肉牛胚胎移植技术

肉牛胚胎移植技术

胚胎移植又称受精卵移植，是将l头良种母畜(供体)配种后的早期胚胎取出，移植到另一头同种的生理状态相同的母畜(受体)的子宫内，使之继续发育成为个体，所以也叫人工授胎或“借腹怀胎”。

(一)胚胎移植的意义

1．充分发挥优良母畜的繁殖潜力，提高繁殖效率由于牛的胚胎移植可以利用非手术法反复从一头供体中收集胚胎，所以繁殖率得以更加提高。据报道国外已能做到从一头供体牛一年获得40～50头犊牛。

2．加速品种改良，扩大良种畜群利用超数排卵、胚胎移植技术能使母畜排出较多卵子，山东永丰牧业同时解除其妊娠胚胎的职能，这样一头良种母牛就可产生多量的后代。使一头优良母畜在育种工作中的意义大为提高。

3．诱发肉牛怀双胎，提高生产效率在肉牛业中，有一种由胚胎移植技术演化出来的所谓“诱发双胎”的方法，即向已配种的母畜(排卵的对侧子宫角)移植一个胚胎，这样配种后未受胎的母畜可能因接受移植的胚胎而妊娠，而已受精的母畜由于增加了一个外来胚胎而可能怀双胎o

4．代替种畜的引进，保存品种资源通过胚胎的运输代替以往的种牛进出Vl山东永丰牧业，大大节约了购买和运输种牛的费用。同时可用保存胚胎的方式解决牛品种资源保存的问题。

(二)胚胎移植的操作原则

1．胚胎移植前后所处环境的一致性即胚胎移植后的生活环境和胚胎的发育阶段相适应山东永丰牧业。包括生理上的一致性(即供体和受体在发情时问上的一致性)和解剖位上的一致性(即移植后的胚胎与移植前所处的空问环境的相似性)以及种属一致性(即供体与受体应属同一物种，但并不排除种间移植成功的可能性)。

2．胚胎收集期限胚胎收集和移植的期限(胚胎的日龄)不能超过周期黄体的寿命，最迟要在周期黄体退化之前数日进行移植。通常是在供体发情配种后3～8日内收集和移植胚胎。 3．在全部操作过程中，胚胎不应受到任何不良因素(物理的、化学的、微生物的)的影响而危及生命力。移植的胚胎必须经鉴定并认为是发育正常者。

(三)胚胎移植技术的基本程序胚胎移植的基本程序包括：供授体母牛的同期发情、供体母牛的超数排卵、供体母牛的配种、胚胎的收集、山东永丰牧业胚胎的检查、胚胎的保存和移植等程序。如图3—4所示。关于超排和同期发情处理在前面已有叙述，下面仅介绍其余部分。

1．供体母牛的配种经超数排卵的供体母牛，为了使排出的卵子有较多的受精机会，一般在发情后输精2～3次，每次间隔8～12 h。

2．胚胎的收集

从供体母牛收集胚胎的方法，可采用手术法和非手术法两种。手术法是按外科剖腹术的要求进行山东永丰牧业，手术部位在右肋部或腹下乳房至脐部之问的白线切开。

伸进手指找到输卵管和子宫角，引出供。母体十畜同期发情处理受体母畜

辛辛辛辛

发情配种妊娠或再作供体

图3-4胚胎移植过程示意图

妊娠

分娩

辛早6艿

优良后代

切口外。输精后3～4天，受精卵绝大多数还在输卵管内，用注射器吸取冲洗液，连接穿刺针头，在子宫前端刺入，再送入输卵管峡部，注人冲洗液；另在输卵管伞端插入塑料导管山东永丰牧业，回收带有受精卵的冲洗液。如在输精后的5天冲卵，受精卵已绝大部分进入子宫角，需从子宫角冲卵。

非手术法是采用特制的二路或三路导管冲卵器(参看图3—5)。

冲卵时将导管用直肠把握法经子宫颈导入子宫角，从子宫角冲卵，在输精后5～7天进行。

冲卵所用的冲洗液，多为组织培养液，如林格氏液、杜氏磷酸缓冲液、布林斯特氏液(BMoG3)和TCM-199等。杜氏磷酸缓冲液(Ⅸ峪)，加入0．4％的牛血清白蛋白或1％～l0％的小牛血清，效果较好。布林斯特氏液效果也较好。这2个培养液的成分如表

图3-5非手术取卵装置

3—8所示。

冲洗液的温度为35～37"C，每毫升加入青霉素1 000 IU，链

霉素500～1 000／*9，以防生殖道感染。

表3-8组织培养液成分{9／L双蒸馏水)

成分杜氏磷酸缓冲液(PBS) 布林斯特氏液(BMOG3)

3．胚胎的检查把上述方法所回收的冲洗液，置于室温或37℃温箱内静置lo min。待胚胎下沉后，移去上层液，取底部少量液体，移至平皿内，先在10～20倍的解剖镜下检查胚胎数量，然后在50～100倍镜下观察胚胎发育状况。把发育正常的胚胎收集于带有密闭盖的玻璃容器内备用或储存。发育正常的胚胎，外形整齐、大小一致、分布均匀、

外膜完整。无卵裂现象(未受精)和异常卵(外膜破裂、卵裂球破裂等)都不能用于胚胎移植。

4．胚胎的移植分手术和非手术移植。在肉牛业中以诱产双胎为目的，一般都采用非手术移植。山东永丰牧业非手术移植胚胎是用人工授精细管输精器或专用移卵器，按直肠把握输卵法，将吸有胚胎的移卵器插入受体母牛非排卵侧子宫角深部，将胚胎注入即可。

此外，胚胎冷冻、胚胎分割、体外受精(试管牛犊)、核移植等繁殖新技术，我国均已取得成功，但目前尚未进入实用阶段，故不作介绍。