人类核型分析

实验四人类核型分析

一．实验目的

了解人类染色体的形态特征，掌握其核型分析的基本方法。

二．材料

人正常和异常的染色体标本，人显带染色体标本

三．试验内容与方法：

核型：指某种生物个体或某一分类群(种、亚种或变种、居群)的一个体细胞全部中期染色体的数目、大小和形态等特征的总和。用来表述物种的特点和亲缘种属之间的关系。核型分析：将待测细胞的染色体按照该生物固有的染色体形态特征和规定，进行配对、编号和分组，并进行形态分析的过程过程。

Denver体制：按照Denver会议(1960年)提出的染色体命名和分类标准，将人类体细胞的46条染色体按大小（根据长度递减顺序）、着丝粒的位置分成七组(A、B、C、D、E、F、G、)23对的排列，并将副缢痕和随体作为识别染色体的辅助指标。人类染色体核型分析标准是丹佛（Denver）体制（人类有丝分裂染色体的标准命名体制）。该体制规定：每一条染色体可通过相对长度、臂率和着丝粒指数等三个参数予以识别；

非显带染色体：染色体标本制作好后，不经处理直接染色，整条染色体均匀着色（相对于后面的显带染色体而言）。

人中期细胞染色体（数目2N=46）

结构特点

G显带染色体：G带技术是其中最常用的技术，由Pardue和Gall（1970）建立。中期染色体经胰酶处理及Giemsa染色后，能在其长轴上显示出明暗交替的横纹，每个染色体都有特定的带纹，可应用染色体分带技术，来准确地辨别每个染色体。一个细胞中期分裂相的G显带技术，每个染色体被染成深浅相间的带纹，浅的部分称为明带或浅带，深的部分称为暗带或深带。G带反映了染色体DNA上A -T的丰富区，在人类中约有2000条G带可被鉴别，在间期核呈固缩状态，而且是DNA晚复制区之一。有相当一部分中度重复序列DNA可能在G带区，Giemsa染料在G带区是与DNA结合，而且与结合DNA的染色质非组蛋白有关。G带区位于染色体的两臂上，和Q带区相对应，而与Ｒ带区相反。人类细胞染色体共分24种不同的带纹（22对常染色体和X、Y染色体）

（一）人类正常染色体及其带型的识别

1. 非显带染色体的识别：根据染色体按大小（根据长度递减顺序）、着丝粒的位置分

①A群：包括第1、2、3对染色体，体积大，彼此易于区别，有中央着丝粒，第二对染色体的着丝粒略偏离中央。

②B群：包括第4、5对染色体，较大，均为亚中部着丝粒，彼此不易区分。

③C群：包括6-12对常染色体和X性染色体，中等大小，为亚中部着丝粒染色体，彼此间难以区分，第6对的着丝粒染色体靠近中央，X染色体大小介于第6对与第7对之间，第9对染色体长臂上有一次缢痕，第11对染色体上的短臂较长，第12 对染色体的短臂较短，这些特点有助于染色体的鉴别。

⑤D群：包括第13、14、15三对染色体，中等大小，均为近端着丝粒，有随体，彼此间不易区分。

⑥E群：包括第16、17、18三对染色体，中等大小，第16对有中央着丝粒，长臂上有次缢痕，易于区别，第17、18对上有亚中部着丝粒，难以区分，后者的短臂较短。

⑦F群：包括第19、20两对染色体，体积小，染色体比G组稍大、均为中央着丝粒性，呈“梅花状“，彼此难以区分。

⑧G群：包括第21、22两对常染色体和Y染色体，是最小的一组，均为近端着丝点，短臂末

端有随体，长臂常呈分叉状，21号稍小于22号。Y染色体被隶属于该组，短臂无随体，一般

较2l、22号大点。上述人的常规核型中，1～22号为常染色体，男女共有，另一对为性染色体，决定性别，男性为XY，女性为XX，人的正常核型写法：男46，XY；女46，XX。

A 一秃二蛇腰三蝶飘

B 四像鞭炮五黑腰

C 六是小白脸七上（着丝粒上部深染）八下（着丝粒下部深染）九苗条十号长臂近带好十一低（脚深染）来十二高（头深染）

D 十三下（下部深染）十四中（中部深染）十五上（上部深染）

E 十六长臂缢痕大十七长臂带脚镣十八人小肚皮大

F 十九中间一点黑二十头重脚轻

G 二十一像葫芦瓢二十二头上一点黑X一肩挑Y 黑脚丫

2、G显带染色体的识别短臂（p），长臂（q），区，带

（二）正常人体细胞核型的分析

1、染色体制片—显微照相—放大

2、测量：染色体长度

3、计算：臂比、着丝粒指数、相对长度；

4、配对：根据形态特征

5、排列：a)长度从大到小；b)臂比从大到小；c)特殊的染色体最后；

6、剪贴：细剪，按顺序从大到小，短臂在上，着丝粒于一直线，贴图

7、分析结果：如为男性核型应为46，XY；女性为46，XX。

四、复习思考题：

1、什么是核型？人的正常核型如何表示？

2、判断核型是否正常有些什么表示？

五、作业：男性或女性的G显带核型剪贴分析。