色谱分离原理详解演示文稿
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• 1941年 Martin 和 Synge建立了液液分配色谱法 并提出气相色谱的设想
• 1952年 Martin等发明了气液色谱法 • 1952年 Martin 和 Synge 获得诺贝尔化学奖
A.J.P. Martin
R.L.M. Synge
气相色谱仪
色谱法的发展
• 1957年Goley开创了毛细管气相色谱 • 1960年代末出现高效液相色谱法 • 1980年代超临界流体色谱得到发展 • 1980年代Jorgeson发展了高效毛细管电泳 • 1990年代后期毛细管电色谱得到重视和
复杂体系
样品制备
分离
检测
SP(M)E 等
GC, HPLC, CE, CEC, micro-TAS……
发展趋势
• 进一步发展高效分离技术 • 小型化、微型化、自动化 • 各种联用技术 • 样品处理技术 • 高通量
超高效液相色谱（UPLC）
chromatogram obtained under isocraticconditions on a 43 cm long capillary column packed with 1.0 µm non-porous C18 particles (Eichrom Scientific).
• 与传统电泳技术及现代色谱技术相比：
– 仪器简单、操作方便、易自动化 – 分离效率高(105 - 107 块/m) 、分析速度快 – 操作模式多 – 实验成本低，消耗少 – 重现较差，分析结果误差大
毛细管电泳示意图
多维气相色谱
全二维气相色谱
全二维气相色谱
液相色谱－气相色谱联用
液相色谱－气相色谱联用
发展
高效液相色谱仪
毛细管电泳仪
液相色谱分离速度的变化
色谱法的现状和未来
• 气相色谱和高效液相色谱发展最好
• 超临界流体色谱处于失利地位
• 毛细管电泳与毛细管电色谱处于研究阶 段,进入部分应用领域
气相色谱和高效液相色谱发展最好
• 气相色谱仪及备件 – 全球市场: 约10亿美元/年; 3-4%年增长
• 高效液相色谱仪及备件 – 6-8%年增长
超临界流体色谱处于失利地位
• 发展晚于GC和HPLC • 虽然具有一些独特用途，但大多数功能
可由GC和HPLC代替
毛细管电泳与毛细管电色谱
• 为基因组学研究作出了杰出贡献 • 目前存在的主要问题：
– 分析结果偏差大 – 比HPLC大一个数量级 • 机遇：分离分析生物大分子
固相微萃取技术
Fig.1-5 Desorption chamber for coupling SPME to HPLC
Fig.1-6 Commercially available interface of SPMEHPLC (Supelco)
固相微萃取技术
固相微萃取技术
固相微萃取技术
Monolithic capillary
色谱分离原理详解演示文稿
优选色谱分离原理
一、 色谱发展简史
• 色谱法的出现 • 色谱法的发展 • 色谱法的现状和未来？
色谱法的出现
• 1903年 Tswett （茨维特）研究植物叶子组成时发明了 色谱法
色谱法的出现
• 1903年 Tswett （茨维特）研究植物叶子组成时发明了 色谱法
1906年 Tswett 的研究成果发表
橄榄油有机酸
来自百度文库
液相色谱－液相色谱联用
液相色谱－液相色谱联用模式
• 同模式 LC–LC • 多模式 LC–LC • 全二维 LC
– (i) 样品的每一部分均经过二维分离。 – (ii)样品的所有组分等比例经过二维分离。 – (iii) 第一维具备分离能力。
全二维 LC
固相微萃取技术
Fig.1-2 SPME construction
超高效液相色谱（UPLC）
The sample was run using constant-flow pumps at 52 000 psi on a 38cm long capillary packed with 1.0 µm C18 particles.
芯片液相色谱
ZORBAX 300SBC18 5 µm particles H.-F. Yin et al., presented at the 18th International Symposium on Microscale Separations and Analysis, HPCE, San Diego, January 2003.
多肽分离图
自动化
分离分析新技术简介
• 毛细管电泳 • 全二维气相色谱 • 液相色谱－气相色谱联用 • 液相色谱－液相色谱联用 • 色谱－质谱联用* • 样品处理技术
毛细管电泳
毛细管电泳是指溶质以电场为推动力， 在毛细管中按淌度差别而实现的高效、 快速分离的新型电泳技术。
高效毛细管电泳的特点
• Chromatographie (德语） • Chromatography (英语） • 色谱 • 玻璃管=“色谱柱”column • 碳酸钙=“固定相”stationary phase • 石油醚=“流动相”mobile phase
色谱法的发展
• 1931年 Kuhn 等用氧化铝和碳酸钙分离了α,β-,γ-胡萝卜素等60多种植物色素
成功的定量分析方法应具备的基本条件
• 易于使用，操作费用低
• 能够得到准确、可重复的定量结果
• 要能够解决至少一个分析化学中的重要 问题
色谱法在工业生产和科学研究中的作用
• 1930-1940年代为分离复杂的生物组成发挥了独 特作用
• 1950年代为石油工业的发展作出了贡献 • 1960-1970年代成为石油化工、化学工业等部门
的分析检测手段 • 目前，色谱法已成为生命科学、医药科学、环
境科学、材料科学、食品科学、法庭科学以及 航天科学等研究领域的重要手段
面临的问题
• 当今化学、生命科学、环境科学等研究 领域中备受人们关注的热点问题，如蛋 白质组学、代谢组学中的分离分析问题 的解决，医学中的药理、药物代谢研究 和疾病标记物研究，天然产物有效成分 的分离分析，食品安全，毒品、兴奋剂 等快速检测等等。
专利申请号：200520095986.1
固相微萃取技术
三、 色谱法的定义与分类
• 1952年 Martin等发明了气液色谱法 • 1952年 Martin 和 Synge 获得诺贝尔化学奖
A.J.P. Martin
R.L.M. Synge
气相色谱仪
色谱法的发展
• 1957年Goley开创了毛细管气相色谱 • 1960年代末出现高效液相色谱法 • 1980年代超临界流体色谱得到发展 • 1980年代Jorgeson发展了高效毛细管电泳 • 1990年代后期毛细管电色谱得到重视和
复杂体系
样品制备
分离
检测
SP(M)E 等
GC, HPLC, CE, CEC, micro-TAS……
发展趋势
• 进一步发展高效分离技术 • 小型化、微型化、自动化 • 各种联用技术 • 样品处理技术 • 高通量
超高效液相色谱（UPLC）
chromatogram obtained under isocraticconditions on a 43 cm long capillary column packed with 1.0 µm non-porous C18 particles (Eichrom Scientific).
• 与传统电泳技术及现代色谱技术相比：
– 仪器简单、操作方便、易自动化 – 分离效率高(105 - 107 块/m) 、分析速度快 – 操作模式多 – 实验成本低，消耗少 – 重现较差，分析结果误差大
毛细管电泳示意图
多维气相色谱
全二维气相色谱
全二维气相色谱
液相色谱－气相色谱联用
液相色谱－气相色谱联用
发展
高效液相色谱仪
毛细管电泳仪
液相色谱分离速度的变化
色谱法的现状和未来
• 气相色谱和高效液相色谱发展最好
• 超临界流体色谱处于失利地位
• 毛细管电泳与毛细管电色谱处于研究阶 段,进入部分应用领域
气相色谱和高效液相色谱发展最好
• 气相色谱仪及备件 – 全球市场: 约10亿美元/年; 3-4%年增长
• 高效液相色谱仪及备件 – 6-8%年增长
超临界流体色谱处于失利地位
• 发展晚于GC和HPLC • 虽然具有一些独特用途，但大多数功能
可由GC和HPLC代替
毛细管电泳与毛细管电色谱
• 为基因组学研究作出了杰出贡献 • 目前存在的主要问题：
– 分析结果偏差大 – 比HPLC大一个数量级 • 机遇：分离分析生物大分子
固相微萃取技术
Fig.1-5 Desorption chamber for coupling SPME to HPLC
Fig.1-6 Commercially available interface of SPMEHPLC (Supelco)
固相微萃取技术
固相微萃取技术
固相微萃取技术
Monolithic capillary
色谱分离原理详解演示文稿
优选色谱分离原理
一、 色谱发展简史
• 色谱法的出现 • 色谱法的发展 • 色谱法的现状和未来？
色谱法的出现
• 1903年 Tswett （茨维特）研究植物叶子组成时发明了 色谱法
色谱法的出现
• 1903年 Tswett （茨维特）研究植物叶子组成时发明了 色谱法
1906年 Tswett 的研究成果发表
橄榄油有机酸
来自百度文库
液相色谱－液相色谱联用
液相色谱－液相色谱联用模式
• 同模式 LC–LC • 多模式 LC–LC • 全二维 LC
– (i) 样品的每一部分均经过二维分离。 – (ii)样品的所有组分等比例经过二维分离。 – (iii) 第一维具备分离能力。
全二维 LC
固相微萃取技术
Fig.1-2 SPME construction
超高效液相色谱（UPLC）
The sample was run using constant-flow pumps at 52 000 psi on a 38cm long capillary packed with 1.0 µm C18 particles.
芯片液相色谱
ZORBAX 300SBC18 5 µm particles H.-F. Yin et al., presented at the 18th International Symposium on Microscale Separations and Analysis, HPCE, San Diego, January 2003.
多肽分离图
自动化
分离分析新技术简介
• 毛细管电泳 • 全二维气相色谱 • 液相色谱－气相色谱联用 • 液相色谱－液相色谱联用 • 色谱－质谱联用* • 样品处理技术
毛细管电泳
毛细管电泳是指溶质以电场为推动力， 在毛细管中按淌度差别而实现的高效、 快速分离的新型电泳技术。
高效毛细管电泳的特点
• Chromatographie (德语） • Chromatography (英语） • 色谱 • 玻璃管=“色谱柱”column • 碳酸钙=“固定相”stationary phase • 石油醚=“流动相”mobile phase
色谱法的发展
• 1931年 Kuhn 等用氧化铝和碳酸钙分离了α,β-,γ-胡萝卜素等60多种植物色素
成功的定量分析方法应具备的基本条件
• 易于使用，操作费用低
• 能够得到准确、可重复的定量结果
• 要能够解决至少一个分析化学中的重要 问题
色谱法在工业生产和科学研究中的作用
• 1930-1940年代为分离复杂的生物组成发挥了独 特作用
• 1950年代为石油工业的发展作出了贡献 • 1960-1970年代成为石油化工、化学工业等部门
的分析检测手段 • 目前，色谱法已成为生命科学、医药科学、环
境科学、材料科学、食品科学、法庭科学以及 航天科学等研究领域的重要手段
面临的问题
• 当今化学、生命科学、环境科学等研究 领域中备受人们关注的热点问题，如蛋 白质组学、代谢组学中的分离分析问题 的解决，医学中的药理、药物代谢研究 和疾病标记物研究，天然产物有效成分 的分离分析，食品安全，毒品、兴奋剂 等快速检测等等。
专利申请号：200520095986.1
固相微萃取技术
三、 色谱法的定义与分类