 蛋白质水解后生成氨基酸分子数的确定

根据2个氨基酸脱1分子水形成二肽,含有一个肽键,3个氨基酸脱2分子水形成三肽,类推(n+1)个氨基酸脱n 分子水形成多肽,含n 个肽键。反之,一个链状蛋白质分子(多肽分子)水解生成n 个氨基酸分子,则要消耗(n-1)个水分子。

例 4. 今有一个多肽,其分子式是10197055N O H C ,已知将它水解后只得到下列四种氨基酸:

)()()

(49522|273|3252222

2N O H C COOH CH CH CH HOOC N O H C COOH CH CH N O H C COOH CH N H NH NH 谷氨酸丙氨酸甘氨酸------

(1)这个多肽是几肽?有几个肽键?

(2)该多肽水解后有几个谷氨酸?几个苯丙氨酸?

解析:(1)解此题可根据蛋白质水解规律,利用原子守恒法解答。因这几个氨基酸均只有一个氮原子,多肽的分子式中有十个氮原子,则有十个氨基酸参加反应,故为十肽。十个氨基酸之间可脱去九分子水,则有九个肽键。

(2)因十个氨基酸脱去九个水分子后,生成多肽中有70个氢原子和19个氧原子,则十个氨基酸共有70+18=88个氢原子和19+9=28个氧原子。

设该多肽中含甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸分别为a 、b 、c 、d 个,分别由C 、H 、O 、N 原子守恒得关系式如下:

⎪⎪⎩⎪⎪⎨⎧+=+++=++++=+++=+++)

(9194)(2)

(10)(187011975)(559532O c d b a N d c b a H d c b a C d c b a 解得:a=1,b=2,c=4,d=3

故该多肽水解后有4个谷氨酸,3个苯丙氨酸。

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